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DNA文库构建后TaqMan试剂盒QPCR定量不足
2021-07-30
问题描述:

各位好,希望能得到你的建议与帮助!

从人的冰冻组织提取DNA,Nanodrop定量纯度a260/a280在1.86左右,qubit2.0定量浓度达到了100ng/ul以上,按照Thermo的建库试剂盒操作,建库完成后,利用qPCR进行文库定量,有几个文库定量值只有20pM,问题在哪呢?

我试着更换Barcode重新建库,部分文库定量居然达到了600多pM,问了技术支持,他们也没有相关经验,请问群里的大神可否遇到过?

建库试剂盒是在保质期内IONAmpliseqlibrarykit2.0,引物是2013年自己定制的panel,一直储藏在-20℃冰箱,Barcode超出保质期半年。

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梦见宾
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我们建库没有用这个产品
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富家子弟
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梦见宾我们建库没有用这个产品因为我们用的是ionpgm仪器,一直以来都是使用的这个建库试剂盒。请问,你们使用的是什么产品?
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梦见宾
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富家子弟因为我们用的是ionpgm仪器,一直以来都是使用的这个建库试剂盒。请问,你们使用的是什么产品?我们用的是clontech。
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jiandanai_008
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富家子弟因为我们用的是ionpgm仪器,一直以来都是使用的这个建库试剂盒。请问,你们使用的是什么产品?Qiagen的建库试剂盒
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