Cloning 无缝克隆试剂盒
货号: | SCNP-10/50 |
数量: | 大量 |
产品规格:10次反应、50次反应
试剂保存:-20℃保存,不宜反复冻融
产品简介:
无缝克隆试剂盒提供了一种新颖、高效、快速的基因克隆方法,只需DNA插入片段末端与载体末端具有15-20个同源碱基序列,就可以在载体的任意位点完成一个或多个目标DNA片段的克隆重组,而不需要任何限制性内切酶和连接酶。
产品特色:
1.灵活的克隆位点:任何载体的任意位置。
2.快速简便:30分钟完成载体构建。
3.精确:不会增加任何额外的程序。
4.效率高:高达90%阳性克隆率。
适用范围:
操作流程:
1.采用酶切或PCR扩增方法将载体线性化。
2.使用设计好的引物进行目的DNA片段的PCR扩增。
3.将目的DNA片段和线性化载体以摩尔比2:1加到试管中进行重组反应:
4.混匀后在42℃孵育30分种,然后转移到冰上。
5.使用5μl反应液转化到感应态细菌中。
PCR引物设计:
1.引物的质量对重组反应的成功率有很大影响,因此强烈建议使用HPLC或PAGE纯化的引物。
2.引物设计时应该在遵循常规引物设计原则的基础上,把15-20个同源碱基序列导入引物。根据线性化载体末端的不同类型进行如下引物设计:
温馨提示:不可用于临床治疗。
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发布于 : 2020-08-27
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