描述
LIVE/DEAD细胞活性/细胞毒性试剂盒(LIVE/DEADViABIlity/CytotoxicityKit)是一种快速简便的双颜色试验,是根据细胞质膜完整性和酯酶活性的原理,用于测定一个细胞群体中受损伤细胞的数量。本试剂盒能用于流式细胞仪、荧光显微镜和微孔板荧光检测仪。
本试剂盒优于替代方法的方面:
• 更快速
• 更安全
• 更灵敏
• 更经济
简单应用于各种技术和细胞类型
由于活细胞的显著特点是普遍具有细胞内酯酶活性以及完整的细胞质膜。细胞毒性检测试剂盒LIVE/DEAD®Viability/可快速从死亡细胞中区别活细胞,其原理是:采用绿色荧光钙黄绿素-AM同时对细胞进行染色,能够显示细胞内酯酶活性,而红色乙锭二聚体-1能够显示细胞质膜完整性的缺失。这种情况发生在大部分真核细胞中,细胞毒性作用都能够产生这些效果。本试剂盒适用于各种荧光检测方法。
灵敏、安全和高效
细胞毒性检测试剂盒LIVE/DEAD®Viability/比台盼蓝排除试验(一种常用的检测死亡细胞的方法)更灵敏。经济有效细胞毒性检测试剂盒LIVE/DEAD®Viability/具有高度灵敏性,因为荧光染料作用于活细胞(钙黄绿素-AM)或死细胞(乙锭二聚体-1),从而明亮的荧光。同时背景光很弱,因为荧光染料在作用于细胞之前几乎不发荧光。
本试验适用范围广
细胞毒性检测试剂盒LIVE/DEAD®Viability/可以用于检测哺乳动物、细菌、酵母菌和真菌。还可以作为固定死亡细胞染色试剂盒进行细胞内染色,用于流式细胞仪。所有检测试验都提供快速、有效地区分活细胞与死亡细胞的方法。
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于人或动物之诊断治疗。
Invitrogen创立于1987年,公司总部设于加利福尼亚州卡尔斯巴德市。我们为制药和生物技术公司以及学术研究和政府科研机构提供生命科学相关产品与服务。2006年Invitrogen公司(纳斯达克股票代码IVGN),年营业额达12亿美元。作为一家全球性的跨国公司,Invitrogen现有员工4,800余名,在全球超过70个国家和地区设有分支机构。我们为全球的科研工作者提供25,000余种产品和服务,支持疾病研究、新药研发和商业性生物生产。Invitrogen中国总公司,凭借丰富经验,集中人力建立了提供合成,测序及其它多种项目服务的实验生产基地,是唯一一个在同行业中引进6西格码(SixSigma)和精益(Lean)管理方法的公司,公司由有着丰富管理经验的黑带大师(MasterBlackBelt)指导,根据数据来不断优化生产流程,降低成本,提高质量,以及提高发货速度.我们有一个强大的集研发和生产于一体的梯队,队员构成中有归国博士,硕士和本科生。另外我们Invitrogen的美国,欧洲,日本的梯队与我们紧密联系,资源共享,共同传递高质量的产品,提供更新更全更快的技术和服务.全面细致的标准操作程序,严格的入职前培训和在职培训。使我们的产品成为成为您的首选品牌.因此我们相信以Invitrogen在全球的合成与测序业务技术力量为后盾,在我们杰出的技术团队的带领下,将会为您提供高质量、全方位和多角度的服务。
Invitrogen旗下包括Invitrogen、Gibco、MolecularProbes、Dynal、Biosource、Caltag、Zymed、Panvera、InforMax、BioReliance等众多行业顶尖品牌。为分子生物、疾病研究,药物研发和生物制品生产等提供全面的技术和服务。
Invitrogen的壮大历程:
2005
Dynal细胞分离与纯化用磁珠、细胞刺激、蛋白质研究、核酸研究和微生物学
Zymed病理学、癌症和细胞生物产品,一般免疫化学试剂
BioAsia引物合成及测序,合并后的公司称为上海英骏生物技术有限公司
2004
DRIDNA纯化产品和其它核酸
Protometrix蛋白质微阵列技术
BioReliance合同服务机构(CSO)假设测试,为全球生物技术和制药公司提供生物药品开发和生产服务
2003
SequiturRNA干扰技术(RNAi)
MolecularProbes为生物研究和药品开发提供分子分类方面的荧光技术
GeniconSciences超敏感信号产生与探测工具和方法
2002
PanVera生物化学、细胞检验和蛋白质收集
InforMax生物信息软件
2000
LifeTechnologies分子生物和GIBCO细胞培养试剂
Ethrog电泳完全附着系统
ResearchGenetics为基因药品开发研究提供cDNA克隆
1999
NOVEX预制电泳胶
ebiomall.com
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是这个文献nanomedicine 2009;5:73-82
Karmali写的
(2)荧光标记法 : 使用二乙酸荧光素(FDP)、碘化丙啶(PI)或异硫氰酸荧光素钠标记的荧光染料与细胞共孵育,用流式细胞仪检测荧光染色阳性细胞的比率。此法其实是(1)法的“荧光”版,但其在灵敏性和准确性方面明显要优于后者。
