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细胞组分和细胞器——线粒体
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Labeling Microtubules (Molecular Dynamics Inc. )Microtubules are involved in many aspects of cell motion including propulsion, mitosis, growth, and organelle transport. They are composed of a- and ß-tubulin, and are about 25 nm in outer diameter. Microtubules are easily stained using an anti-tubulin primary antibody and a corresponding secondary antibody conjugated to any fluorochrome. Their regular s......阅读全文 抗原的制备方法 实验步骤一、抗原的提取 抗原的制备是一件十分细致的工作,要制备一个高纯度的抗原,需要付出艰巨的努力,制备工作涉及物理学、化学和生理学等许多领域的知识。根据物理或化学特性建立起来的分离、纯化方法的主要原理不外乎科二个方面:①利用混合物中几个组分分配率的差别将他们分配到可用机械方法分离的两或几个物相中 抗原的制备方法 实验概要除完整的细胞可作为抗原外,各种不同的细胞内存在的各种分子量不同的物质,也都具有全抗原或半抗原的性质,某种抗原物质可能是某一类细胞所特有的,可作为这种细胞的一个标志。由于细胞存在着许多性质不同的抗原物质,有时要从这众多的物质中提取、纯化某种抗原物质,以供科学研究之用。实验步骤一、抗原的提取 流式细胞术在高等植物研究中的应用 流式细胞术(Flow cytometry,简称FCM)是20世纪70年代发展起来的一种对细胞的物理性质及化学性质,如细胞大小、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等进行快速测定并可分类收集的技术。该技术超越了传统显微分析技术,能在瞬间对大量细胞进行准确的分析。这种快速有效的细胞分析技术已广泛应用于 完整的科研级线粒体提取方案详解 线粒体是一种双膜结合的细胞器,存在于大多数真核细胞中。线粒体的功能是提供细胞能量。此外,线粒体参与其他任务,如信号传递、细胞分化和细胞死亡,以及维持对细胞周期和细胞生长的控制。线粒体与多种人类疾病有牵连,包括线粒体疾病、心脏疾病、心力衰竭和孤独症。线粒体可能在这些细胞过程中发挥重要作用。 为您推荐高 Cell Metabol:惊人发现 细胞中或有专门制造脂肪的线粒体 千百年来,细胞中的细胞器—线粒体常常被视为细胞的能量工厂,在线粒体中,糖分和脂肪能被氧化成为能量,最近,来自加州大学洛杉矶分校(UCLA)的科学家们通过研究发现,并非所有的线粒体都是这样,在每个细胞中都有一组特殊的线粒体能够吸附脂肪滴,相比燃烧脂肪产生能量而言,这些特殊的线粒体主要负责提供能量来 蛋白质特性与分离纯化技术的选择 摘要:蛋白质的一级、二级、三级和四级结构决定了它的物理、化学、生物化学、物理化学和生物学性质,综述了不同蛋白质之间的性质存在差异或者改变条件是使之具有差异,利用一种同时多种性质差异,在兼顾收率和纯度的情况下,选择蛋白质提纯的方法。关键词:蛋白质 分离纯化前言 蛋白 蛋白质特性与分离纯化技术的选择 摘要:蛋白质的一级、二级、三级和四级结构决定了它的物理、化学、生物化学、物理化学和生物学性质,综述了不同蛋白质之间的性质存在差异或者改变条件是使之具有差异,利用一种同时多种性质差异,在兼顾收率和纯度的情况下,选择蛋白质提纯的方法。关键词:蛋白质 分离纯化前言 蛋白 细胞、细胞器及组分的分离与观察-2 细胞器标记酶的测定是评价细胞器内膜组分和分离纯度的主要依据,如线粒体内膜上分布有细胞色素氧化酶,该酶使詹纳斯绿B染料保持在氧化状态呈现蓝绿色,从而使线粒体显色,而胞质中的染料被还原成无色。詹纳斯绿B是一种活体染料,能对动植物的细胞或组织在活体状态下进行无毒害的染色。