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101Bio//(100 rxn)/W2569-100
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101Bio//(100 rxn)/W2569-100
品牌 / 
101Bio
货号 / 
W2569-100
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HiFiScript 1st Strand cDNA Synthesis Kit

Name

HiFiScript 1st Strand cDNA Synthesis Kit

Cat. #

W2569-10
$ 39.00
(10 rxn)
W2569-30
$ 79.00
( 30 rxn)
W2569-100
$199.00
(100 rxn)
How to pay with

Application

  • Reverse transcription, 1st strand cDNA synthesis
  • cDNA library construction
This product is for research use only.

Specifications

Optimal Reaction Temperature:42℃
Final cDNA size:Up to 12 kb
Reaction time:30 ~ 50 min.
Reverse Transcriptase:HiFiScript
RNase H Activity:Reduced
Sensitivity:High
cDNA yield:High

Description and features

HiFiScript 1st Strand cDNA Synthesis Kit has been designed for the first-strand cDNA synthesis kit in a two-step RT-PCR experiments. HiFiScript reverse transcriptase in the kit is a new recombinant Moloney Murine Leukemia Virus Reverse Transcriptase (M-MLV RT) with novel mutations, which endorse HiFiScript the following features:

  • High transcriptional efficiency – higher yields of cDNA
  • High sensitivity – pg level total RNA and/or mRNA can be used to synthesis first strand cDNA.
  • RNase H activity is removed – improved the elongation ability of the enzyme, and increased affinity of transcriptase to RNA template.Generate first strand cDNA up to 12 kb.

The optimized RT Buffer make the reverse transcriptase a wider range of applications, and with high compatibility for subsequent PCR and quantitative PCR experiments.

Shipping / Storage

Ship at 4℃. Store at -20℃ for up to 1 year and avoid freeze-thaw cycles.

Manual (protocol)

101Bio.com HiFiScript 1st Strand cDNA Synthesis Kit

Components

ComponentsAmount
W2569-10W2569-100
HiFiScript, reverse transcriptase, 200 U/μL10 μL100 μL
5X RT Buffer50 μL500 μL
Primer Mix24 μL240 μL
dNTP Mix, 2.5 mM Each50 μL500 μL
DTT, 0.1 M24 μL240 μL
RNase-Free Water1 mL1 mL

RT reaction system

HiFiScript 1st Strand cDNA Synthesis Kit

Note: If the starting RNA is less than 50 ng, RNase Inhibitor (RNasin, Cat.#: W0596) should be added.

