急急急急急急！！！克隆基因目的片断大小为180bp左右、可行吗？
2021-07-31
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csh7311
用户
不错啊！将180bp克隆测序，序列在ncbi上blast比对一下，看是否你的目的基因，再作下一步的3‘RACE和5’RACE，即可获得全长基因。
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zjubell
用户180bp可能在蓝白斑筛选时会出错，片段过小，有可能找不到白斑了。
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tiger22
用户只提醒一个问题：多切几管多回收，越多越好。
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xiaoyao0305
用户谢谢各位！我试一试！~
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bentz
用户180bp的基因还需要克隆吗？直接合成就行了，或者自己拿3，4条引物相互进行PCR反应即得结果，屡试屡爽。
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xiaoyao0305
用户兼并引物来克隆未知基因片断、再做全基因克隆。未知基因序列如何合成？敬请指教！先谢谢了！
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zjubell
用户bentz180bp的基因还需要克隆吗？直接合成就行了，或者自己拿3，4条引物相互进行PCR反应即得结果，屡试屡爽。180bp只是基因中的一部分，他要做的是预测与克隆基因，如果都不知道基因的序列，如何去合成啊？根据其他物种的同源性，用兼并引物拉出180bp序列，然后在中间设计一条上游引物，并做3’race,已经是比较常规的方法了。
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