原代细胞免疫荧光鉴定步骤【赛百慷】
为了更好的帮助客户提供真实的原代细胞，使用免疫荧光鉴定出提取的细胞类型，免疫荧光技术又称荧光抗体技术，是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。该技术的主要特点是：特异性强、敏感性高、速度快。一下是赛百慷技术人员提供的免疫荧光细胞鉴定的步骤，仅做参考：
取4片玻璃片于24孔板中，每孔加入培养基1mL，加入细胞0.02million个/孔。置培养箱2h或过夜。
2.固定
细胞爬片后，吸出培养基，用PBS洗一遍，加入4%PFA于4℃固定30min。用PBS洗3×5min/次。也可最后一次不吸出PBS，放4℃过夜。
3.破膜封闭
将玻片除去水分，置于培养皿支撑物上，
玻璃片封闭液配置：0.5%TritionX-100与PBS1:1混合，再加10%血清，
取50uL破膜封闭液滴于防水膜上，将玻片上有细胞的一面盖上2h。
4.一抗孵育
一抗配置：抗体与PBS1:100（200）稀释
破膜后，取50uL一抗于防水膜上（湿盒中），将玻片有细胞的一面盖上置于4℃（最多可放置一周）
阴性对照组可用PBS代替一抗。
5.二抗孵育
PBS洗3×5min/次，
二抗混合液配置：二抗：PBS=1:500
DAPI:PBS=1:1000
防水膜上滴50uL二抗混合液，盖上玻片，避光，室温放置2h。
6.包埋
PBS洗3×5min/次，玻片上各滴1滴Fluoromount-G，将有细胞的一面盖上。
免责声明 本文仅代表作者个人观点，与本网无关。其创作性以及文中陈述文字和内容未经本站证实，对本文以及其中全部或者部分内容、文字的真实性、完整性、及时性本站不做任何保证或承诺，请读者仅作参考，并请自行核实相关内容。
版权声明 未经蚂蚁淘授权不得转载、摘编或利用其他方式使用上述作品。已经经本网授权使用作品的，应该授权范围内使用，并注明“来源：蚂蚁淘”。违反上述声明者，本网将追究其相关法律责任。
发布于 ： 2021-09-23
阅读（150）
▍
相关分类
▍
相关文章
原代细胞_细胞_iPS细胞_细胞培养基_CRO细胞实验赛百慷(上海)生物...
techno 三行代码
CH2=CHCH2CN Database
我做检查肝功能正常,乙肝有抗体,但b超肝回声粗糙,单笔后0.4c? 爱问知...
植物氧化应激活性氧(ROS)鲁米诺化学发光法定量检测试剂盒
酶切常见问题
ViteX的去中心化是如何实现的？ 区块网
大鼠醛固酮(ALD)ELISA试剂盒使用说明书_中国教育装备采购网
HP Gen10 MicroServer 篇一：#原创新人#惠普 HP Gen10 ...
解读意大利IPC集团及Gansow的神秘面纱
【空气化工AirProduct】空气化工AirProduct型号_空气化工 ...
Chisso