Exosome IsolationPurity > 95%
Protein Extraction1 min total protein, 40 min membrane protein
3D Cell Culture Gel30% < mkt="">
PCR Kits50% < mkt="">
Beta-Hexosaminidase Activity Colorimetric Assay Fast and sensitive, High-throughput
Endotoxin-Free Plasmid Kitsmaxi, midi and mini-prep
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公司介绍
公司简介
蚂蚁淘(www.ebiomall.cn)是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台, 该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁 淘搜索全球供应信息,找到合适的产品后在蚂蚁淘下单,然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、 运输到中国口岸,最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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产品名称: 豚鼠内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA Kit(elisa试剂盒) 国内优质ELISA厂家 产品简介: 豚鼠内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA Kit(elisa试剂盒)国内优质ELISA厂家 ELISA试剂盒 国产现货 SIXIN生产的优质ELISA试剂盒直供全国。http://www.aatbio.com.cn/elisa/ 豚鼠内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA Kit(elisa试剂盒)国内 查看更多>
深圳市时得佳科技有限公司南方标准品网在发布的白藜芦醇标准品对照品,现货中检所及自制标准品对照品供应信息,浏览与白藜芦醇标准品对照品,现货中检所及自制标准品对照品相关的产品或在搜索更多与白藜芦醇标准品对照品,现货中检所及自制标准品对照品相关的内容。 查看更多>
南京建成生物工程研究所在发布的谷氨酰胺合成酶(GS)测试盒比色法供应信息,浏览与谷氨酰胺合成酶(GS)测试盒比色法相关的产品或在搜索更多与谷氨酰胺合成酶(GS)测试盒比色法相关的内容。 查看更多>
核酸亲和柱的应用极大地促进了核酸结合调节蛋白特性的研究,这些蛋白质涉及基因表达、染色体修复和复制、基因重组等的调控。核酸结合蛋白可以结合单链 DNA、双链 DNA 或 RNA。DNA 结合蛋白结合 DNA 可以是序列特异的,也可以是非特异的。此外,含有特异寡核苷酸的亲和树脂能用于某些酶的分离,这些酶利用结构非常相似的辅酶,如 NAD 和 NADP。总之,核酸亲和柱在各种蛋白质的纯化和特性研究中是一个有用的工具。 查看更多>
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近日,中科院大连化学物理研究所杨凌团队探索出酶特异性探针底物的研发新策略,该团队采用计算机辅助筛选及酶催化位点局部改造的策略成功设计研发了首个细胞色素P450 1A1亚酶的高特异性荧光探针底物。相关研究成果以“A practical strategy to design and develop an isoform-specific fluorescent probe for a target enzyme: CYP1A1 as a c 查看更多>
产品名称: 兔子细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA Kit(elisa试剂盒) 国内优质ELISA厂家 产品简介: 兔子细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA Kit(elisa试剂盒) 国内优质ELISA厂家 ELISA试剂盒 国产现货 SIXIN生产的优质ELISA试剂盒直供全国。http://www.aatbio.com.cn/elisa/ 兔子细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA 查看更多>
ZytoLightCOL1A1/PDGFB双色双融合FISH探针是由重庆华创医疗设备有限公司代理或销售的Zytovision品牌的试剂,产品来源于德国。重庆华创医疗设备有限公司是中国最权威的ZytoLightCOL1A1/PDGFB双色双融合FISH探针试剂销售服务商之一,在北京等地方销售ZytoLightCOL1A1/PDGFB双色双融合FISH探针试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业ZytoLightCOL1A1/PDGFB双色双融合FISH探针仪器产品及图片,以便挑选到性价 查看更多>
血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)具有降压作用,可以延缓和逆转心室重构,阻止心肌肥厚的进一步发展,改善血管内皮功能和心功能,减少心律失常的发生,还能提高生存率,改善预后。临床上常用的ACEI有卡托普利、依那普利、贝那普利、福辛普利、雷米普利等。... 查看更多>
IS PCR的技术特点 (1)既具有PCR的特异性与高灵敏性,又具有原位杂交的定位准确性;(2)测到低于2个拷贝量的细胞内特定DNA序列,甚至可检测出单一细胞中的仅含一个拷贝的原病毒DNA;(3)有助于细胞内特定核酸序列定位与其形态学变化的结合分析;(4)可用于正常或恶性细胞,感染或非感染细胞的 查看更多>
槲皮素-3-O-葡萄糖苷;槲皮素-3-0-吡喃葡糖苷;异栎素;罗布麻甲素482-35-9Isoquercitrin标准品是由上海远慕生物科技有限公司代理或销售的上海远慕品牌的试剂,产品来源于上海。上海远慕生物科技有限公司是中国最权威的槲皮素-3-O-葡萄糖苷;槲皮素-3-0-吡喃葡糖苷;异栎素;罗布麻甲素482-35-9Isoquercitrin标准品试剂销售服务商之一,在上海等地方销售槲皮素-3-O-葡萄糖苷;槲皮素-3-0-吡喃葡糖苷;异栎素;罗布麻甲素482-35-9Isoquercitrin标准品 查看更多>
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商品咨询
小妹最近开始做PCR,需要有引物和探针,但是自己不怎么会设计。所以,向各位师兄师姐请教一下,有没有免费设计引物和探针的公司。有的话请告知一下,万分感谢!
遗传密码 123
jiangu88002021-07-25
我看trna的测序结果,第一个数字的不同会导致trna序列的不同,第二个数字不同序列和二级结构却一样,而且网上的数据库中会给出后两个数字,那这两个数字到底代表了什么含义?
对照品开启次数怎么定,怎么知道对照品标准品的开启次数多少次,还有工作对照品
siRNA表达载体构建好后,即可进行RNA干扰主体实验。RNA干扰主体实验的重点在于: 按照nature的标准,一个严格的RNAi介导knockdown实验要有6个对照:⒈转染试剂对照(监控转染及培养条件对结果的影响)
有没有人知道那家公司做多肽合成与纯化比较好?

