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天根的DNA提取
试剂盒中,组织样品要求先将组织制备成单细胞悬液,再进行下一步操作。http://www.tiangen.com/?productShow/t1/1/id/26.html请问大家用过这个试剂盒的是怎么操作的?
作为何种用途啊,还有材料的种类呢?动植物方面差别很大,我个人只了解植物、细菌、藻类、土壤DNA的提取,植物总DNA的哪里的都差不多,价格0.5-2.5元每个样品,关键在研磨和酚类、多糖的去除(抽提),细菌核基因组DNA和土壤宏基因组冻融1.5*CTAB法足以,也没有太好的盒子。volume62提到的磁珠法绝对是非常好的方法,而且十分高效,适合高通量,就是贵啊,对样品的要求也较严格。其实大多数DNA试剂盒都是基于CTAB或SDS法制作的,其优点一般是简单快速,外加药品的来源稳定(自己配药的话这方面可以考虑西格玛分装或者国药,其实真的国药的是很不错的,只是不好搞),再就是配方好了,毕竟试剂公司的研发部门也不是白饭的。
主要有: 1.磁珠法核酸提取试剂盒2.磁珠法提取DNA试剂盒3.DNA提取试剂盒(离心柱法)4.磁珠法RNA提取试剂盒5.RNA提取试剂盒(离心柱法)6.磁珠法植物基因组DNA提取试剂盒7.反转录试剂盒8.胶回收试剂盒9.PCR纯化试剂盒10.病毒核酸提取试剂盒(磁。
DNA提取方法的选择:全血提取试剂盒一般有离心柱和溶液型两种(比如Qiagen、Promega、Bioteke;摒弃酚氯仿手提的方法,时间长毒性大),原理及步骤基本相同。虽然各公司推出了N多型号,让人不知如何去选择,但从原理和操作步骤看,基本就是离心柱和溶液型两种。一般来说,离心柱(DP1801)的提取纯度高一些,但是处理量小(0.1-1ml)、得率略低;溶液型(DP2101或DP2201)的提取量大(1-10ml)得率也高于离心柱。医院的血液标本一般在2ml以上,一般选择溶液型的方法提取.在说到国产和进口差别的时候,很多人以为进口一定比国产的好,我们觉得没有最好,只有更好!在不断的进行试验优化之后,全血基因组DNA提取试剂盒DP2101或DP2201开创了第三代技术,不需要蛋白酶K消化,进口的都是要借助蛋白酶K的啊!DP2101或DP2201减少了蛋白酶K现配现用的麻烦和消化的时间,而且提取量和稳定性更好。
我正在准备制备细胞样品用于检测凋亡的DNAladder,不知道DNAladder的DNA提取与普通的DNA提取有无不同之处,可否用tripure或者一般的DNA提取
试剂盒提取细胞的DNA用于凋亡的DNAladder检测吗?也就是可不可以不用专用的用于凋亡检测的DNAladder提取试剂盒?
全血基因组DNA提取试剂盒(离心柱型)作用原来具体是这样的:独特的结合液/蛋白酶K迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶,然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,抑制物去除液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除,最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱. 试剂盒特点: 不需要使用有毒的苯酚等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤. 快速,简捷,单个样品操作一般可在20分钟内完成. 多次柱漂洗确保高纯度,典型的产量200μl全血可提取出3-6μg,纯度达1.1.9,长度可达30Kb-50kb,可直接用于PCR,Southern-blot和各种酶切反应. 从十几个配方中优选出的红细胞裂解液配方,裂解快速完全,客户可根据需要选择购买. 说明书中针对实验过程出现的疑难做出了详细的解答,帮助你解决实验过程中遇到的问题(如标本中含有血凝块、红细胞裂解不完全、DNA产量低、DNA下游酶切不能切开或者酶切不完全、DNA长度小于15kb、A260吸光值异常偏高、洗脱下来的DNA溶液还带有轻微的颜色等).
装试剂的盒子按方法可以分为普通PCR试剂盒(定性),荧光定量PCR试剂盒(定量).荧光定量PCR试剂盒根据染料又分为SYBEGREEN法,探针法,等.
根据模板的类型分为DNA类PCR试剂盒和RNA类PCR试剂盒
PCR mix厂家:普洛麦格公司,QIAGEN公司,罗氏公司,TAKARA公司.
成品PCR试剂盒厂家:深圳匹基,上海之江,中山达安,上海科华,上海复星.
:)各位战友,有没有谁用过北京五洲元业科贸的PCR基因组DNA模板快速制备
试剂盒吗?!
有试剂A和B,传说10-30分钟就可以提取出来。不知道属不属实啊?
而且1000次580块钱!如果有用过的,可否跟我传授一下心得啊?
PCRfree顾名思义,就是不使用PCR扩增而直接构建文库,需要特定的试剂盒,这样的文库免除了因扩增导致的错误,没有偏好性,不过成本相对高一些
各位好,希望能得到你的建议与帮助!
从人的冰冻组织提取DNA,Nanodrop定量纯度a260/a280在1.86左右,qubit2.0定量浓度达到了100ng/ul以上,按照Thermo的建库试剂盒操作,建库完成后,利用qPCR进行文库定量,有几个文库定量值只有20pM,问题在哪呢?
我试着更换Barcode重新建库,部分文库定量居然达到了600多pM,问了技术支持,他们也没有相关经验,请问群里的大神可否遇到过?
建库试剂盒是在保质期内IONAmpliseqlibrarykit2.0,引物是2013年自己定制的panel,一直储藏在-20℃冰箱,Barcode超出保质期半年。
DNA提取试剂盒是根据氯化芐法构建的,能够从样本中提取基因组DNA的试剂盒。氯化苄具有能将含有纤维素等的细胞壁中的羟基苄基化,从而破坏细胞壁的特性。本制品利用了氯化苄的这一特性,将植物样品冻结融解后,再使用Pipet Tip的尖端将植物样品在Microtube壁上数次按压即可破坏细胞壁。本法与传统方法相比,省去了液氮研磨等烦琐步骤,有利于一次性处理大量样品。而且,本制品经过了改良,热处理时间只需15分钟,使用本制品从实验开始至水相回收只需30分钟时间。得到的基因组DNA可以进行PCR扩增及限制酶处理等。
我以前溶解DNA、PCR产物用的一直是fermentas的PCR酶带的一些nuclear-free的水。
现在..用完了..因为接下来的PCR产物会做酶切,测序,而且保存时间也可能比较长(1个月左右吧)。
Qiagen的DNA提取
试剂盒中提到过溶解DNA不可以用酸性的水,会发生水解。但是超
纯水机出来的水确实是酸性的...再高压过估计也不会改变。该怎么制备呢?