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Lucigen/BAC-Optimized Replicator v2.0 Electrocompetent Cells/60210-1/12 rxns (DUOs)
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Lucigen/BAC-Optimized Replicator v2.0 Electrocompetent Cells/60210-1/12 rxns (DUOs)
品牌 / 
LGC
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60210-1
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  • CreatelibrariesfromA/T-orG/C-richgenomes.
  • Clonegeneclustersoroperons.
  • HighinsertstABIlity.
  • InducIBLecopynumber.

Lucigen'sCopyRight®v2.0BACcloningkitswithpSMART®BAC(Figure1)orpEZBAC(Figure2)vectorandBAC-OptimizedReplicator™v2.0ElectrocompetentCellsresultinunprecedentedaccuracy,reliability,andefficiencyinBACcloningandlibraryconstruction.ThesevectorsincorporatetheCloneSmart®transcription-freetechnology,whichminimizescloningbiasandenablescloningofotherwisetoxicgenes,alongwithinduciblecopynumberamplification(20-50X)forhighDNAyieldsandalacZ-sacBstufferfragmentthateliminatesuncutvectorfromrecombinants,resultinginzerobackground. UnlikeotherBACcloningsystems,Lucigen'sCloneSmarttechnologyassuresthateven"unclonable"insertsarestablymaintained.Sequencesarenotlostorrearrangedinthecloningprocess. CopyRightKitsoffersuperiorperformanceforBACcloningatamuchbetterpricethanotherkits. Figure3showsanexampleofaRandomShearBAClibrarygeneratedwithpSMARTBAC.

pSMART BAC Vector Map

pEZ BAC Vector Map

Figure1.CopyRightvectorpSMARTBAC. ori2,repE,IncC-single-copyoriginofreplication;oriV-inducibleoriginofreplication;parA,B,C-partitiongenes;Cm^r-chloramphenicol-resistancegene;cosN-lamBDapackagingsignal;T-CloneSmarttranscriptionterminators;sacB-sucrasegene.Approximatepositionsofsequencingprimersandtranscriptionterminatorsareindicated.

Figure2.CopyRightvectorpEZBAC.ori2,repE,IncC,single-copyoriginofreplication;oriV-inducibleoriginofreplication;parA,B,C,partitiongenes;Cm^r-chloramphenicol-resistancegene;cosN-lambdapackagingsignal;lacZ-alphapeptideofthebetagalactosidasegene.Approximatepositionsofsequencingprimersandtranscriptionterminatorsareindicated.

 

Arabidopsis BAC gel

Figure3.ArabidopsisRandomShearBACLibraryinthepSMARTBACvector.7,680cloneswereobtained,withanaverageinsertsizeof105kband~5Xgenomecoverage.

ConvenientSuccess
Efficientlyobtainyourcloneorcreateyourlibrary—theCopyRightv2.0CloningKitseliminatetediousvectorandcompetentcellpreparation,aswellastime-consumingQCexperiments. Kitsincludeoptimizedreagents,ligation-readyvector,highlyefficientelectrocompetentcells,detailedinstructions,andatrouble-shootingguide.

ORDERINFORMATION

EachCopyRight®v2.0BACCloningKitcontains:pre-cutvector(pSMARTBACwithachoiceofBamHIorHindIIIsites),CopyRightDNALigase,CopyRight5XLigationBuffer,PositiveControlInsertDNA,SequencingPrimers,BAC-OptimizedReplicatorv2.0ElectrocompetentCellsinDUOpackaging(2transformationspertube),PositiveControlInsertDNA,RecoveryMedium,ArabinoseInductionSolution,andcompleteprotocols.EachCopyRightpEZBACCloningKitcontains:pre-cutCopyRightvector(pEZBACBlunt),CloneSmartDNALigase,CloneDirect™10XLigationBuffer(includesATP),PositiveControlInsertDNA,ReplicatorInductionSolution,SequencingPrimers,andcompleteprotocols.KitswithcellsalsoincludeBAC-OptimizedReplicatorv2.0ElectrocompetentCells(>1×1010 cfu/µgDNA)packagedintwotransformationspertube(DUOs),PositiveControlPlasmid,andRecoveryMedium.

Pleasenotethatthefollowingvectorshavebeendiscontinued:pSMARTBACEcoRI(catalognumbers42031-1,42031-2)andpEZBACBamHI(catalognumbers42007-1,42007-2and42012-1).”