由于染料(碱性染料)的胶粒表面带有 蛋白质提取与纯化技术 选择材料及预处理 以蛋白质和结构与功能为基础,从分子水平上认识生命现象,已经成为现代生物学发展的主要方向,研究蛋白质,首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物等各方面知识,但基本原理不外乎两方面。一是得用混合物中几个组分分配率的差别,把它们分配到 离心技术原理与类型(二) 等密度方法等密度离心法也叫沉降平衡法。所谓等密度是指样品密度与介质的密度相等,实际上是在梯度密度介质中进行的。该技术的特点是沉降分离与样品物质的大小和形状无关,而取决于样品物质的密度。这种方法非常类似于电泳中的PH 梯度等电聚焦方法,在离心时,颗粒依其密度的不同沉降或向上漂浮,直到移动到与自 学会正确操作、养护,延长离心机寿命 离心机是利用离心力,分离液体与固体颗粒或液体与液体的混合物中各组分的机械。主要用于收集微生物、细胞碎片、细胞、大的细胞器、硫酸沉淀物以及免疫沉淀物等。冷冻离心机是实验室常用的设备之一,正确的操作和科学的养护,能够延长离心机使用寿命。1、仪器在不适用或维修时,应拔掉主电源插头。2、冷冻离心机通电与断电 学会正确操作、科学养护,延长离心机寿命 离心机是利用离心力,分离液体与固体颗粒或液体与液体的混合物中各组分的机械。主要用于收集微生物、细胞碎片、细胞、大的细胞器、硫酸沉淀物以及免疫沉淀物等。冷冻离心机是实验室常用的设备之一,正确的操作和科学的养护,能够延长离心机使用寿命。1、仪器在不适用或维修时,应拔掉主电源插头。2、冷冻离心机通电与断电 活细胞提取及应用——单个细胞级别的活细胞提取 由于细胞异质性的存在,单细胞层面的分析就变得十分重要。目前对于单细胞分析的方法主要还是通过化学、生物学的方法进行裂解后,提取内容物进行分析,然而这种方法往往会对样本造成一些损伤。直接提取活细胞具有诸多优点,但是操作苦难。如今一种全新使用FluidFM科技的技术新报道有望提供一种活细胞提取新型的简易方 植物组织培养技术知识汇总(一) 人们利用植物 组织培养技术快速获取优良植物株系、培育作物新品种等方面,那么如何利用植物组织培养技术再生植株呢?如何鉴定与避免与植物组织培养苗的污染,在此,小编总结了有关植物组织培养技术的七大方面,带你领略植物组织培养技术的方方面面。 第一部分 植物组织培养的概念 (广义)又叫 蛋白质纯化(protein purification)实用技术-1 研究的最后还是要看基因表达产物,无论是用于检测还是用于棉衣保护,都需要将表达出的蛋白质分离和纯化,然而蛋白质性质各异,故纯化方法不同,现共享一些基本的纯化方法,以飨读者:蛋白质的一级、二级、三级和四级结构决定了它的物理、化学、生物化学、物理化学和生物学性质,综述了不同蛋白质之间的性质存在差异或者改变 蛋白质提取与制备(Protein Extraction and Preparation)-1 蛋白质提取与制备蛋白质种类很多,性质上的差异很大,既或是同类蛋白质,因选用材料不同,使用方法差别也很大,且又处于不同的体系中,因此不可能有一个固定的程序适用各类蛋白质的分离。但多数分离工作中的关键部分基本手段还是共同的,大部分蛋白质均可溶于水、稀盐、稀酸或稀碱溶液中,少数与脂类结合的蛋白质溶于乙醇、 蛋白质的蛋白质的提取技术 选择材料及预处理 以蛋白质和结构与功能为基础,从分子水平上认识生命现象,已经成为现代生物学发展的主要方向,研究蛋白质,首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物等各方面知识,但基本原理不外乎两方面。一是得用混合物中几个组分分配率的差别,把它们分配到 蛋白质提取与纯化技术(一) 选择材料及预处理以蛋白质和结构与功能为基础,从分子水平上认识生命现象,已经成为现代生物学发展的主要方向,研究蛋白质,首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物等各方面知识,但基本原理不外乎两方面。一是得用混合物中几个组分分配率的差别,把它们分配到可用机械方法分离 蛋白质提取与纯化技术(一) 以蛋白质和结构与功能为基础,从分子水平上认识生命现象,已经成为现代生物学发展的主要方向,研究蛋白质,首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物等各方面知识,但基本原理不外乎两方面。