培养乳鼠心肌细胞的缺氧/复氧(A/R)损伤模型和缺氧预处理(APC)模型
原代心肌细胞培养及APC模型的制作参照先前报道的方法[2]。即取出生后1－2d乳鼠心尖部组织,胰酶消化,离心后用含20%小牛血清的DMEM培养基制成细胞悬液,过滤,按差速贴壁分离法纯化心肌细胞,以1×105cells/cm2接种于24孔板,每24h更换培养液。贴壁生长2d,于实验前24h更换为无血清DMEM培养基,随机分组,每组双平行孔,重复4次操作。缺氧/复氧(anoxia/reoxygention,A/R)模型的制作:首先将培养基用N2在密闭容器中平衡1h以上制成无氧培养基,将培养孔中含氧培养基吸出后加入无氧培养基,随后将培养板置于含5%CO2-95%N2(V/V)混合气体的密闭容器中(37℃)进行缺氧孵育10h,此为缺氧操作,然后更换为与O2平衡的培养基,放回培养箱,复氧孵育1h。APC模型的制作:预先给予1次2h缺氧孵育,24h后按A/R操作。 相关动物及产品:实验动物转基因动物小鼠大鼠模式动物模式植物动物器具动物实验仪器动物功能检测设备动物处理设备外科手术设备多道药物灌流系统
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发布于 ： 2021-09-02
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