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Rockland/APC3 Antibody/600-401-Y33/100 µg
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Rockland/APC3 Antibody/600-401-Y33/100 µg
品牌 / 
rockland-inc
货号 / 
600-401-Y33
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APC3AntibodyProperties

Description
Anti-APC3(RABBIT)Antibody-600-401-Y33
Host
Rabbit
TargetSpecies
Human
KnownCrossReactivity
Human,mouse,rat
Clonality
Polyclonal
Application
ELISA:1:10,000-1:20,000
WesternBlot:1-2µg/mL
Immunohistochemistry:5µg/mL
PhysicalState
Liquid(sterilefiltered)
ShippingCondition
DryIce
Format
IgG
Label
Unconjugated
Concentration
1mg/mLbyUVabsorbanceat280nm
Buffer
0.01MSodiumPhosphate,0.25MSodiumChloride,pH7.2
Preservative
0.02%(w/v)SodiumAzide
StABIlizer
None
GeneName
CDC27
RelevantLinks
UniProtKB-P30260
GeneID-996
NCBI-NP_001247

APC3AntibodyDescription

Background
Cellcycleregulatedproteinubiquitinationanddegradationwithinsubcellulardomainsisthoughttobeessentialforthenormalprogressionofmitosis.APC3,alsoknownasCDC27,ahighlyconservedcomponentoftheanaphasepromotingcomplex/cyclosome(APC/C),isacellcycle-regulatedE3ubiquitinligasethatcontrolsprogressionthroughmitosisandtheG1phaseofthecellcycle.APC/CisresponsIBLefordegrADInganaphaseinhibitors,mitoticcyclins,andspindle-associatedproteinsensuringthateventsofmitosistakeplaceinpropersequence.APC3containsatetratricopeptiderepeat(TPR)regionandinteractswithmitoticcheckpointproteinsincludingMad2,p55CDCandBUBR1.
Synonyms
APC3Antibody,APC3,HNUC,NUC2,ANAPC3,CDC27Hs,D0S1430E,D17S978E,Celldivisioncycleprotein27homolog,Anaphase-promotingcomplexsubunit3,APC3
Immunogen
Anti-APC3antibodywaspreparedfromwholerabbitserumproducedbyrepeatedimmunizationswitha19aminoacidsyntheticpeptideneartheC-terminusofhumanAPC3.
ImmunogenType
Peptide
StorageCondition
Storevialat-20°Cpriortoopening.Aliquotcontentsandfreezeat-20°Corbelowforextendedstorage.Avoidcyclesoffreezingandthawing.Centrifugeproductifnotcompletelyclearafterstandingatroomtemperature.Thisproductisstableforseveralweeksat4°Casanundilutedliquid.Diluteonlypriortoimmediateuse.
ApplicationNote
Anti-APC3AntibodyhasbeentestedforuseinELISA,WesternBlotting,andImmunohistochemistry.Specificconditionsforreactivityshouldbeoptimizedbytheenduser.Expectabandatapproximately92kDainWesternBlotsofspecificcelllysatesandtissues.
Purity/Specifity
Anti-APC3Antibodywasaffinitypurifiedfrommonospecificantiserumbyimmunoaffinitychromatography.CrossreactivitywithAPC3fromothersourceshasnotbeendetermined.
DisclaimerNote-General
