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新手一枚,想知道怎么养好胚胎干细胞
2017-08-30
问题描述:

第一次养胚胎干细胞,复苏的时候复苏到六孔板中的其中一个孔中,结果发现细胞很多,于是换了两个6cm皿养,结果越养越少。很纳闷。请教了几位蚂蚁淘的前辈们,于是乎有几个问题还是在心中,希望还能在这里能得到答复。

1。培养细胞的时候是一定要在六孔板中吗?那一般复苏细胞的时候复苏到几个孔中呢?

2.细胞的密度是大概多少呢?

3.我用的基质胶,说明书上是1;80,结果在孵箱放了一小时后,发现没有想象的胶凝固的样子,没有像果冻那样。反而还是液体状的,这是能用还是不能用呢?

4.如果基质胶一开始就铺好,等到传代的时候再铺,中间每天都在换液,不容易污染吗?

5。刚复苏的细胞,一直漂浮在培养液里,是慢慢地细胞才会贴在基质胶上么,然后才会慢慢在基质胶上生长么?

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实验先呆
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展开引用实验先呆 第一次养胚胎干细胞,复苏的时候复苏到六孔板中的其中一个孔中,结果发现细胞很多,于是换了两个6cm皿养,结果越养越少。很纳闷。请教了几位蚂蚁淘的前辈们,于是乎有几个问题还是在心中,希望还能在这里能得到答复。1。培养细胞的时候是一定要在六孔板中吗?那一般复苏细胞的时候复苏到几个孔中呢? 2.细胞的密度是大概多少呢? 3.我用的基质胶,说明书上是1;80,结果在孵箱放了一小时后,发现没有想象的胶凝固的样子,没有像果冻那样。反而还是液体状的,这是能用还是不能用呢?4.如果基质胶一开始就铺好,等到传代的时候再铺,中间每天都在换液,不容易污染吗?5。刚复苏的细胞,一直漂浮在培养液里,是慢慢地细胞才会贴在基质胶上么,然后才会慢慢在基质胶上生长么?......
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绿野仙山
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我养的是间充质干细胞,不知道对你有没有用。细胞培养不一定是要在孔板里面,用什么东西去培养是取决于自己要求。细胞一般是两小时就可以贴壁了,贴壁后就开始生长,还要确认分离培养的是不是自己所需要的干细胞。如果越传代越少的话可以考虑原因:1.缺少生长因子,生长条件不合适。2.是否染菌。3.细胞密度是不是太低了导致其生长不起来,因为干细胞有细胞密度的要求。
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追风筝的July
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展开引用绿野仙山我养的是间充质干细胞,不知道对你有没有用。细胞培养不一定是要在孔板里面,用什么东西去培养是取决于自己要求。细胞一般是两小时就可以贴壁了,贴壁后就开始生长,还要确认分离培养的是不是自己所需要的干细胞。如果越传代越少的话可以考虑原因:1.缺少生长因子,生长条件不合适。2.是否染菌。3.细胞密度是不是太低了导致其生长不起来,因为干细胞有细胞密度的要求。......您好,咨询一下您,您在进行间充质干细胞传代时,铺板密度大概是多少?
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绿野仙山
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如果我用的是58的平皿长满,就按照1:5的比例传代
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实验先呆
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展开引用绿野仙山我养的是间充质干细胞,不知道对你有没有用。细胞培养不一定是要在孔板里面,用什么东西去培养是取决于自己要求。细胞一般是两小时就可以贴壁了,贴壁后就开始生长,还要确认分离培养的是不是自己所需要的干细胞。如果越传代越少的话可以考虑原因:1.缺少生长因子,生长条件不合适。2.是否染菌。3.细胞密度是不是太低了导致其生长不起来,因为干细胞有细胞密度的要求。......间充质干细胞是不是也要用基质胶先包被呢?加到皿里的基质胶在两个小时之后是不是就变成果冻状的了?我的基质胶加进去,两小时以后还是液体状,加进去多少,还能吸出多少,这个胶是起作用了没?
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实验先呆
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展开引用绿野仙山我养的是间充质干细胞,不知道对你有没有用。细胞培养不一定是要在孔板里面,用什么东西去培养是取决于自己要求。细胞一般是两小时就可以贴壁了,贴壁后就开始生长,还要确认分离培养的是不是自己所需要的干细胞。如果越传代越少的话可以考虑原因:1.缺少生长因子,生长条件不合适。2.是否染菌。3.细胞密度是不是太低了导致其生长不起来,因为干细胞有细胞密度的要求。......干细胞的密度要求大概是多少呢
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实验先呆
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实验先呆间充质干细胞是不是也要用基质胶先包被呢?加到皿里的基质胶在两个小时之后是不是就变成果冻状的了?我的基质胶加进去,两小时以后还是液体状,加进去多少,还能吸出多少,这个胶是起作用了没?我不是等到它长好了才放到另一个皿的,是在复苏的第二天就换皿了。一开始我以为干细胞在培养液里悬浮生长,贴壁到基质胶上的细胞是分化的细胞,结果我每天都换基质胶,每天都要把细胞导入一个新的皿里,细胞就越来越少了?请问,前辈我的做法和想法有什么错误?
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绿野仙山
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你的要确定这个干细胞类型在这个培养基里面是悬浮的还是贴壁的。我还有一种情况就是分离干细胞的时候,需要两种细胞,在同一种培养里面一个贴壁,一个悬浮。过夜后收集上清离心,把悬浮的细胞收集后换成另外一种培养基它是贴壁的
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绿野仙山
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然后贴壁的那个干细胞做分化鉴定来确定它就是自己想要的细胞
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实验先呆
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你的意思就是说干细胞有的是贴壁的,有的是悬浮培养的,先要确定是哪种的?我的是人体胚胎干细胞
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在水一方杨
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有没有人养过内皮祖细胞
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