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TwistDx/TwistAmp® Liquid Basic/TALQBAS01
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产品说明
DNA amplification in a flexible liquid format. Contains all the enzymes and reagents necessary for the amplification of DNA, the user need only supply primers, dNTPs and template. See manual for more information. Click to order oligonucleotides.Perfect for: • End-point gel electrophoresis DNA detection • down-stream applications (e.g. sub-cloning) • facilitating use of different RPA reaction volumes, or variation of component ratios.Product code: TALQBAS01Product manual: TwistAmp Liquid Basic Quick Guide (INLQBAS)

当时第一次看到这个技术的时候,简直可以用“震惊”、“惊艳”来形容。扩增速度真快啊,十几分钟就能出结果,比现在吭哧吭哧做PCR岂不是方便多了!可是几年过去了,似乎也没看到基于RPA技术的临床产品上市。说真的是有点失望的。就像对一部大导演拍的电影满怀期待,看完了发现其实不咋地是一样的心情。

 一、TwistDx公司的RPA技术 重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA)具体原理不再介绍。2006年发明,到目前为止开发了一系列产品,都用在科研上。发表的论文也有一些,病原体检测、动植物检测都有。 网上搜索了一番,发现整个2019年都没什么新闻,TwistDx官网的News板块还停留在2018年四月。公司被雅培收购以后,没什么动静。 按理说这么优秀的技术,这么多年过去了,不应该没出临床产品。什么原因?成本高?(真正好的技术成本高点也无妨)专利?(不愿意授权给别的厂家共同开发产品?)技术本身准确性不如新闻说得那么好?雅培根本不重视这个方向?不得而知。 

二、等温扩增的技术难点 笔者曾经接触过LAMP等温扩增一段时间。LAMP引物难设计,非特异扩增(假阳性)难消除;对实验条件要求不高,恰恰造成了容易污染实验环境;扩增时间跟样本浓度有关,低浓度样本扩增时间很长,跟荧光PCR相比时间上差不多。最终因为非特异扩增问题项目不了了之。

 三、国产等温扩增产品 目前国内等温扩增科研产品不少,获得注册证的产品并不多。 1. 等温扩增微流控芯片 北京某公司产品,LAMP方法,一次检测多种病原体。曾遇到某医生对这个仪器赞不绝口,使用方便,灵敏度较高。 2. RNA恒温扩增 上海某公司产品。据医生介绍(两年前),灵敏度不如荧光PCR法,结果不是很稳定。相信这两年产品性能已经有了改进。 3. 恒温扩增-层析法 武汉某公司产品。做成了POCT产品,操作简便。如果能家用就更好了,感冒了在家里测一下,也省得去医院。但不知是如何规避污染问题的,卡盒如果没有密封措施,容易造成气溶胶污染。  

四、小结 现在临床上荧光PCR使用广泛,既有大型的自动化工作站,也有小型的POCT产品。单纯靠等温扩增作为亮点并没有那么容易进入医院。不管是等温扩增还是荧光PCR,一个好产品最重要的还是结果准确、操作简便。有的技术号称扩增只需十几分钟,结果需要手工提取核酸花上一个小时,一样不实用。 除了医疗用途,食品、畜牧等行业咱不懂,就不做评论。 

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