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MACS/StraightFrom LRSC CD14 MicroBead Kit, human/130-117-026/
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MACS/StraightFrom LRSC CD14 MicroBead Kit, human/130-117-026/
品牌 / 
美天旎
货号 / 
130-117-026
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数    量:
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4000-520-616
Capacity:for1LRSC
Components:
  • 2mLStraightFromLRSCCD14MicroBeads
  • 12×LSColumns
  • WholeBloodColumnElutionBuffer

Overview

TheStraightFrom™MicroBeadKitwasdevelopedfortherapidpositiveselectionofCD14+cellsdirectlyfromoneLRSCusingtheMultiMACS™Cell24SeparatorPlusforsemi-automatedseparationoraMACS®Separatorformanualseparation.Nosamplepreparationisrequired,includingdensitygrADIentcentrifugation,erythrocytelysis,washsteps,orcellcount.LSColumnsandWholeBloodColumnElutionBufferareincludedinthekittoallowdirectprocessingofanentireLRSC.

Details

Backgroundinformation

TheCD14antigenbelongstotheLPSreceptorcomplex.Itisstronglyexpressedonmostmonocytesandmacrophagesandweaklyonneutrophils.

Detailedseparationprocedure

OneentireLRSCsampleislabeledwithStraightFrom™LRSCCD14MicroBeadsandloadedontoLSColumns,whichareplacedinthemagneticfieldofaMultiMACSCell24SeparatorPlusoraMACS®Separator.Afterremovingthecolumnfromthemagneticfield,themagneticallyretainedCD14+cellscanbeelutedasthepositivelyselectedcellfraction.

Downstreamapplications

ThepurifiedCD14+cellsarewellsuitedforfurtherflowcytometric,functional,ormolecularanalysis.
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最近看大家常提到支原体污染,就翻了翻书,做了些笔记,现在贴出来和大家分享: 支原体是一种大小介于细菌和病毒之间(最小直径0.2um)并独立生活的微生物。约有1%可通过滤菌器。支原体无细胞壁形态呈高度多形性。可为圆形、丝状或梨形。支原体形态多变,在光境下不易看清内部结构。电镜下观察 查看更多>
基因性状的其它检测方法1) 基因长度多态性(RFLP)检测在无DNA缺失,仅发生核苷酸改变性突变疾病时,往往出现酶切位点发生改变,通过RFLP分析可以显示出。设计一对适当引物,使被扩增的片段包含有某一个或数个多态性的限制性内切酶识别位点的序列。进行PCR后,用限制性内切酶酶切PCR产物;理论上 查看更多>
Solutions70% ethanol ribonuclease (100 µg/ml DNase free, Sigma) propidium iodide ( 50 µg/ml in PBS)ProcedureHarvest cells. Spin at 1200 rpm for 5 m 查看更多>
Contributor: Suprya JayadevDate: November 4, 19911) Grow cells to a density of 5-8 X 105 cells/ml in RPMI 1640 containing serum.2) Pellet cells and wash 1 time 查看更多>
鸡胚破骨细胞的分离培养与鉴定.pdf 查看更多>
以兔软骨细胞为例:①一般根据实验要求,选取不同年龄组的兔子,实际上兔子的年龄越小越好,毕竟幼体组织的活力要高于成体组织的活力,耳静脉空气注射法处死后,无菌条件下分离后肢关节软骨和肋软骨,剥离包裹软骨组织的筋膜和软骨膜,放入盛有PBS液的培养皿中。②将分离得到的软骨组织剁碎成 查看更多>
Preparation of cell lysates from E. coli by sonicationMaterialsLysis buffer50 mM Tris-HCl pH 7.5 50-200 mM NaCl*5 mM DTT1 mM PMSF*The NaCl concentration used i 查看更多>
采用美国Radnoti公司Langendorff离体心脏灌流系统,观察离体心脏功能变化,可排除其它组织器官、循环代谢产物的干扰。实验步骤:A.配制37℃ K-H液(1.25 CaCl2,130 NaCl,5.4 KCl,11 葡萄糖,0.5 MgCl2 查看更多>
材料:DMEM培养基(Gibco BRL Co生产), 无糖DMEM培养基(Gibco BRL Co生产),NRKSIE 鼠。肾小管细胞株(购于华西医科大学内科实验室),乳 酸钠(国产分析纯试剂)。 方法 肾小管细胞培养 NRKSIE鼠肾小管细胞 用0.25% 胰蛋白酶消化,将小管细胞分离成单个细胞悬液,用含100 查看更多>
The technique described here is a slight modification (March 1997) of methods presented in: Nagy A., J. Rossant. 1993. Production of completely ES cell-derived 查看更多>
Applied StemCell Inc.(ASC)公司产品介绍【代理商代购现货】 查看更多>
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经过无数次的大鼠肝脏插针灌注,忍受过实验结果不理想的打击和折磨,今天终于成功了,特分享些相关图片以鼓励还在奋战中的网友们。


各位大神,刚开始学习细胞培养,实验室也没有人做这方面的,希望有前辈做过毛囊干细胞的多多赐教!