Thisproductisforresearchuseonlyandisnotintendedfortherapeuticordiagnosticapplications.Pleasecontactatechnicalservicerepresentativeformoreinformation.AllproductsofanimaloriginmanufacturedbyRocklandImmunochemicalsarederivedfromstartingmaterialsofNorthAmericanorigin.CollectionwasperformedinUnitedStatesDepartmentofAgriculture(USDA)inspectedfacilitiesandallmaterialshavebeeninspectedandcertifiedtobefreeofdiseaseandsuitableforexportation.Allpropertieslistedaretypicalcharacteristicsandarenotspecifications.Allsuggestionsanddataareofferedingoodfaithbutwithoutguaranteeasconditionsandmethodsofuseofourproductsarebeyondourcontrol.Allclaimsmustbemadewithin30daysfollowingthedateofdelivery.TheProspectiveusermustdeterminethesuitabilityofourmaterialsbeforeadoptingthemonacommercialscale.SuggestedusesofourproductsarenotrecommendationstouseourproductsinviolationofanypatentorasalicenseunderanypatentofRocklandImmunochemicals,Inc.Ifyourequireacommerciallicensetousethismaterialanddonothaveone,thenreturnthismaterial,unopenedto:RocklandInc.,P.O.BOX5199,Limerick,Pennsylvania,USA.
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细胞凋亡是指细胞在生长到一定阶段及某些生理过程中,会受到多因素和机制的严格调控而进入死亡。这是一个动态的过程,会涉及一系列复杂的生化反应, 是一个需要酶参与的级联反应,同时也涉及不同基因的表达及调控、信号传导。其中有几项生理过程能被用来检测凋亡的发生,因此多参数分析法对于准确检测这一过程十分重要。同时,了解细胞死亡和存活机制也是毒理分析和药物研发应用中一个非 查看更多>
ASTRACT We describe a rapid and quantitative flow cytometric method for determining the apoptotic or anti-apoptotic potential of a gene in various cell types. 查看更多>
发生细胞凋亡时,内源性核酸酶被激活,染色体DNA链在核小体之间被切割,形成180~200个碱基或其整数倍的DNA片段,将这些DNA片段抽提出来进行电泳,可得到DNA梯状条带(DNA ladder)。一、材料与试剂凋亡细胞;蛋白酶K(500μg/ml 查看更多>
  凋亡扮演哪些重要的角色?凋亡,经常也说“细胞自杀”,对于身体各器官的发育和正常发挥功能来说非常重要,我们的身体需要清除一些不需要的、损伤的、可能有害的细胞。但是在某些情况下如癌症的发生,凋亡过程紊乱导致细胞不可控的存活及生长,或者另一种情况如心脏受袭导致凋亡过激而杀死了更多无辜的细胞。对于人类健康来说,这个过程如此重要,于是科学家们投入了大量的热情去了解不同的疾病环境下如何抑制或诱导凋亡。  什么诱导了一个细胞的凋亡?突然消除了... 查看更多>
发生凋亡的细胞,一种特异性核酸内切酶被激活,作用在连结字区域核小体之间,导致双链DNA的断裂,最终形成由180-200 bp或整数倍为单位组成的DNA片段。凋亡细胞的DNA片段,可用不同方式检测,比如琼脂糖电泳分析,根据不同需求,可以选择性提取小分子量DNA、用磷酸-柠檬酸缓冲液抽提集小分子量DNA、提取细胞总RNA。 查看更多>
罗氏细胞凋亡检测系列产品自问世以来,历经时间的考验,以其卓越的品质获得了广大业界用户的支持和认可,相关文献达数千篇。细胞凋亡产品特性:☆检测范围广泛:可实现对细胞培养液、组织切片、单个细胞及细胞群落的分析检测,满足日益增长的高通量检测需求。☆检测方法灵活:针对光学或荧光显微镜、流式细胞仪、ELISA。☆操作安全:无需接触任何放射性同位素 查看更多>
细胞凋亡是由一系列基因严格调控的细胞生理现象,在研究当中是经常需要进行检测的一个细胞类实验项目,对很多实验新手来说,凋亡的研究甚至可以成为一篇文章的核心,今天我们就来聊一聊凋亡实验。凋亡的进程分为早、中、晚期,每个时期都有多种方法可以进行检测:早期的检测目前最常见的还是Annexin-V,利用流式很方便的区分凋亡细胞,需要注意的是设置空白对照 查看更多>
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I. Protocol1. Harvest cellsOptional: wash plate with 37°C PBS (gently, so as not to lose cells); check on microscope,after aspirate PBS or mediaPlace plate on 查看更多>
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细胞凋亡是细胞程序化死亡的一种,是指细胞在凋亡因子刺激下发生的受基因调控的细胞自杀性行为。本文威正翔禹/缔一生物为您分析什么是细胞凋亡?它与细胞坏死有什么区别?