(3)硝酸镧(La)示踪法: 在正常的生物组织中镧微粒可沉积于细胞间隙,但不能穿过具有1~ 2nm 微小间隙的细胞膜性结构(包括细胞膜和细胞器膜),也不能穿过细胞间的紧密连接。在膜性结构通透性增高时, 镧微粒则可进入细胞、细胞器和紧密连接内, 并在电镜下显示, 镧盐标记技术被认为是一种有效的监测细胞膜通透性变化的标记技术。
(4)LDH释放法: 在正常情况下,细胞内大分子物质LDH 是不能通过细胞膜的, 但在细胞膜受损伤而通透性增加时,可通过受损的细胞膜释放出来。LDH 能较好地反映细胞膜损伤程度。类似的还有检测细胞外K+的漏出率等。
科学家早在数十年前就已经发现了基础基因密码的存在,即细胞通过转化一串DNA碱基使之成为一个蛋白质的氨基酸。但10多年来,科学家一直在尝试**组蛋白密码——这是一组更加复杂的密码,内嵌在有机体的基因组中。组蛋白是一种DNA环绕在染色体上的蛋白质,通过化学手段调整组蛋白可以调节基因的活动。例如,细胞可以通过将3组甲基原子团附着在一种名为H3的组蛋白的特定位置上,从而关闭基因功能。
但是,若将3组甲基原子团附着在H3的其他位置上,则会产生完全不同的效果,科学家将这种转化称为H3K4me3。细胞通常只会将H3K4me3标记附着在基因组中很短的一段上,但研究者注意到,H3K4me3有时会极大地延展开,进而影响到更多的组蛋白。
为了弄清这些携带H3K4me3标记的组蛋白是否蕴涵某些组蛋白密码,美国斯坦福大学分子遗传学家AnneBrunet和同事追踪研究了20多种细胞类型。他们发现,在不同细胞中,延展后的H3K4me3标记会指向不同位置。研究者可以只依据H3K4me3标记在染色体上的位置辨别细胞的类别,例如肌肉细胞或者肾脏细胞。此外,他们还注意到,H3K4me3标记所指向的通常是对细胞的功能或特性十分关键的基因。
研究者进一步表示,H3K4me3标记之所以能够将各种细胞区别开,实际上是通过一种名为RNA干扰(RNAi)的手段干扰神经前体细胞的运转,而后者可以转化成任意形式的脑细胞。研究者发现RNAi会损害细胞复制和产生神经元的能力,但如果不给基因注入H3K4me3标记或只注入很短片段的H3K4me3标记,则神经前体细胞仍可以正常分解。换句话说,延展后的H3K4me3标记能够长期保持细胞特性。研究者将这一结果在线发表于近日的《细胞》杂志。Brunet指出,找到H3K4me3标记很容易,因此可以很快将之应用于实践,例如癌症诊断。(来源:中国科学报段歆涔)
科学家早在数十年前就已经发现了基础基因密码的存在,即细胞通过转化一串DNA碱基使之成为一个蛋白质的氨基酸。但10多年来,科学家一直在尝试**组蛋白密码——这是一组更加复杂的密码,内嵌在有机体的基因组中。组蛋白是一种DNA环绕在染色体上的蛋白质,通过化学手段调整组蛋白可以调节基因的活动。例如,细胞可以通过将3组甲基原子团附着在一种名为H3的组蛋白的特定位置上,从而关闭基因功能。
但是,若将3组甲基原子团附着在H3的其他位置上,则会产生完全不同的效果,科学家将这种转化称为H3K4me3。细胞通常只会将H3K4me3标记附着在基因组中很短的一段上,但研究者注意到,H3K4me3有时会极大地延展开,进而影响到更多的组蛋白。
为了弄清这些携带H3K4me3标记的组蛋白是否蕴涵某些组蛋白密码,美国斯坦福大学分子遗传学家AnneBrunet和同事追踪研究了20多种细胞类型。他们发现,在不同细胞中,延展后的H3K4me3标记会指向不同位置。研究者可以只依据H3K4me3标记在染色体上的位置辨别细胞的类别,例如肌肉细胞或者肾脏细胞。此外,他们还注意到,H3K4me3标记所指向的通常是对细胞的功能或特性十分关键的基因。
研究者进一步表示,H3K4me3标记之所以能够将各种细胞区别开,实际上是通过一种名为RNA干扰(RNAi)的手段干扰神经前体细胞的运转,而后者可以转化成任意形式的脑细胞。研究者发现RNAi会损害细胞复制和产生神经元的能力,但如果不给基因注入H3K4me3标记或只注入很短片段的H3K4me3标记,则神经前体细胞仍可以正常分解。换句话说,延展后的H3K4me3标记能够长期保持细胞特性。研究者将这一结果在线发表于近日的《细胞》杂志。Brunet指出,找到H3K4me3标记很容易,因此可以很快将之应用于实践,例如癌症诊断。(来源:中国科学报段歆涔)
1,逆转录病毒将GFP基因导入干细胞,这种办法在导入基因时好像比较麻烦,但是检测好像比较简单。
2,将雄性干细胞植入雌性动物,追踪Y染色体,即SRY基因,但是看文献上说SRY追踪的FISH技术复杂,费用高,但是还没有看到具体的技术步骤,也不知道具体要多少费用。
请多指教
Thy-1、c-kit散在分布于HB组织中,主要集中在汇管区,而正常肝脏组织中不表达;CD34及SCF在HB中的表达明显高于正常肝脏组织(P0.05),其中CD34主要在血管内皮系统中分布,SCF主要表达在汇管区;CD56表达于成簇的神经纤维组织中,在HB及正常肝脏组织中表达差异无统计学意义(P0.05)。结论不同干细胞相关表面标志物分布于HB组织中,并且集中表达在特定区域。表达Thy-1/c-kit阳性细胞可能对HB的发生起一定作用。
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