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TABAS03KIT,TwistAmp Basic

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  • DNA amplification made possible with a TwistAmp® Basic kit. Contains all the enzymes and reagents necessary for the amplification of DNA,the user needs only supply primers and template. Even PCR primers can work using TwistAmp® Basic.  TwistAmp® Basic has been used for solid-phase, tailed primers, aptamers, electrochemistry and microarray applications. See manual for more information. Click to order oligonucleotides.

    Perfect for: End-point gel electrophoresis DNA detection, down-stream applications (e.g. sub-cloning)

    Product code: TABAS03KIT

    Product manual: TwistAmp Basic Kit Quick Guide (INTABAS)

    当时第一次看到这个技术的时候,简直可以用“震惊”、“惊艳”来形容。扩增速度真快啊,十几分钟就能出结果,比现在吭哧吭哧做PCR岂不是方便多了!可是几年过去了,似乎也没看到基于RPA技术的临床产品上市。说真的是有点失望的。就像对一部大导演拍的电影满怀期待,看完了发现其实不咋地是一样的心情。

     一、TwistDx公司的RPA技术 重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA)具体原理不再介绍。2006年发明,到目前为止开发了一系列产品,都用在科研上。发表的论文也有一些,病原体检测、动植物检测都有。 网上搜索了一番,发现整个2019年都没什么新闻,TwistDx官网的News板块还停留在2018年四月。公司被雅培收购以后,没什么动静。 按理说这么优秀的技术,这么多年过去了,不应该没出临床产品。什么原因?成本高?(真正好的技术成本高点也无妨)专利?(不愿意授权给别的厂家共同开发产品?)技术本身准确性不如新闻说得那么好?雅培根本不重视这个方向?不得而知。 

    二、等温扩增的技术难点 笔者曾经接触过LAMP等温扩增一段时间。LAMP引物难设计,非特异扩增(假阳性)难消除;对实验条件要求不高,恰恰造成了容易污染实验环境;扩增时间跟样本浓度有关,低浓度样本扩增时间很长,跟荧光PCR相比时间上差不多。最终因为非特异扩增问题项目不了了之。

     三、国产等温扩增产品 目前国内等温扩增科研产品不少,获得注册证的产品并不多。 1. 等温扩增微流控芯片 北京某公司产品,LAMP方法,一次检测多种病原体。曾遇到某医生对这个仪器赞不绝口,使用方便,灵敏度较高。 2. RNA恒温扩增 上海某公司产品。据医生介绍(两年前),灵敏度不如荧光PCR法,结果不是很稳定。相信这两年产品性能已经有了改进。 3. 恒温扩增-层析法 武汉某公司产品。做成了POCT产品,操作简便。如果能家用就更好了,感冒了在家里测一下,也省得去医院。但不知是如何规避污染问题的,卡盒如果没有密封措施,容易造成气溶胶污染。  

    四、小结 现在临床上荧光PCR使用广泛,既有大型的自动化工作站,也有小型的POCT产品。单纯靠等温扩增作为亮点并没有那么容易进入医院。不管是等温扩增还是荧光PCR,一个好产品最重要的还是结果准确、操作简便。有的技术号称扩增只需十几分钟,结果需要手工提取核酸花上一个小时,一样不实用。 除了医疗用途,食品、畜牧等行业咱不懂,就不做评论。 

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