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原代细胞分离提取

来自 : mayitao

提供商：	无锡英纽瑞生物医药科技有限公司
服务名称：	原代细胞分离提取

一、原代细胞的分离提取服务介绍
原代细胞（primaryculturecell）是指从机体取出后立即培养的细胞。有人把培养的第1代细胞与传10代以内的细胞统称为原代细胞培养。原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究，如蛋白质组学、基因组学、细胞株（系）研究、DNA，RNA和遗传学研究等，还可应用于当今热门的生物医药产业如药物筛选、药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究等。原代细胞在生物医药领域有不可替代性作用。

二、原代细胞的分离提取服务内容

（一）机械分散法
1、纤维成分很少的脑组织，部分胚胎组织，用剪刀剪碎至1mm3的组织块。
2、用PBS清洗两次后
①用吸管吹打，分散组织细胞。
②或将已充分剪碎分散的组织放在注射器内（用九号针），使细胞通过针头压出。
③或在不锈钢纱网内用钝物（注射器钝端）压挤使细胞从网孔中压挤出。
3、收集细胞转入离心管中，1000rpm/分钟离心5分钟。
4、去上清，加入含血清的培养基，重悬后移至培养瓶中培养。
（二）消化分离法
1、酶消化分离法（过夜冷消化法）

①细胞间质较少的软组织，如肝、肾、甲状腺、羊膜、胚胎组织、上皮组织等，用Hanks液清洗组织三次，剪成碎块大小为4毫米左右。
②再用Hanks液洗2-3次以除去血球和脂肪组织。
③加入0.25%的胰蛋白酶，摇匀后放4℃过夜。
④次日再用Hanks液洗涤，弃去上清，共洗2-3次。
⑤加入少量含血清的培养基吹打分散，细胞计数，按适当的浓度分瓶培养。

2、非酶消化法（EDTA消化法）
①把组织块剪碎，呈1mm3大小的组织块。
②将碎组织块在平皿中用无钙镁PBS洗2-3次。
③加入消化液（胰蛋白酶或胶原酶或EDTA）于37℃水浴中作用适当时间（中间可轻摇1~2次），若组织块膨松呈絮状可终止，若变化不大可更换一次消化液，继续消化直至膨松絮状为止。
④弃去上清，加入含有钙、镁离子的培养基中止消化反应，并洗涤2-3次后，加入完全培养基。
⑤用吸管吹打，使细胞充分散开后用纱网过滤后分瓶培养。

三、原代细胞分离提取服务说明
1、明确告知所需种属的某个部位细胞；
2、所需细胞量；
3、纯度的要求；
4、若另有疑问欢迎向本公司咨询，我们将竭诚为您服务。

四、质量承诺
1.真实的发货原始图片；
2.权威的实验报告；
3.详细的实验步骤

五、期待您的真诚咨询