愈伤组织的分化
一、目的要求了解愈伤组织再分化原理，学习诱导愈伤组织分化的方法。二、基本原理愈伤组织在离体培养过程中，组织和细胞的潜在发育能力可以在某种程度上得到表达，伴随着反复的细胞分裂，又开始新的分化。将脱分化的细胞团或组织经重新分化而产生出新的具有特定结构和功能的组织或器官的一种现象，称为再分化。 在一定的培养条件下，愈伤组织通过分化可以形成苗或根的分生组织甚至是胚状体，继而发育成完整的小植株（图3－1）。 三、器材1．材料：非洲紫萝兰叶片愈伤组织，胡萝卜块根胚性愈伤组织。2．实验用品：(1)NAA、BA、琼脂、蔗糖、2,4-D、IBA等(2)分化培养基Ⅰ（生芽）:MS+NAA0.1mg/L＋BA1mg/L＋蔗糖3g/L＋琼脂0.8g/L，pH5.8。(3)分化培养基Ⅱ（生根）:MS+IBA1mg/L＋蔗糖3g/L＋琼脂0.8g/L，pH5.8。3．器具：各种接种工具、超净工作台。四、操作步骤1.按照培养材料的要求，分别配制诱导愈伤组织生芽培养基或生根培养基。2.培养基和接种工具消毒，准备无菌水和无菌纸。3.在酒精灯旁，小心从愈伤组织容器瓶中，挑选出愈伤组织3～5块，放置到分化培养基中，盖上盖后写上接种日期、外植体名称和培养基成分。4.在培养室中培养，2周后统计愈伤组织分化情况。五、实验报告1．记录胡萝卜肉质根胚性愈伤组织或非洲紫罗兰叶片愈伤组织，在接入分化培养基培养2周后新生芽发生和生长的状况，计算分化率。分化率（%)=（生芽愈伤组织块数／接种愈伤组织总块数）×100％2.记录愈伤组织培养10天后，发生不定根的情况，计算生根率（%):生根率（%)=（生根愈伤组织块数／接种愈伤组织总块数）×100%
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发布于 ： 2018-12-26
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