本人非分析化学专业学生,但是最近可能要用到高效液相的强大功能来做动物组织糖皮质激素的检测。

想请问各位专家,做高效液相时,标准品和对照品各是什么?我都需要购买吗?

先谢谢有心人的解答!

mRNA模板经反转录酶催化体外反转录cDNA步骤应该与DNA复制程类似需要原料mRNA模板四脱氧核糖核苷酸逆转录酶能量注意:获DNA片段含非编码区序列专业答).构建cDNA文库:物细胞总mRNA模板用反转录酶合互补双链cDNA接载体转入宿主建立基文库cDNA文库1、mRNA提取及其完整性确定1)总RNA提取RNA提取:APGC或NP-40或应用试剂盒提取总RNA2)mRNA离高等真核物mRNA3'端均poly(A)尾总RNA通寡聚(DT)纤维柱离mRNA或利用磁珠制备纯mRNA某些情况裂解细胞用蔗糖梯度制备mRNA-核糖体复合物作提取mRNA替换途径3)mRNA纯化①按照总mRNA进行级主要用琼脂糖凝胶电泳蔗糖密度梯度离进行级;②聚核糖体免疫纯化利用抗体纯化合目肽4)mRNA完整性确定确定mRNA完整性三种:①直接检测mRNA;②测定mRNA转译能力;③检测总mRNA指导合cDNA第链能力2、cDNA合克隆1)cDNA第链合用亲层析mRNA根据mRNA3'端poly(A)尾结构原理用12~20核苷酸oligo(dT)与纯化mRNA混合oligo(dT)与poly(A)结合作反转录酶引物反转录反应产物条RNA-DNA杂交链oligo(dT)结合mRNA3'端合全cDNA需要反转录酶mRNA端移另端种全合难达尤其mRNA链建立种随机引物合cDNA随机引物种度6~10核苷酸由4种碱基随机组DNA片段与oligo(dT)仅与mRNA3'端结合同mRNA同位点结合随机引物合产物RNA-DNA杂交体cDNA克隆载体前必须种杂交体RNA转变DNA链即形双链DNA2).双链cDNA合合cDNA第二条链两种种利用cDNA第链3'末端现发夹环特征种发夹结构反转录酶第链末端返折并且进行复制第链结合cDNA第二链提供用引物用种合双链cDNA端发夹环用单链特异S1核酸酶切S1核酸酶处理修剪cDNA顺序使cDNA丢失mRNA5'端部顺序另种用肠杆菌RNaseH进行修饰RNaseH能识别RNA-DNA杂交并其RNA切割短片段些RNA短片段仍与cDNA第链结合新合DNA所取代新合DNA存切口用DNA连接酶些切口连接起形条完整DNA链RNaseH优于S1核酸酶能获包括mRNA5'端全部或绝部更顺序cDNA3)cDNA重组载体合cDNA与载体DNA进行连接般3种:①借助于末端转移酶3'-OH端合均聚物能力双链cDNA线性化载体DNA3'-OH端别加均聚核苷酸链;②双链cDNA线性化载体DNA别用Klenow片段进行末端补平用T4DNA连接酶进行齐连接形重组体;③通粘性末端连接4).转化重组载体DNA定条件转化入肠杆菌形携带质粒菌株同重组DNA含同cDNA基整转化含自mRNA群体各种cDNA基转化群体构该mRNA全部遗传信息cDNA基文库5).目cDNA克隆鉴定用于cDNA文库筛选鉴定目cDNA主要3种:①核酸杂交②免疫杂交检测③cDNA同胞选择

最近测序做了TRNAfragment,但是在验证测序结果上遇到了问题,TRF大小在30左右,按照mirna设计颈环引物跑PCR,结果测序为0的数据也能跑出来,后来师兄分析可能把成熟的TRNA也检测出来了,不知道有哪位大神可以指导下TRF的引物应该如何设计啊?