细胞凋亡存在于正常生理情况下,是在个体发育、多细胞生物体平衡和疾病发生中起重要作用的一种细胞死亡形式。细胞凋亡有别于细胞死亡的另一种方式——细胞坏死(necrosis)。

细胞坏死与细胞凋亡的区别首先在于外观形态上变化不同,坏死的细胞表现为体积胀大,细胞膜失去了完整性,易被染料(如台盼蓝)所透过;而凋亡的细胞则表现为细胞体积变小。

细胞凋亡是一个受基因严密调控的生物过程,而细胞坏死则通常是偶然因素,如受热和药物损伤等引起溶酶体的颗粒内容物释放失控引起;坏死细胞会引发炎症初期的免疫反应,而凋亡细胞在通常情况下并不诱导抗炎症反应。然而,细胞坏死和细胞凋亡的区别也不是绝对的,同一种诱导因素(如局部缺血、H202)可能引发凋亡或坏死,取决于诱导因素的强弱和损伤的严重性。

威正翔禹生物(缔一生物)科技有限公司十多年来(viansaga.com)始终专注于生物医疗、细胞培养、生物制药等方面的技术支持及产品引进开发,是目前国内此领域最为专业的代理公司。主要代理产品澳洲进口AuSBIan血清,支原体污染防治,液体培养基,支原体祛除检测剂,微生物培养基,细胞培养试剂,细胞分离液,动物细胞培养,DNA污染防治,微生物工业品,疫苗检测,生物科研试剂等。

本文转自:威正翔禹/缔一生物官方网站:http://www.viansaga.com/h-col-124.html


请教各位前辈:流式细胞分析技术检测细胞周期和细胞凋亡的变化,是不是一般都是用AnnexinV-PI试剂的?据说这个比较贵是吗?有其他的可以代替吗?

Kerr( 1972)最先提出凋亡的概念,与细胞坏死的区别是:①细胞通过出芽的方式形成许多凋亡小体;②凋亡小体内有结构完整的细胞器; ③不引起炎症;④线粒体无变化,溶酶体活性不增加;⑤内切酶活化,DNA有控降解,凝胶电泳图谱呈梯状;⑥凋亡通常是生理性变化,而细胞坏死是病理性变化。
  细胞程序性死亡(programmed cell death,PCD)是一种基因指导的细胞自我消亡方式。PCD和细胞凋亡的区别在以下方面:PCD是功能性概念,凋亡是形态学概念;PCD的最终结果是细胞凋亡,但细胞凋亡并非都是程序化的;PCD存在于胚胎发育过程中。
受环境影响;
凋亡虽是自主的但一般有外界因素刺激,致使信号传导,近而控制基因表达
生物性状是外界环境与基因共同决定的
比如,正常的杨树在北方到秋天会落叶,这是细胞凋亡,程序化的。但是,在南方,它不会在秋天凋亡.因此,细胞凋亡受环境影响。
细胞凋亡呈现出特征性形态学变化,主要包括细胞皱缩、染色质凝集、凋亡小体形成、细胞骨架解体等,其中以胞核的变化最为显著;细胞凋亡时细胞的生化改变具有复杂性和多样性,包括DNA片段化、多种蛋白酶控制、胞浆Ca2+持续升高、pH的变化、线粒体在细胞凋亡中起重要作用。
常用细胞凋亡检测方法123
dxy_8mvqw9762017-06-21

细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来。细胞凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法。


一、细胞凋亡的形态学检测


根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。


1光学显微镜和倒置显微镜


(1)未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体。

贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。


(2)染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割

成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态。


2荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜


一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况。


常用的DNA特异性染料有:HO33342(Hoechst33342),HO33258(Hoechst33258),DAPI。三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区。紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光。


Hoechst是与DNA特异结合的活性染料,储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用时用PBS稀释成终浓度为2~5mg/ml。


DAPI为半通透性,用于常规固定细胞的染色。储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用终浓度一般为0.5~1mg/ml。


结果评判:细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期:Ⅰ期的细胞核呈波纹状(rippled)或呈折缝样(creased),部分染色质出现浓缩状态;Ⅱa期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化;Ⅱb期的细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体(图1)。


3透射电子显微镜观察


 结果评判:凋亡细胞体积变小,细胞质浓缩。凋亡Ⅰ期(pro-apoptosisnuclei)的细胞核内染色质高度盘绕,出现许多称为气穴现象(cavitations)的空泡结构(图2);Ⅱa期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化;细胞凋亡的晚期,细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体。

请问AnnexinV-FITC细胞凋亡检测试剂盒用哪个牌子好呢?
求助细胞凋亡通路图 123
雨后8232021-07-22
请问这种像煎蛋一样的细胞形态是凋亡吗?