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蚂蚁淘(www.ebiomall.cn)是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台, 该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁 淘搜索全球供应信息,找到合适的产品后在蚂蚁淘下单,然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、 运输到中国口岸,最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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实验原理重组质粒的构建T质粒载体重组的DNA分子是在DNA连接酶的作用下,有Mg2 、ATP存在的连接缓冲系统中,将分别经酶切的载体分子与外源DNA分子进行连接。... 查看更多>
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不一样的无缝克隆,仅需三步即可完成基因克隆!,Lucigen提供全新、高效快速的基因克隆方法,无需DNA纯化以及连接酶、重组酶的作用,只需三步即可完成 查看更多>
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什么是双克隆
各位大哥大姐,大家好!
现在小弟碰见一个难题,我想克隆一个基因,但是我在NCBI一检索,发现别人只发表了这个基因的DNA全长,但是,CDNA没有发表,也没有发表文章,想请问下,在不知道CDNA的情况下,请问我应该如何做这个基因的克隆???(全基因组也不知道,其他生物没有这种基因)
最近用stratagene点突变试剂盒quickchangesitedirectedmutagenesiskit作定点突变,完全是按照公司提供的protocol做的,模版经电泳和测序也没有问题,但最终突变后质粒转染细菌老是长不出克隆,可能是什么问题?作哪些调整?求教了
用克隆片段试剂叫缝克隆试剂盒楼提同科物操作简单快速效率高
缝克隆试剂盒叫同源重组试剂盒实验流程给参考:图" class="ikqb_img_alink">
克隆启用GenomeWalkerTM Universal Kit试剂盒错找代理商购买咯价格便宜折扣
我要做载体构建的课题,想用pCDNA3.1TATOPO克隆试剂盒进行连接,不用限制酶切割即能把目的基因连入载体里,我对这个原理不太清楚,有用过的可以详细介绍一下吗?现在哪个公司做这种试剂盒?从哪里可以买得到?先谢谢大家了!
全长ORF克隆常见问题解答123
快乐分享2021-09-07

最近在做DAPK1蛋白的相关实验,想做DAPK1在细胞中的过表达,网上查到有这样一个表达载体产品,想问问这个产品可用来转染细胞做DAPK1蛋白的过表达吗?如果可以,我还需要什么其他的重要试剂?比如lipo2000什么的。还有上图中参考序列ORF长度:4293bp,是不是指的是DAPK1基因的长度?我看网上介绍说pCMV3载体的大小也有6000多bp,这样二者一起会不会太大,影响转染呢?

病毒的复制过程叫做复制周期。其大致可分为连续的五个阶段:吸附、侵入、脱壳、病毒大分子的合成、病毒的装配与释放。
详见:http://zhidao.baidu.com/question/1831844001436785260.html?fr=iks&word=%B2%A1%B6%BE%B5%C4%B8%B4%D6%C6%D6%DC%C6%DA%B5%C4%B9%FD%B3%CC%3F&ie=gbk
您也可以自己制作无缝克隆试剂盒---SeamlessCloning(无缝克隆)简介 
SeamlessCloning(无缝克隆)技术提供了一种新的、高效快速的基因克隆方法,只要插入的DNA片段末端与载体末端具有15-25个重叠碱基序列就可以在载体的任意位点完成克隆重组。
产品特点:
1.30分钟可以将一个或者多个长、短PCR扩增片段(平端、A端均可)插入载体。
2.不受载体和插入片段酶切位点的可用性和平端/粘性末端的限制,可以在任意位点进行克隆。
3.无缝克隆,插入点不会引入不需要的碱基序列。
4.高效、准确,阳性率>95%
无缝克隆技术严格意义不是新技术,类似于乔布斯天才的集成了现成的电子元器件造出Iphone,开创了智能手机新时代一样。美国的吉布斯在2009年首次用一个新颖的思路,将3种现有的商品化的酶组合起来,达到了无缝克隆的效果,开创了无缝克隆新时代。因此,您也可以按照吉布斯的思路亲自组装无缝克隆试剂盒,领略天才的思路。当然你也可以通过购买北京艾德莱(aidlab)的无缝克隆试剂盒CV1201SeamlessAssemblyandCloningkit,体会无缝克隆的妙处。

原理说明:紫红色和绿色2个片段为需要连接的双链DNA片段,它们末端有相同的15-25个重叠序列(黑色),首先T5exonuclease核酸外切酶切去5’端的一些碱基,形成3’端突出的单链,3’端单链互补退火;然后Phusion高保真聚合酶补上两条单链之间的缺口(gaps);最后TaqDNAligase将相邻的单链裂口(nicks)连接补齐。
以上用到的三种酶NEB公司全部有商品化销售,因此,您可以DIY自己的无缝克隆试剂盒。但是艾德莱生物也提醒您,如果您不能自己表达纯化生产这些酶降低成本,那么购买这些商品化酶DIY也会比较昂贵,不是发烧友,还是购买艾德莱生物(aidlab)帮您精心准备的CV1201SeamlessAssemblyandCloningkit。http://www.aidlab.cn/products1.asp?anclassid=91
RT,我用的是近岸的试剂盒,试了几次都没做出来,有用过无缝克隆试剂盒来交流交流,不是做敲除载体构建的也可以聊聊~
说PCR技术双链需要两种引物具体问题具体析取决于目
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