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真菌细胞壁的破碎方法
2021-07-23
问题描述:

大家好,有谁知道真菌细胞壁的破碎方法,各种试剂的使用浓度,越详细越好,谢谢

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Asonlopin
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不同的菌相差很大,请给出您的菌的具体学名。一般情况下需要自己做实验摸索条件。
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flameofstar
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不同提取方法的差别在于细胞破壁的方式不同,常见的细胞破壁方式主要有:物理法,如冻融法、超声法、珠磨匀浆法、液氮碾磨法等;化学法,常用化学试剂有表面活性剂、盐类、有机溶剂等;生物法(酶法)等.真菌主要分为酵母和霉菌霉菌的破壁方法和植物的基本一致有的酵母还有一些其他的方法。你可以先按照较基本的方法来提取,不行的话可以用试剂盒也不贵。偶最近正在整理protocol呢给你贴一个我用的较好的方法:(真菌DNA提取过程的一部分)呵呵试试吧经过滤抽干的菌丝体,-70冷冻。1g菌丝体加入液氮冷冻,研磨。加4mLCTAB抽提液。,加入2-巯基乙醇(2-ME)至终浓度为2%(V/V),涡漩混匀,65℃保温60min,不时颠倒混匀。据说氯化卞法提取酵母DNA较好,当时买了一瓶,挥发的太厉害了,毒性太大,弄得满实验室都是那个味道,所以就没用,还是把文章贴出来,看看吧。利用氯化苄提取真菌基因组DNA及其分子生物学分析.caj(35.87k)
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