细胞转染几天后就死亡，是什么原因？

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细胞转染几天后就死亡，是什么原因？

2021-07-24

问题描述：

我转的是7901、7901/DDP两种细胞，前者7901细胞很容易就转上，并且转后，状态良好，可是7901/DDP一转就死，我用的是吉玛慢病毒，转24小时后换液，刚开始一两天，没有异常，但后来细胞慢慢就死了，并且不是漂浮的，很多是贴着壁死，像是瓦解了一样

这是未转时细胞的样子

这是细胞转后，死亡的样子

并且即使是有些细胞未死，细胞后来也变得很脏，感觉有很破碎的细胞碎片

本人实验小白，**园子里大神指点，急，实在不知道怎么回事

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Fubio-GG

用户

展开引用duocaihui 我转的是7901、7901/DDP两种细胞，前者7901细胞很容易就转上，并且转后，状态良好，可是7901/DDP一转就死，我用的是吉玛慢病毒，转24小时后换液，刚开始一两天，没有异常，但后来细胞慢慢就死了，并且不是漂浮的，很多是贴着壁死，像是瓦解了一样这是未转时细胞的样子这是细胞转后，死亡的样子并且即使是有些细胞未死，细胞后来也变得很脏，感觉有很破碎的细胞碎片本人实验小白，**园子里大神指点，急，实在不知道怎么回事......细胞感染按照MOI吗？对照组呢？

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练医学生

用户

展开引用duocaihui我转的是7901、7901/DDP两种细胞，前者7901细胞很容易就转上，并且转后，状态良好，可是7901/DDP一转就死，我用的是吉玛慢病毒，转24小时后换液，刚开始一两天，没有异常，但后来细胞慢慢就死了，并且不是漂浮的，很多是贴着壁死，像是瓦解了一样这是未转时细胞的样子这是细胞转后，死亡的样子并且即使是有些细胞未死，细胞后来也变得很脏，感觉有很破碎的细胞碎片本人实验小白，**园子里大神指点，急，实在不知道怎么回事......转染前细胞状态如何？第几次转染了？

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我很爱丁香园

用户

转染前细胞的状态本身就要好，最好别用传代太久的细胞做实验，还有可能转染试剂本身毒性就很大，可以换换其他试试

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cecily0000001

用户

状态不好的是顺铂耐药株吗

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dxy_pcx2jxar

用户

楼主，我转染si也遇到了相同的问题，只有边边上有少量活着的细胞，转染了好多次都是这样，请问你是怎么解决的？***分享解决方案

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hulalahulala

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练医学生转染前细胞状态如何？第几次转染了？我也遇到了同样的问题，转染前细胞状态很好，转染24小时后换回完全培养基，细胞状态也很好，但是换液后第二天就开始大量由中心向四周围贴壁死，只有孔板周围还有零散的几个细胞还活着，求解呀

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hulalahulala

用户

楼主呀，我也遇到相同的问题，转染前细胞状态很好，转染24小时后换回完全培养基，细胞状态也很好，但是换液后第二天就开始大量由中心向四周围贴壁死，只有孔板周围还有零散的几个细胞还活着，求解呀

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hulalahulala

用户

狼牙gg细胞感染按照MOI吗？对照组呢？我在做慢病毒转染，把目的miRNA分别上调和下调，请问这两个（hU6-MCS-ubiquitin-EGFP-IRES-puromycin和Ubi-MCS-SV40-EGFP=IRSE-puromycin）阴性对照病毒是一样的吗？也就是过表达阴性对照和抑制表达阴性对照是不是都是一样的，那么我在做转染的时候是不是只做一组慢病毒阴性对照就行了，还是说过表达阴性对照和抑制表达阴性对照都要做？就是说我的分组是1·空白组：细胞2·过表达组：转染过表达慢病毒3·过表达对照组：转染Ubi-MCS-SV40-EGFP=IRSE-puromycin4·抑制表达组：转染抑制表达慢病毒5·抑制表达对照组：转染hU6-MCS-ubiquitin-EGFP-IRES-puromycin还是说过表达对照和抑制表达对照这两组做其中的一组就可以了？急需解答，谢谢！

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penny91

用户

楼主请问你的问题解决了吗？我也是做的SGC7901转染，用的lipo2000的脂质体。我的分组为未处理组，SIRNA下调组，和只加了lipo2000的组。我发现转染后第二题只加lipo2000的组的细胞大片死亡，反而下调组长得很好，请问你有没有遇到过这种问题呢？你转染前种六孔板每孔种的多少细胞，转染时每孔加多少lipo2000呢？这个问题困扰我很久了，导致下面的实验一直做不下去，希望做过的人可以不吝赐教，不甚感激！

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花生不生花

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是不是转染试剂和细胞不匹配？

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蓝天9896

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我也是做HAC15细胞转染，用的lipo3000的脂质体。我发现制备DNA脂质体复合物，室温孵育时间大于15分钟后，再加入六孔板，细胞不容易死。如果室温孵育时间5-10分钟加入六孔板，第二天细胞容易死，两者的转染都很差，这个问题困扰我很久了，导致下面的实验一直做不下去，希望做过的人可以不吝赐教，不甚感激！

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