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细胞增殖

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提供商：	广州伯信生物科技有限公司
服务名称：	细胞增殖

细胞增殖是生物体生命活动的基本特征，是生物体生长、发育、繁殖及遗传信息传递的基础。细胞增殖和细胞周期是评价细胞代谢、生理和病理状况的重要指标。
常用的检测方法有：

1．CCK8 测细胞增殖原理

     CCK-8细胞活性检测试剂中含有WST-8，它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-MethoxyPMS）的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物（Formazan）。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。用酶联免疫检测仪在450nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。
    CCK-8法的优点：
    1、使用方便，省去了洗涤细胞，不需要放射性同位素和有机溶剂；
    2、CCK-8法能快速检测；
    3、CCK-8法的检测灵敏度很高，甚至可以测定较低细胞密度；
    4、CCK-8法的重复性优于MTT法；
    5、CCK-8法对细胞毒性小。

2．EdU 测细胞增殖原理

EdU只有BrdU抗体大小的1/500，在细胞内更容易扩散，不需要严格的样品变性(酸解、热解、酶解)处理，有效地避免样品损伤，具有更高的灵敏度和更快的检测速度。
EdU（5-Ethynyl-2-deoxyuridine）是一种胸腺嘧啶核苷类似物，其连有的炔烃基团在天然化合物中很少见，能够在DNA复制时期代替胸腺嘧啶(T)渗入正在合成的DNA分子中，基于Apollo®荧光染料与EdU的特异性反应即可直接并准确地检测出DNA复制活性，广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复、病毒繁殖等方面的研究，尤其适合进行siRNA、miRNA、小分子化合物及各种药物的细胞增殖及活力筛选实验。

3． CFDA-SE 测细胞增殖

    CFDA-SE(简称CFSE，羧基荧光素琥珀酰亚胺酯)是目前细胞传代研究最为广泛使用的染料，它通过共价结合赖氨酸侧链的氨基而掺入细胞内和细胞表面的蛋白，且结合后发出强的绿色荧光。当细胞分裂时，染料也均匀的分布到子代细胞中；吸收光和释放光峰值分别在492nm 和517nm。
    当然随着细胞分裂，子代细胞中的荧光是减半的，这可以在流式细胞术中清楚地观察到。而这种荧光产物能够很好的保持，并且可以用乙醛固定，不会重新泄漏到胞外，可以通过免疫荧光实验或者流式细胞仪定量检测。
    CFSE的优点在于染色更均匀，因此比起核酸染料，它在区分父子代细胞方面效率更高更准确，比如利用流式细胞术，可以轻易区分8-10 代淋巴细胞。

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①　细胞：1~2×10⁶个细胞左右（来源于人、小鼠、大鼠或其它），室温运输；
②　外周血：EDTA或肝素抗凝全血（5ml左右），室温运输；
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发布于： 2021-08-19 阅读（363）

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