近期根据经验总结了原代肿瘤细胞分离培养的2个关键因素

1、组织的活性:如果我们取的都是坏死的组织或者结缔组织,我相信任何方法都不可能分离出来活的细胞的。另外,取完的组织要冷藏存放,并且越早分离越好,最好在24h内,最久不要超过48h。

2、组织的消化:在组织消化前,组织剪的越碎越好(1mm3左右为宜),组织的大小决定了组织的消化时间,不同组织消化时间差别较大:例如肺癌在2h-2.5h;食管癌在1个多小时。

希望可以帮到各位研友,另外如果大家有更好的经验可以一起来讨论!

这两天实验需要分离乳鼠心肌细胞,操作了两次,但是效果都不好。细胞不贴壁,大量漂浮死亡。我是新手,也没有人指导,只能自己查文献摸索条件,想跟各位老师请教一下,争取早点培养成功。
大概步骤如下:c57小鼠大概六七只,酒精浸泡后不处死取出,迅速打开胸腔取出心脏放入冰PBS冲洗。待心脏取出完毕,冲洗移入有PBS青霉素小瓶中用眼科剪剪成较小组织块。
之后加入0.1%胰酶消化(之前浓度为0.25%,活细胞数量更少。)吹打1min.放入孵箱中3min.弃去上清,加入∥型胶原酶(0.1%)吹打10Min,放入孵箱15Min。取出后加入1ml胰酶。吹打1Min后加入含血清F12培养液终止消化,800转离心5Min。之后取沉淀重悬种板。90Min差速贴壁法纯化心肌细胞。
48h后只有少量(个位数)细胞贴壁,呈三角形。

第一次用0.25%胰酶时离心后有大量鼻涕样物质。
第二次胰酶浓度减小后没有,但细胞沉淀少,且为半透明微白。是不是离心时间不够。
感觉细胞整体状态都不好,几次都没有大量心肌细胞,更不用说观察到心肌细胞搏动。
老师们能不能帮忙分析一下是哪里的原因呢。
有没有比较稳定的小鼠乳鼠心肌细胞分离步骤呢。
希望大神快点出现。

请大神前辈指点指点,已经研三了,实验很不顺利,再这样都要延期的节奏了。请问最近急性分离出来的大鼠心肌细胞很不耐钙,做膜片钳封接不上可能是什么原因造成的?谢谢了!

我做的临床试验,就想简单检测PBMC细胞的凋亡,上流式检测,有啥检测效果好的步骤推荐一下,谢谢

肝细胞的分离123
blue66612017-08-17

最近分离肝脏原代细胞,发现分出来的都是细胞碎片,请问最可能的问题出在哪里呢?求指教

各位前辈,我现在要分离小鼠睾丸支持细胞进行培养,但是做了三次都没有贴壁,不知道问题出在哪,**指导!!!
我的步骤:
1、16-22天小鼠颈椎脱臼法处死后,75%酒精浸泡30秒消毒,睾丸取出后置预冷PBS,40分钟(路上所需时间)后开始处理。
2、剔除白膜,剪碎睾丸。0.25%胰酶(含edta)1.5ml/个睾丸37°C消化30-50分钟,等体积DMEM/F12含10%FBS终止消化,1000r/MIN离心5分钟,弃上液。
3、加0.1%胶原酶消化30分钟,过200目网筛,1000r/MIN离心5分钟,弃上液。
4、DMEM/F12含10%FBS5ml重悬后转如培养瓶,入孵育箱37°C5%CO2培养。
请教各位,我到底是哪里有问题,是胰酶消化的时间长了吗?

前辈们好,近期老板布置任务需要分离小鼠肝脏细胞,查了好多文献,都没有写胶原酶的cat#,只写sigma订购,想请教下,是否有人做过,可以提供下货号和使用方法吗?十分感谢。另外,文中还提到digitonin,如果有一起用到的话麻烦帮我查看下,谢谢。

各位师兄师姐:

我近期负责的课题,需要进行人类血液淋巴细胞和DC细胞的分离和培养,但我在方面懂的不多,想求助这方面的大神们。后续我需要做RT-qPCR,western-blot、免疫荧光等实验,我应该去多少ml全血比较好?全血怎么保存?怎么进行分离?后续怎么培养和保存?

谢谢!

想用二步酶消法来分离毛乳头细胞,一个毛囊大概有多少个毛乳头细胞?处于生长期的毛囊在显微镜下有什么特点?先谢谢大神们指点

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