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Description
RNAscope® Intro Pack for Multiplex Fluorescent Reagent Kit v2- Mm recommended for new users getting started with RNAscope assay on mouse samples. It includes required materials such as: RNAscope® Multiplex Fluorescent Reagents Kit ,FFPE Control Slide Pack -Mouse 3T3 Cell Pellet (PN 310023),Hydrophobic Barrier Pen (PN 310018), RNAscope® 3-plex Positive Control Probe_Mm(PN 320881), RNAscope® 3-plex Negative Control Probe(PN 320871) and RNAscope® Probe Diluent (300041). Users can use the control slides and the probes, to get familiar with the assay workflow and staining results. Opal fluorophores from Akoya Biosciences must be purchased separately (Opal 520, PN FP1487001KT; Opal 570, PN FP1488001KT; Opal 690, PN FP1497001KT).Sample Type Compatibility
Adherent cells, Cell pellets, CTC, FFPE, Fixed frozen tissue, Fresh frozen tissue, PBMC"s, TMARNAScope Workflow
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Specifications
Shipping temperature(°C): 4 °C Storage temperature(°C): 4 °C Shelf life: 9 months from the date of manufacturing. - * Please check expiration dates on the reagent package
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第一次养胚胎干细胞,复苏的时候复苏到六孔板中的其中一个孔中,结果发现细胞很多,于是换了两个6cm皿养,结果越养越少。很纳闷。请教了几位蚂蚁淘的前辈们,于是乎有几个问题还是在心中,希望还能在这里能得到答复。
1。培养细胞的时候是一定要在六孔板中吗?那一般复苏细胞的时候复苏到几个孔中呢?
2.细胞的密度是大概多少呢?
3.我用的基质胶,说明书上是1;80,结果在孵箱放了一小时后,发现没有想象的胶凝固的样子,没有像果冻那样。反而还是液体状的,这是能用还是不能用呢?
4.如果基质胶一开始就铺好,等到传代的时候再铺,中间每天都在换液,不容易污染吗?
5。刚复苏的细胞,一直漂浮在培养液里,是慢慢地细胞才会贴在基质胶上么,然后才会慢慢在基质胶上生长么?
干细胞的分类:
一) 根据个体发育过程中出现的先后次序不同,干细胞又可分为胚胎干细胞和成体干细胞。
(1)胚胎干细胞,它是一种高度未分化细胞。它具有发育的全能性,能分化出成体动物的所有组织和器官,包括生殖细胞。
(2)成体干细胞,它是存在于成年动物的许多组织和器官,比如表皮和造血系统,具有修复和再生的能力的细胞。在特定条件下,成体干细胞或者产生新的干细胞,或者按一定的程序分化,形成新的功能细胞,从而使组织和器官保持生长和衰退的动态平衡。
二)按分化潜能的大小,干细胞还可分为全能性干细胞、 多能性干细胞、单能干细胞等三种类型:
(1)全能性干细胞,它具有形成完整个体的分化潜能。如胚胎干细胞(简称ES细胞),具有与早期胚胎细胞相似的形态特征和很强的分化能力,可以无限增殖并分化成为全身200多种细胞类型,进一步形成机体的所有组织、器官。人类的全能干细胞可以分化成人体的各种细胞,这些分化出的细胞构成人体的各种组织和器官,最终发育成一个完整的人。人类的精子和卵子结合后形成受精卵,这个受精卵就是一个最初始的全能干细胞。
(2)多能性干细胞,这种干细胞具有分化出多种细胞组织的潜能,但却失去了发育成完整个体的能力,发育潜能受到一定的限制,骨髓多能造血干细胞是典型的例子,它可分化出至少十二种血细胞,但不能分化出造血系统以外的其它细胞。
(3)单能干细胞(也称专能、偏能干细胞),这类干细胞只能向一种类型或密切相关的两种类型的细胞分化,如上皮组织基底层的干细胞、肌肉中的成肌细胞或叫卫星细胞。
全能干细胞具有能发育成各种组织器官的完整个体的潜能的细胞,如胚胎干细胞。多能干细胞没有发育成完整个体的能力,但具有分化出多种细胞组织的能力,主要在器官再生、修复和疾病治疗方面极具应用价值,多能干细胞还在研究当中,过去认为多能干细胞只能从人胚胎中获得,现在已能用体细胞转化为多能干细胞。
单能干细胞只能向一种类型或密切相关的两种类型的细胞分化,如上皮组织基底层的干细胞、肌肉中的成肌细胞。
1. 干细胞本身不是终末分化细胞(即干细胞不是处于分化途径的终端);
2. 干细胞能无限增殖分裂;
3. 干细胞可连续分裂几代,也可在较长时间内处于静止状态;
4. 干细胞分裂产生的于细胞只能在两种途径中迭择其一或保持亲代特征,仍作为干细胞;或不可逆地向终末分化。
由
于细胞质中的调节分化蛋白不均匀地分配,使得一个子细胞不可逆地走向分化的终端成为功能专一的分化细胞;另一个保持亲代的特征,仍作为干细胞保留下来。分
化细胞的数目受分化前干细胞的数目和分裂次数的控制,可以说,干细胞是具多向潜能和自我更新特点的增殖速度较缓慢的细胞
原代培养效果很好,第四天便成典型梭形鱼群状生长;第六天传代
但传代后细
胞形态发生改变,属于正常吗,请大神知道,初次培养;万分感谢
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