一是得用混合物中几个组分分配率的差别,把它们分配到可用机械方法分离的两个或几个物相 蛋白质提取与纯化技术-1 选择材料及预处理以蛋白质和结构与功能为基础,从分子水平上认识生命现象,已经成为现代生物学发展的主要方向,研究蛋白质,首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物等各方面知识,但基本原理不外乎两方面。一是得用混合物中几个组分分配率的差别,把它们分配到可用机械方法分离 制取蛋白质选择材料及预处理 以蛋白质和结构与功能为基础,从分子水平上认识生命现象,已经成为现代生物学发展的主要方向,研究蛋白质,首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物等各方面知识,但基本原理不外乎两方面。一是得用混合物中几个组分分配率的差别,把它们分配到可用机械方法分离的两个或几个物 高速离心机基本原理及分类介绍 高速离心机属常规实验室用离心机,广泛用于生物,化学,医药等科研教育和生产部门 ,它利用转子高速旋转产生的强大离心力,分离液体与固体颗粒或液体混合物中各组分,适用于微量样品快速分离合成。高速离心机速度的划分线:为10000~30000r/min,离心机转速≥10000r/min的称为高速离心机;转速& 高速离心机基本原理及分类介绍 高速离心机属常规实验室用离心机,广泛用于生物,化学,医药等科研教育和生产部门 ,它利用转子高速旋转产生的强大离心力,分离液体与固体颗粒或液体混合物中各组分,适用于微量样品快速分离合成。高速离心机速度的划分线:为10000~30000r/min,离心机转速≥10000r/min的称为高速离心机;转速& 高速离心机基本原理及分类 高速离心机属常规实验室用离心机,广泛用于生物,化学,医药等科研教育和生产部门 ,它利用转子高速旋转产生的强大离心力,分离液体与固体颗粒或液体混合物中各组分,适用于微量样品快速分离合成。高速离心机速度的划分线:为10000~30000r/min,离心机转速≥10000r/min的称为高速离心机;转速& 植物线粒体制备及其亚结构分级分离实验(二) 3.5 纯度鉴定可以通过各种细胞器标志性酶的活性来确定线粒体的污染程度。过氧化物酶体可以鉴定过氧化氢酶、羟基丙酮酸还原酶或者乙二醇氧化酶的活性;叶绿体可以用叶绿素含量,白色体可以用类胡萝卜素的含量或碱性焦磷酸酶的活性;乙二醛循环体可以用异柠檬酸裂解酶的活性;内质网可以用对抗霉素 A 不敏感的细胞 叶绿体的分离与观察实验原理和实验操作 实验原理将植物组织匀浆后悬浮在等渗介质中进行差速离心,是分离细胞器的常用方法。一个颗粒在离心场中的沉降速率取决于颗粒的大小、形状、稠密度,也与离心力以及悬浮介质的粘度有关。在一给定的离心场中,同一时间内,密度和大小不同的颗粒其沉降速率不同。依次增加离心力和离心时间,就能够使非均一悬浮液中的颗粒按其大 Nat Methods: 2014年值得关注的技术 单细胞测序被评为2013年年度技术 2014 年首刊,《Nature Methods》杂志将2013年度技术(Method of the Year 2013)授予了单细胞测序(single-cell sequencing)。同时,杂志还介绍了2014年值得关注的技术,包括 植物线粒体制备及其亚结构分级分离实验 实验材料黄化苗试剂、试剂盒匀浆缓冲液清洗缓冲液Percoll 梯度溶液仪器、耗材分光光度计实验步骤在选好植物材料和匀浆缓冲液后,接下来关键的因素包括匀浆方法、缓冲液的 pH、使用的缓冲液与植物组织之间的比例、研磨时间及温度等(见注释 5) 。3.1 匀浆根据植物组织的不同可以采取不同的匀浆方法,或者 离心机及其转子的种类 离心机是生物学实验中必不可少的仪器,看似通用的仪器,却是有许多学问的,实验操作中我们需要了解离心机知识,能够合理利用它而更稳定地为我们的实验服务。离心机作为一种实验室通用仪器,几乎每个实验室都会配置一到两台甚至数台。大家对其并不陌生,我们整理了一些关于离心机及其转子种类的资料分享给大家。一、离心技术

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