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eEnzyme是一家美国高质量生物学试剂及检测试剂盒品牌供应商，其与美国国立卫生研究院合作紧密，在全球范围内为广大科研客户提供高品质的产品与技术服务，其主要生产销售高质量的抗体和用于传染病研究的抗体/抗原，细胞因子蛋白，pcr产品等用于分子和细胞生物学研究的生物试剂，产品应用于生物技术研究，制药，药物发现，癌症研究，传染性疾病，微生物和分子诊断等众多生命科学技术领域
eENZYME为科学界生产和销售高质量的生物试剂盒和生物分析试剂盒。与NIH密切合作以保证产品在生命科学研究的多个领域成功地使用。努力提供新颖价廉且有效的工具，使实验更容易成功。产品在科研、生物技术、制药和政府的研究实验室中得到广泛的应用，包括药物发现、癌症研究、传染病研究、微生物学和分子诊断。
【简单介绍】eENZYME生产销售高质量的抗体和用于传染病研究的抗体/抗原，细胞因子蛋白，PCR产品等用于分子和细胞生物学研究的生物试剂，产品应用于生物技术研究，制药，药物发现，癌症研究，传染性疾病，微生物和分子诊断等众多生命科学技术领域。【详细说明】欢迎eENZYMEeENZYME生产销售高质量的抗体和用于传染病研究的抗体/抗原，细胞因子蛋白，PCR产品等用于分子和细胞生物学研究的生物试剂，产品应用于生物技术研究，制药，药物发现，癌症研究，传染性疾病，微生物和分子诊断等众多生命科学技术领域。 Ë ENZYMEis的高品质生物试剂及实验室设备科学界一个制造商和分销商。我们密切合作，与美国国立卫生研究院的社区，以保证我们的产品生命科学研究在广泛领域的成功表现。我们致力于提供创新和具有成本效益的工具，使您更容易取得成功。我们的产品用于在学术，生物技术，制药和政府研究实验室，包括药物发现，癌症研究，传染病研究，微生物学和分子诊断许多不同的应用。公司网站：www.eenzyme.com 目录号描述产品类型应用单位供应商IA-01SW-0100抗HA（A/California/06/09）（甲型H1N1流感）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-011-0100抗H1（H1N1/Pan）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-001-0100抗HA1（A/新喀里多尼亚）（甲型H1N1流感）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-023-0100抗-NP（A/新Caledonia/20/1999）（甲型H1N1流感兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-022-0100抗M2型（H1N1/A/新喀里多尼亚（H1N1））兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-004A-0100抗-H3（H3N2）（A/WIS/2005）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-0100抗-M1（H3N2）[A/Wyoming/3/03）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-004-0100抗HA（H3N2）[A/Wyoming/3/03）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-020-0100抗-NA（H3N2）[A/Wyoming/3/03）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-005H-0100抗H5（A/香港Kong/483/97）（H5N1）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-005-0100抗HA1（H5N1）（A/Vietnam/1203/2004）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-006-0100抗HA1（H5N1，禽流感）（A/斑头雁/Qinghai/12/05）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-010-0100抗-HA2（A/Vietnam/1203/2004）（H5N1）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-012-0100抗-M1（A/Vietnam/1203/2004）（H5N1）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-021-0100抗-NA（A/Vietnam/1203/2004）（H5N1，人）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-025-0100抗NS1（A/Vietnam/1203/2004）（H5N1）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-0100抗HA1（A/Chicken/NY/29878/91）（H2N2）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-009-0100抗HA1（A/chicken/HongKong/NT366/03）（H9N2）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-027-0100抗-NA（A/Chicken/HongKong/NT366/03）（H9N2）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-007-0100抗HA1（A/duck/Hainan/6/2004）（H6N2）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-008-0100抗HA1（A/鸡/荷兰/2/03）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-028-0100抗-NA（A/Chicken/Netherlands/1/03）（H7N7）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-0015-0100抗-H11（A/duck/Yangzhou/906/02）（H11N2）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-0031抗B型流感（NP）的多克隆兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-0032抗B型流感（医管局）多克隆兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-013-0100抗-H12（A/pintail/Alaska/102/05）（H12N5）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-014-0100抗-H4（A/environment/Maryland/1101/06）（H4N6）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-018抗-H15（A/Australia/83/00（H15N8））兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-019抗-H16（A/Sweden/99（H16N3））兔多克隆抗体WB等100微克eENZYME目录号描述产品类型应用单位供应商IA-01SW-0100抗HA（A/California/06/09）（甲型H1N1流感）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-011-0100抗H1（H1N1/Pan）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-001-0100抗HA1（A/新喀里多尼亚）（甲型H1N1流感）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-023-0100抗-NP（A/新Caledonia/20/1999）（甲型H1N1流感兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-022-0100抗M2型（H1N1/A/新喀里多尼亚（H1N1））兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-004A-0100抗-H3（H3N2）（A/WIS/2005）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-0100抗-M1（H3N2）[A/Wyoming/3/03）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-004-0100抗HA（H3N2）[A/Wyoming/3/03）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-020-0100抗-NA（H3N2）[A/Wyoming/3/03）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-005H-0100抗H5（A/香港Kong/483/97）（H5N1）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-005-0100抗HA1（H5N1）（A/Vietnam/1203/2004）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-006-0100抗HA1（H5N1，禽流感）（A/斑头雁/Qinghai/12/05）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-010-0100抗-HA2（A/Vietnam/1203/2004）（H5N1）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-012-0100抗-M1（A/Vietnam/1203/2004）（H5N1）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-021-0100抗-NA（A/Vietnam/1203/2004）（H5N1，人）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-025-0100抗NS1（A/Vietnam/1203/2004）（H5N1）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-0100抗HA1（A/Chicken/NY/29878/91）（H2N2）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-009-0100抗HA1（A/chicken/HongKong/NT366/03）（H9N2）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-027-0100抗-NA（A/Chicken/HongKong/NT366/03）（H9N2）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-007-0100抗HA1（A/duck/Hainan/6/2004）（H6N2）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-008-0100抗HA1（A/鸡/荷兰/2/03）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-028-0100抗-NA（A/Chicken/Netherlands/1/03）（H7N7）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-0015-0100抗-H11（A/duck/Yangzhou/906/02）（H11N2）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-0031抗B型流感（NP）的多克隆兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-0032抗B型流感（医管局）多克隆兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-013-0100抗-H12（A/pintail/Alaska/102/05）（H12N5）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-014-0100抗-H4（A/environment/Maryland/1101/06）（H4N6）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-018抗-H15（A/Australia/83/00（H15N8））兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-019抗-H16（A/Sweden/99（H16N3））兔多克隆抗体WB等100微克eENZYME目录号描述产品类型应用单位供应商IA-01SW-0100抗HA（A/California/06/09）（甲型H1N1流感）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-011-0100抗H1（H1N1/Pan）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-001-0100抗HA1（A/新喀里多尼亚）（甲型H1N1流感）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-023-0100抗-NP（A/新Caledonia/20/1999）（甲型H1N1流感兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-022-0100抗M2型（H1N1/A/新喀里多尼亚（H1N1））兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-004A-0100抗-H3（H3N2）（A/WIS/2005）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-0100抗-M1（H3N2）[A/Wyoming/3/03）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-004-0100抗HA（H3N2）[A/Wyoming/3/03）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-020-0100抗-NA（H3N2）[A/Wyoming/3/03）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-005H-0100抗H5（A/香港Kong