品牌咨询
我是上周开始正式自己培养CD4CD8细胞的。有些问题请教。
1 我用密度梯度离心法分离了单个 核细胞后，用HANKS液洗涤两遍。1000r/min，每次试管底部有层白色膜状物，很多次，我加了1640液后，都无论振荡，或用吸管吹打都不能让它消失，在1640里象小头屑一样漂浮着。是不是1000r/min的速度还是太快，致使离心力太大，单个核细胞都给紧紧的粘在一起了？我打算调慢到800－900r/min,会不会影响单个核细胞的纯度呢？有没有其他好办法？
2 我用过尼龙柱法分离淋巴细胞，有人指点尼龙棉既不能太紧，也不能太松，要均匀，书上说是2cm的柱子就能分离2*10的7次方的细胞数，尼龙棉定量在40－70mg。是否有过来人指点一下。
3 我在24孔培养板上养CD4,CD8。92小时，不换培养液的。24小时后，孔眼里出现白色沉淀，静置稍久，沉淀聚集在孔眼中央，象八脚章鱼一样伸出一些触角，培养液是透明的。显微镜下观察是铺得密密麻麻搞不清是细胞还是别的什么，轻轻晃晃，则沉淀消失，培养液变浑浊。我吸取了一些，加了台盼兰和1640稀释。放到血球计数板上镜下观察，则只见到满视野的细胞。没见到真菌孢子。这些沉淀是不是战友们说的死细胞呢？还是我在制细胞悬液时没有将细胞吹打开的细胞团快呢？
1 我用密度梯度离心法分离了单个 核细胞后，用HANKS液洗涤两遍。1000r/min，每次试管底部有层白色膜状物，很多次，我加了1640液后，都无论振荡，或用吸管吹打都不能让它消失，在1640里象小头屑一样漂浮着。是不是1000r/min的速度还是太快，致使离心力太大，单个核细胞都给紧紧的粘在一起了？我打算调慢到800－900r/min,会不会影响单个核细胞的纯度呢？有没有其他好办法？
2 我用过尼龙柱法分离淋巴细胞，有人指点尼龙棉既不能太紧，也不能太松，要均匀，书上说是2cm的柱子就能分离2*10的7次方的细胞数，尼龙棉定量在40－70mg。是否有过来人指点一下。
3 我在24孔培养板上养CD4,CD8。92小时，不换培养液的。24小时后，孔眼里出现白色沉淀，静置稍久，沉淀聚集在孔眼中央，象八脚章鱼一样伸出一些触角，培养液是透明的。显微镜下观察是铺得密密麻麻搞不清是细胞还是别的什么，轻轻晃晃，则沉淀消失，培养液变浑浊。我吸取了一些，加了台盼兰和1640稀释。放到血球计数板上镜下观察，则只见到满视野的细胞。没见到真菌孢子。这些沉淀是不是战友们说的死细胞呢？还是我在制细胞悬液时没有将细胞吹打开的细胞团快呢？
我要咨询
最新动态
2020-06-22
2020-07-02
2020-07-18
2020-08-07
2020-10-02
▍
官网分类
▍
品牌问答
暂无品牌问答
