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做ELISA实验前,事先收集好的标本该如何处理?
2021-08-09
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新启迪试剂盒
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这个问题由武汉新启迪生物来为您解答。做ELISA实验,在处理样本前应该先了解收集样本的注意事项。【标本收集注意事项】 1.收集血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。 2.血清和血浆避免使用溶血,高血脂标本。 3.标本应清澈透明,悬浮物应离心去除。 4.标本收集后若不及时检测,需按一次使用量分装,冻存于-20℃,-80℃电冰箱内,避免反复冻融。5.可根据标本的实际情况,做适当倍数稀释(建议做预实验,以确定稀释倍数) 。6.收集标本,尽量做到双份的用量,避免一次实验失败,重复实验时标本缺失,从而耽误实验进程。7.收集标本时,应该做好防护措施(比如戴手套,口罩,护目镜等),认为所有标本都具有一定的潜在危险性。8.样本处理应该在生物安全柜里面,并且正确使用生物安全柜。样本正确的处理方法应该是这样的:【标本处理办法】1.血清:将采集的全血静置冰箱4℃过夜,然后1000-3000rpm离心10分钟,取上清立即测试,暂时不测可以放入-20℃(1-3个月)或-80℃(3-6个月)保存。2.血浆:用EDTA,枸橼酸钠,肝素等作为抗凝剂,加入血液混匀后,1000-3000rpm离心10分钟,取上清立即测试,暂时不测可以放入-20℃(1-3个月)或-80℃(3-6个月)保存。3.组织匀浆:切取组织块,0.01MPBS中过洗一次;按照1G组织加入5-10ml组织蛋白萃取试剂的比例,在冰水中匀浆。匀浆完成后,5000-10000rpm离心10分钟,取上清立即测试,暂时不测可以放入-20℃(1-3个月)或-80℃(3-6个月)保存。4.细胞培养上清:1000-3000rpm离心10分钟,取上清立即测试,暂时不测可以放入-20℃(1-3个月)或-80℃(3-6个月)保存。5.尿液,腹水,脑脊液等:1000-3000rpm离心10分钟,取上清立即测试,暂时不测可以放入-20℃(1-3个月)或-80℃3-6个月)保存。 注:样品稀释的一般原则用户须查阅相关文献了解标本内待测因子的含量,决定适当的稀释倍数,以使稀释后样品中待测因子的浓度处于ELISA试剂盒的最佳检测范围。样品的稀释应有详细记录。希望可以给您提供帮助,祝您科研顺利!
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