Recommendedforuseasacellculturesubstratumat1-5µg/cm2.Optimalconcentrationdependsoncelltype.
Caution:Ifhandledimproperly,somecomponentsofthisproductmaypresentahealthhazard.Takeappropriateprecautionswhenhandlingthisproduct,includingthewearingofprotectiveclothingandeyewear.Disposeofproperly.
Fibronectinisa440-500kDaglycoproteinfoundbothascellsurfaceproteinsandinplasma.Itbindstocellmembranereceptorsandextracellularmatrixcomponents.Sciencell’sBovinePlasmaFibronectinispurifiedfrombovineplasmawithaffinitychromatographyandsupportscelladhesionandspreADIng.
Specifications
Quantity: 1mg
Concentration: 1mg/ml
Storagebuffer: 0.15MNaCl,20mMTris,pH7.5
Specifications:
CatalogNo. | 8248 |
CountryofManufacture | UnitedStates |
ProductCode | BPF |
Size/Quantity | 1mg |
ProductUse | Quantity:1mgConcentration:1mg/mlStoragebuffer:0.15MNaCl,20mMTris,pH7.5 |
Storage | Itisrecommendedtostoretheproductassingleusealiquotsat-80°C.Thawingshouldbedoneslowlyat37°Cwithnoagitation.Materialthatfailstodissolvecanberemovedbycentrifugation.Avoidrepeatingfreeze/thawcycles. |
ShippingInfo | Dryice. |
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1. 姜黄素是一个典型的HAT抑制剂。
2. 针对P300: 在大约10年前,Cole和他的同事设计出了一种p300/CBP抑制剂,发表在nature杂志上。
希望能帮到你,望采纳!
2.微孔板:选择实验所需的板条数。剩余不用的部分随同干燥剂密封放回原袋。 1.包被有抗抑制素bB亚单位抗体的微孔板(Anti-InhibinB-CoatedMicrotitrationStrips):96孔,2-8ºC下密封保存。
2.标准品A/样本稀释液(InhibinBStandardA/SampleDiluent):2ml×1瓶,胎牛血清,含0pg/mL二聚体抑制素B。使用前2-8ºC下保存。打开后2-8ºC下可保存2周。于-20ºC可长期保存。
3.标准品B-G(InhibinBStandardsB-G):1ml×6瓶,胎牛血清,含二聚体抑制素B的浓度为10,30,100,250,500,1000pg/mL。使用前2-8ºC下保存。打开后2-8ºC下可保存2周。于-20ºC可长期保存。
4.质控(InhibinBControls):1ml×2瓶,浓度I、II,胎牛血清,含低浓度和高浓度的抑制素A二聚体。使用前2-8ºC下保存。打开后2-8ºC下可保存2周。于-20ºC可长期保存。
5.样本稀释液A(InhibinBSampleBufferA):10ml×1瓶,2-8ºC下保存。
6.样本稀释液B(InhibinBSampleBufferB):10ml×1瓶,2-8ºC下保存。
7.抗体-生物素结合物(InhibinBAntibody-BiotinConjugate)(即用型):10ml×1瓶,含生物素标记的抗抑制素a亚单位抗体。2-8ºC下保存。
8.酶结合物(浓缩)(Streptavidin-EnzymeConjugate)(即用型):10ml×1瓶,含链霉和素-辣根过氧化物酶结合物。2-8ºC下保存。
9.TMB底物溶液(TMBChromogenSolution):15ml×1瓶,2-8ºC下保存。
10.终止液(StoppingSolution):15ml×1瓶,为0.2M的硫酸。2-8ºC下保存。
11.浓缩洗液(WashConcentrate):100ml×1瓶,2-8ºC下保存。 操作前所有试剂都应平衡至室温(~25ºC)并充分混匀。标准品、质控及待测样本需同时做双份。
1.取出实验所需板条,并记录各孔位置。
2.在对应的孔中加入标准品、质控及待测样本各50ul。
3.每孔加入25ul样本稀释液A。