细胞凋亡的过程大致可分为以下几个阶段:
接受凋亡信号→凋亡调控分子间的相互作用→蛋白水解酶的活化(Caspase)→进入连续反应过程 细胞凋亡的启动是细胞在感受到相应的信号刺激后胞内一系列控制开关的开启或关闭,不同的外界因素启动凋亡的方式不同,所引起的信号转导也不相同,客观上说对细胞凋亡过程中信号传递系统的认识还是不全面的,比较清楚的通路主要有:
1)细胞凋亡的膜受体通路:各种外界因素是细胞凋亡的启动剂,它们可以通过不同的信号传递系统传递凋亡信号,引起细胞凋亡,我们以Fas -FasL为例:
Fas是一种跨膜蛋白,属于肿瘤坏死因子受体超家族成员,它与FasL结合可以启动凋亡信号的转导引起细胞凋亡。它的活化包括一系列步骤:首先配体诱导受体三聚体化,然后在细胞膜上形成凋亡诱导复合物,这个复合物中包括带有死亡结构域的Fas相关蛋白FADD。Fas又称CD95,是由325个氨基酸组成的受体分子,Fas一旦和配体FasL结合,可通过Fas分子启动致死性信号转导,最终引起细胞一系列特征性变化,使细胞死亡。Fas作为一种普遍表达的受体分子,可出现于多种细胞表面,但FasL的表达却有其特点,通常只出现于活化的T细胞和NK细胞,因而已被活化的杀伤性免疫细胞,往往能够最有效地以凋亡途径置靶细胞于死地。Fas分子胞内段带有特殊的死亡结构域(DD,death domain)。三聚化的Fas和FasL结合后,使三个Fas分子的死亡结构域相聚成簇,吸引了胞浆中另一种带有相同死亡结构域的蛋白FADD。FADD是死亡信号转录中的一个连接蛋白,它由两部分组成:C端(DD结构域)和N端(DED)部分。DD结构域负责和Fas分子胞内段上的DD结构域结合,该蛋白再以DED连接另一个带有DED的后续成分,由此引起N段DED随即与无活性的半胱氨酸蛋白酶8(caspase8)酶原发生同嗜性交联,聚合多个caspase8的分子,caspase8分子遂由单链酶原转成有活性的双链蛋白,进而引起随后的级联反应,即Caspases,后者作为酶原而被激活,引起下面的级联反应。细胞发生凋亡。因而TNF诱导的细胞凋亡途径与此类似
2)细胞色素C释放和Caspases激活的生物化学途径
线粒体是细胞生命活动控制中心,它不仅是细胞呼吸链和氧化磷酸化的中心,而且是细胞凋亡调控中心。实验表明了细胞色素C从线粒体释放是细胞凋亡的关键步骤。释放到细胞浆的细胞色素C在dATP存在的条件下能与凋亡相关因子1(Apaf-1)结合,使其形成多聚体,并促使caspase-9与其结合形成凋亡小体,caspase-9被激活,被激活的caspase-9能激活其它的caspase如caspase-3等,从而诱导细胞凋亡。此外,线粒体还释放凋亡诱导因子,如AIF,参与激活caspase。可见,细胞凋亡小体的相关组份存在于正常细胞的不同部位。促凋亡因子能诱导细胞色素C释放和凋亡小体的形成。很显然,细胞色素C从线粒体释放的调节是细胞凋亡分子机理研究的关键问题。多数凋亡刺激因子通过线粒体激活细胞凋亡途经。有人认为受体介导的凋亡途经也有细胞色素C从线粒体的释放。如对Fas应答的细胞中,一类细胞(type1)中含有足够的胱解酶8 (caspase8)可被死亡受体活化从而导致细胞凋亡。在这类细胞中高表达Bcl-2并不能抑制Fas诱导的细胞凋亡。在另一类细胞(type2)如肝细胞中,Fas受体介导的胱解酶8活化不能达到很高的水平。因此这类细胞中的凋亡信号需要借助凋亡的线粒体途经来放大,而Bid -- 一种仅含有BH3结构域的Bcl-2家族蛋白是将凋亡信号从胱解酶8向线粒体传递的信使。 尽管凋亡过程的详细机制尚不完全清楚,但是已经确定Caspase即半胱天冬蛋白酶在凋亡过程中是起着必不可少的作用,细胞凋亡的过程实际上是Caspase不可逆有限水解底物的级联放大反应过程,到目前为止,至少已有14种Caspase被发现,Caspase分子间的同源性很高,结构相似,都是半胱氨酸家族蛋白酶,根据功能可把Caspase基本分为二类:一类参与细胞的加工,如Pro-IL-1β和Pro-IL-1δ,形成有活性的IL-1β和IL-1δ;第二类参与细胞凋亡,包括caspase2,3,6,7,8,9.10。Caspase家族一般具有以下特征:
