【求助】如何克隆基因的全长编码序列
2021-07-23
问题描述:
我现在需要克隆一个基因的全长编码序列,不知道该怎么办?能教教我吗?还有,我想请教一下,有没有什么网站可以明了的查到某种动物一个基因的外显子数目?谢谢了!
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dtlxj76
用户
1.上NCBI网站差该基因的cDNA序列,当然还有物种区别,比如你要克隆人的基因,就查人的该基因的cDNA序列,2.然后设计该基因的上下游引物。3.提取该种组织的RNA,可用Trizol法4.反转录成cDNA,5.利用反转录的cDNA为模板,PCR扩增目的基因,6.将其克隆到载体上。大致思路是这样的,当然,还有很多细节,遇上再说。还是在NCBI网站上有。
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胡长圣
用户
我也做的和你的差不多,也是要克隆一个基因,请问扩增出来的怎么知道是全长呢?而且怎么知道克隆的就是你想要的东西?
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