各位大侠,本人纯属门外汉,领导安排了任务要设计新的PCR引物或者探针的检验方法,由于本人专业不是很对口,所以希望各位可以给点意见或者具体的方法,感激不尽!!!

湿转,跑胶结束后能看到Marker,转膜条件:300mA,150min,因为目的蛋白160kd左右所以时间比较久.转完之后pvdf膜上却未看到marker,丽春红染色可隐约看到一个条带,请问有哪位高人晓得原因么

腺病毒载体的优点

1. 宿主范围广, 对人致病性低

腺病毒载体系统可广泛用于人类及非人类蛋白的表达。腺病毒可感染一系列哺乳动物细胞,因此在大多哺乳动物细胞和组织中均可用来表达重组蛋白。特别需要指出的是:腺病毒具有嗜上皮细胞性,而人类的大多数的肿瘤就是上皮细胞来源的。另外,腺病毒的复制基因和致病基因均已相当清楚,在人群中早已流行(70-80%成人体内都有腺病毒的中和抗体存在)。人类感染野生型腺病毒后仅产生轻微的自限性症状,且病毒唑治疗有效。
2.
在增殖和非增殖细胞中感染和表达基因

逆转录病毒只能感染增殖性细胞,因此DNA转染不能在非增殖细胞中进行,而必须使细胞处于持续培养状态。腺病毒则能感染几乎所有的细胞类型,除了一些抗腺病毒感染的淋巴瘤细胞。腺病毒是研究原代非增殖细胞基因表达的最佳系统,它可以使转化细胞和原代细胞中得到的结果直接进行对比。
3.
能有效进行增殖,滴度高
腺病毒系统可产生1010到1011VP/ml,浓缩后可达1013VP/ml,这一特点使它非常适用于基因治疗。
4.
与人类基因同源

腺病毒载体系统一般应用人类病毒作为载体,以人类细胞作为宿主,因此为人类蛋白进行准确的翻译后加工和适当的折叠提供了一个理想的环境。大多数人类蛋白都可达到高水平表达并且具有完全的功能。
5.
不整合到染色体中,无插入致突变性

逆转录病毒可随机整合到宿主染色体,导致基因失活或激活癌基因。而腺病毒则除了卵细胞以外几乎在所有已知细胞中都不整合到染色体中,因此不会干扰其它的宿主基因。在卵细胞中整合单拷贝病毒则是产生具有特定特征的转基因动物的一个较好的系统。
6.
能在悬浮培养液中扩增

293细胞可以适应悬浮培养,这一调整可使病毒大量扩增。大量事实证明悬浮293细胞可在1~20L的生物反应器中表达重组蛋白。
7. 能同时表达多个基因

这是第一个可以在同一细胞株或组织中用来设计表达多个基因的表达系统。最简单的方法是将含有两个基因的双表达盒插入腺病毒转移载体中,或者用不同的重组病毒共转染目的细胞株来分别表达一个蛋白。测定不同重组病毒的MOI比值可正确估计各重组蛋白的相对共表达情况。

正是由于具有以上一些优点,腺病毒被极其广泛地应用于体外基因转导、体内接种疫苗、和基因治疗等各个领域。
如果你做的事荧光定量PCR,其引物和一般引物在构成上是没有什么区别的,只是要更加注意引物二聚体、PCR产物大小等问题。染料法不需要其他东西,探针法还需要taqman探针,这个探针的设计是比较有讲究的,并且上面有荧光集团和猝灭基团。具体设计,一般使用相关软件进行。