1)C端同源区存在半胱氨酸激活位点,此激活位点结构域为QACR/QG。
2)通常以酶原的形式存在,相对分子质量29000-49000(29-49KD),在受到激活后其内部保守的天冬氨酸残基经水解形成大(P20)小(P10)两个亚单位,并进而形成两两组成的有活性的四聚体,其中,每个P20/P10异二聚体可来源于同一前体分子也可来源于两个不同的前体分子。
3)末端具有一个小的或大的原结构域。
参与诱导凋亡的Caspase分成两大类:启动酶(inititaor)和效应酶(effector)它们分别在死亡信号转导的上游和下游发挥作用。向左转|向右转
细胞凋亡的速率与它们的功能是有关系的。向左转|向右转
凋亡是多基因严格控制的过程。这些基因在种属之间非常保守,如Bcl-2家族、caspase家族、癌基因如C-myc、抑癌基因P53等,随着分子生物学技术的发展对多种细胞凋亡的过程有了相当的认识,但是迄今为止凋亡过程确切机制尚不完全清楚。而凋亡过程的紊乱可能与许多疾病的发生有直接或间接的关系。如肿瘤、自身免疫性疾病等,能够诱发细胞凋亡的因素很多,如射线、药物等。
其实从严格的词学意义上来说,细胞程序性死亡(PCD)与细胞凋亡是有很大区别的。细胞程序性死亡的概念是1956年提出的,PCD是个功能性概念,描述在一个多细胞生物体中某些细胞死亡是个体发育中的一个预定的,并受到严格程序控制的正常组成部分。例如蝌蚪变成青蛙,其变态过程中尾部的消失伴随大量细胞死亡,高等哺乳类动物指间蹼的消失、颚融合、视网膜发育以及免疫系统的正常发育都必须有细胞死亡的参与。这些形形色色的在机体发育过程中出现的细胞死亡有一个共同特征:即散在的、逐个地从正常组织中死亡和消失,机体无炎症反应,而且对整个机体的发育是有利和必须的。因此认为动物发育过程中存在的细胞程序性死亡是一个发育学概念,而细胞凋亡则是一个形态学的概念,描述一件有着一整套形态学特征的与坏死完全不同的细胞死亡形式。但是一般认为凋亡和程序性死亡两个概念可以交互使用,具有同等意义。细胞凋亡是细胞的一种基本生物学现象,在多细胞生物去除不需要的或异常的细胞中起着必要的作用。它在生物体的进化、内环境的稳定以及多个系统的发育中起着重要的作用。细胞凋亡不仅是一种特殊的细胞死亡类型,而且具有重要的生物学意义及复杂的分子生物学机制。

最近在用流式测加药后细胞凋亡情况,但加的药物是自发红光的柔红霉素,用常用的凋亡试剂盒,annexinV-fitc和PI双染的测流式,干扰比较大,想问问有人遇到过类似情况吗?请教一下有没有什么解决方法。

流式细胞凋亡分析 123
frozenflying2017-06-28

本人细胞实验新手,现在在做细胞凋亡方面的实验,但是,对于得到的细胞凋亡的图有一些疑惑的地方。

这是空白双阴的图

这三个是我给不同药物得到的凋亡的图,每一个图在晚期凋亡的象限内都有这个横这个的一块区域的细胞,我不明白这块区域的细胞是怎么来的

这个是我圈门用的图

主要想问一下,那个横着的这块区域是怎么回事?还有凋亡用无EDTA的胰酶消化一般是在室温还是培养箱,消化多久?我今天消化了6min,依旧看不见有空白组细胞间隙的分开,但是我给药组的细胞已经有明显的皱缩了,所以我就赶紧收集了,发现空白组可以吹下来,这个消化是看间隙增大还是凭感觉?