想和各位战友讨论交流一下冰冻切片组织处理的问题

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2016-09-02

问题描述：

小弟近期做冰冻切片一个月了，但是还是出不到什么好的成果。反复思考原因是在进行组织处理的时候出现了问题，想和大家讨论一下。

首先我的处理方法是速冻：

1）把组织取出，用去离子水漂洗表面的血。然后用纸吸干表面的水分。

2）OTC包埋

3）直接放进-80°C冰箱速冻。

这个方法出现的问题是肝和肾出现很多冰晶，到时很难出成果。

然后想请问各位战友一些问题：

1.在取出组织之后，可以不漂洗，直接擦干后OTC包埋吗？那样会不会导致有很多红细胞残留在组织内？

2.-80°C冰箱直接速冻，放置时间的长短会不会和冰晶产生的多少有影响呢？

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Justin001

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有冰晶不是导致实验做不出来的原因，冰晶只是会刺破细胞，破坏组织形态。避免冰晶形成的方法是蔗糖沉底脱水，脱水完成后再OCT包埋冷冻保存

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非法Robot

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速冻用-20°C就行十几分钟就可以切片了，我是这样做的同是OCT包埋不漂洗无冰晶出现

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Bolic_Wu

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Justin001有冰晶不是导致实验做不出来的原因，冰晶只是会刺破细胞，破坏组织形态。避免冰晶形成的方法是蔗糖沉底脱水，脱水完成后再OCT包埋冷冻保存请问蔗糖沉水要梯度脱水吗？例如对肝、肾这类水多的组织。我近期主要做HE染色，冰晶过多导致细胞形态都看不清楚了QAQ

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Bolic_Wu

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非法Robot速冻用-20°C就行十几分钟就可以切片了，我是这样做的同是OCT包埋不漂洗无冰晶出现谢谢这位战友~

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非法Robot

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请问做的什么组织？我也做了一个多月了，一直不满意，可否一起交流交流

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Justin001

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展开引用Bolic_WuJustin001有冰晶不是导致实验做不出来的原因，冰晶只是会刺破细胞，破坏组织形态。避免冰晶形成的方法是蔗糖沉底脱水，脱水完成后再OCT包埋冷冻保存请问蔗糖沉水要梯度脱水吗？例如对肝、肾这类水多的组织。我近期主要做HE染色，冰晶过多导致细胞形态都看不清楚了QAQ......一般是20%后30%梯度脱水

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Bolic_Wu

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非法Robot请问做的什么组织？我也做了一个多月了，一直不满意，可否一起交流交流目前做的是心、肝、脾、肺、肾的病理切片

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Bolic_Wu

用户

展开引用Justin001Bolic_WuJustin001有冰晶不是导致实验做不出来的原因，冰晶只是会刺破细胞，破坏组织形态。避免冰晶形成的方法是蔗糖沉底脱水，脱水完成后再OCT包埋冷冻保存请问蔗糖沉水要梯度脱水吗？例如对肝、肾这类水多的组织。我近期主要做HE染色，冰晶过多导致细胞形态都看不清楚了QAQ一般是20%后30%梯度脱水......谢谢这位战友~

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