4.每孔加入25ul样本稀释液B。
5.封板,以300-400rpm速度震荡,室温下过夜(14-18小时)。
6.洗板3次,在吸水纸上拍干。
7.每孔加入50ul抗体-生物素结合物。
8.封板,以500-700rpm速度震荡,室温下孵育1.5小时。
9.洗板6次,在吸水纸上拍干。
10.每孔加入50ul链霉和素-辣根过氧化物酶结合物。
11.封板,以500-700rpm速度震荡,室温下孵育20分钟。
12.洗板6次,洗完最后一次以后,将洗液在孔内停留15分钟再除去。在吸水纸上拍干。
13.在每孔中加入100ulTMB底物溶液。
14.以500-700rpm速度震荡,室温下避光孵育15-30分钟。
15.每孔加入100ul终止液。
16.30分钟内在450nm处读数。
注:必须以零标准作空白。如果能做到双波长测定,可在600或620nm处读数,将600(620)nm吸收值从450nm处减去,这样可以减少光学误差。 使用血清样本,静脉穿刺术采集血液。样本于2-8ºC可保存24小时,-20ºC或以下可保存30天。避免反复冻融样本。不应采用溶血或脂血的样本。冰冻的样本在实验前应解冻,并充分混匀。向左转|向右转
Vanderbilt-Ingram癌症中心的主任HalMoses博士和他的实验室研究人员,于1985年辨识出TGF-b,这种物质具有生长刺激物和生长抑制的作用。从那段时间之后,TGF-b在直肠、乳房和其他癌症中所扮演的角色便获得研究人员的广泛研究。
如今Vanderbilt-Ingram癌症中心的一组研究人员,发现了TGF-b矛盾的生物学作用之线索。他们的研究结果将发表于2003年12月的NationalAcademyofScience网络版,网址为www.pnas.org,这篇研究将于2003年12月稍后发表于纸本中。
TGF-b通常会抑制细胞生长,但是,很多实质性肿瘤会过度表现TGF-b,而使细胞不完全被抑制,事实上,有时候它们因为TGF-b的讯息使肿瘤细胞的生长比正常细胞更快。
TGF-b使用多种标记途径将它的指令送达细胞核心,已知大约有至少四条途径以上。研究人员去除一种特殊蛋白质组成的TGF-b标记:Rho-ROCK。细胞便不再受到抑制,而再度开始生长。
[信息来源:中国科技信息网站]
、
Cell-Based ELISA
的优点:
Cell-Based ELISA
(基于细胞的
ELISA
)是一种全新的
ELISA
技术,有两个最突出的优点:
1.1
不需要抽提蛋白、包被微孔板:细胞直接在微孔板里培养,待检测的时候,将细胞固定在微孔板上并
进行通透处理即可。这样就避免了抽提蛋白时,由于客观和主观上引起样品的损失而导致实验结果在一定
程度上偏离了实际情况。
同时不用包被微孔板,
简化了实验流程,
有助于提高效率。
科研人员在一个
96
孔
酶联板上,便能检测目标细胞蛋白经刺激或抑制作用后的表现。由于省去抽提蛋白和裂解细胞的步骤,样
本的损失也能降到最低,比起其他普通的
ELISA
测定方法,这项全新的
ELISA
技术能更快速、更方便
地一次检测大量的细胞内蛋白。
1.2
可同时检测两种不同蛋白:
封闭后加入两种抗不同蛋白且来源于不同宿主的一抗,
然后再加入不同的
二抗,加入两种荧光底物,检测两个波长。同时检测两种蛋白的好处是显而易见的,可以减少工作量,此
外还可以满足一些特殊的实验需要,例如,需要测定某个蛋白的磷酸化比例,就需要测定磷酸化蛋白的数
量和总蛋白的数量,这两个测定在同一次实验进行,有助于消除实验误差,得到更为精确的实验结果。
2
、
Cell-Based ELISA
的两种技术:
某些公司发展了双通道
Cell-Based ELISA
技术;
双通道与单通道
Cell-based ELISA
比较:
双通道
cell-based ELISA
,顾名思义,即一次可以同时检测两种目的蛋白,
R&D Systems
提供的
Cell-based ELISA
就是双通道
cell-based ELISA
,原理略:(需要荧光检测方式和相应仪器);
单通道
cell-based ELISA
,即一次只能检测一种目的蛋白,他和普通
ELISA
的主要区别在于样品处理过
程
3
、
cell-based ELISA
的应用:
该产品,最多发展起来的是用于检测磷酸化和非磷酸化蛋白的相对含量;
4
、有
cell-based ELISA
产品的公司:目前,多家
elisa
产品提供
商均
提供
cell
based
elisa
试剂盒,
如
Rnd
systems
,
raybiotech
,
ebioscience
,
millipore
等公司;
5
、如何自己进行
cell based elisa
实验?
事实上,根据单通道的
cell based elisa
原理,可以自己建立
cell based elisa
实验系统;
细胞加入培养板中;
加入刺激物或者抑制剂进行培养;
对细胞进行固定或者封闭;
加入第一抗体;
加入
HRP
结合的二抗(二抗的选择,同
western blot
);
加入底物进行显色;
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