/483/97）（H5N1）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-005-0100抗HA1（H5N1）（A/Vietnam/1203/2004）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-006-0100抗HA1（H5N1，禽流感）（A/斑头雁/Qinghai/12/05）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-010-0100抗-HA2（A/Vietnam/1203/2004）（H5N1）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-012-0100抗-M1（A/Vietnam/1203/2004）（H5N1）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-021-0100抗-NA（A/Vietnam/1203/2004）（H5N1，人）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-025-0100抗NS1（A/Vietnam/1203/2004）（H5N1）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-0100抗HA1（A/Chicken/NY/29878/91）（H2N2）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-009-0100抗HA1（A/chicken/HongKong/NT366/03）（H9N2）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-027-0100抗-NA（A/Chicken/HongKong/NT366/03）（H9N2）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-007-0100抗HA1（A/duck/Hainan/6/2004）（H6N2）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-008-0100抗HA1（A/鸡/荷兰/2/03）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-028-0100抗-NA（A/Chicken/Netherlands/1/03）（H7N7）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-0015-0100抗-H11（A/duck/Yangzhou/906/02）（H11N2）兔多克隆抗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① 在构建载体时，目的基因直接整合到细胞染色体组上，最好不要通过先瞬转在筛选稳定细胞株的这种方法，因为转染效率没有保证
② 高表达载体的构建，哺乳动物表达量一直是它自身的缺点，最好根据高表达载体定向的驯化细胞，提高蛋白表达量
③ 细胞的选择，筛选稳定细胞株我们常用的细胞是CHO，中国仓鼠卵巢细胞，由于CHO具有诸多的优点因此适合用于筛选稳定细胞株，而HEK293细胞则常用于瞬时转染
④ 后期的筛选，双抗预防污染，筛选细胞的时候抗生素浓度一定要做预实验，而且转染的时候不能有抗生素，关于细胞转染 稳定细胞系构建的相关理论
细胞转染是指将外源分子如DNA，RNA等导入真核细胞的技术。随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展，转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具。在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中，其应用越来越广泛。
方法
脂质体转染法
阳离子脂质体表面带正电荷，能与核酸的磷酸根通过静电作用，将DNA分子包裹入内，形成DNA脂复合物，也能被表面带负电的细胞膜吸附，再通过融合或细胞内吞进入细胞。脂质体转染适用于把DNA转染入悬浮或贴壁培养细胞中，是目前实验室最方便的转染方法之一，其转染率较高，优于磷酸钙法。由于脂质体对细胞有一定的毒性，所以转染时间一般不超过24小时。常用细胞类型：cos-7 、BHK、NIH3T3 、Hela等。
电穿孔转染法
电流能够可逆地击穿细胞膜形成瞬时的水通路或膜上小孔促使DNA分子进入胞内，这种方法就是电穿孔。当遇到某些脂质体转染效率很低或儿乎无法转入时建议用电穿孔法转染。一般情况下，高电场强度会杀死50%-70% 的细胞。现在针对细胞死亡开发出了一种电转保护剂，可以大大的降低细胞的死亡率，同时提高电穿孔转染效率。
病毒感染
对于脂质体转染与电穿孔转染都无法成功转染的细胞系建议用病毒感染，此法可以快速100%感染，检测成功率高。
常用步骤
1. 转染试剂的准备
① 将400ul去核酸酶水加入管中，震荡10秒钟，溶解脂状物。
② 震荡后将试剂放在－20摄氏度保存，使用前还需震荡。
2. 选择合适的混合比例(1：1－1：2/脂质体[1]体积：DNA质量)来转染细胞。在一个转染管中加入合适体积的无血清培养基。加入合适质量的MyoD或者EGFP的DNA，震荡后在加入合适体积的转染试剂，再次震荡。
3. 将混合液在室温放置10―15分钟。
4. 吸去培养板中的培养基，用PBS或者无血清培养基清洗一次。
5. 加入混合液，将细胞放回培养箱中培养一个小时。
6. 到时后，根据细胞种类决定是否移除混合液，之后加入完全培养基继续培养24－48小时。
一种是脂质体转染后,单克隆筛选稳定细胞株.另外一种是应用逆转录病毒,慢病毒转染,筛选稳定细胞株.
脂质体转染：在转染24小时后,消化细胞并计数.将细胞种到96孔板,保证每个孔2-3个细胞,这样才能得到单克隆.待细胞贴壁后,加入抗生素筛选.筛选时间和浓度视细胞而定.一般G418一个星期作用,嘌呤霉素2-3天.
脂质体法筛单克隆时间较长,且效率低,大概只有1%.
病毒转染：先要用包装细胞,一般为293细胞,包装出病毒,再用病毒转染目的细胞.包装病毒视不同类型的病毒而定,一般要3-5天的时间.包装好的病毒要测滴度,根据滴度决定转染目的细胞的病毒量.转染目的细胞1-2天后加抗生素筛选得到稳定细胞株.
病毒转染得到稳定细胞株的效率高,只是步骤繁琐.
由于质粒的不兼容性,拥有同种复制子的质粒不能在同一细胞内稳定共存,经过几代的复制,会质粒丢失,所以并不是任何两个或两个以上质粒都可以在同一细胞内稳定存在,但是可以同时进入.
稳定转染的细胞株，就是转染后质粒可以稳定整合到基因组上不会因细胞分裂而丢失。区别于质粒瞬时转染不能长时间保留质粒在细胞里。
一种是脂质体转染后,单克隆筛选稳定细胞株.另外一种是应用逆转录病毒,慢病毒转染,筛选稳定细胞株.
脂质体转染：在转染24小时后,消化细胞并计数.将细胞种到96孔板,保证每个孔2-3个细胞,这样才能得到单克隆.待细胞贴壁后,加入抗生素筛选.筛选时间和浓度视细胞而定.一般G418一个星期作用,嘌呤霉素2-3天.
脂质体法筛单克隆时间较长,且效率低,大概只有1%.
病毒转染：先要用包装细胞,一般为293细胞,包装出病毒,再用病毒转染目的细胞.包装病毒视不同类型的病毒而定,一般要3-5天的时间.包装好的病毒要测滴度,根据滴度决定转染目的细胞的病毒量.转染目的细胞1-2天后加抗生素筛选得到稳定细胞株.
病毒转染得到稳定细胞株的效率高,只是步骤繁琐.
如果经费充足的话可以找公司包装病毒，如武汉的普健可以提供各种载体的构建及细胞株构建的技术服务。
至于到底好不好转就跟你的细胞有关了，和细胞是否是稳转株关系不大。
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