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酵母遗传学方法实验指南——技术和方案一技术和方案15 酵母菌落PCR
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内容简介: 《酵母遗传学方法实验指南(第二版)》作为冷泉港实验室出版社的经典酵母实验教程的第二版,收录了酵母研究中常用的减数分裂作图、转化、基因置换等11个实验,以及酵母蛋白抽提、活体染色、RNA分离等28种技术方法。文字简洁明了,内容全面而详细,兼顾经典和前沿。
适合于大学院校、科研单位的教师、学生及研究人员作为实验指导书,亦可供从事酵母相关生物制品行业的科技人员参考。

实验一 酵母细胞的观察
实验二 营养缺陷型、温度敏感型和渗透压敏感型突变株的分离和鉴别
实验三 减数分裂作图
实验四 有丝分裂重组和随机孢子分析
实验五 酵母转化
实验六 合成致死突变体
实验七 基因置换
实验八 ras2抑制基因的分离
实验九 细胞型操作
实验十用插入诱变法分离突变体
实验十一 利用双杂交差异互作筛选以分离功能突变体

技术和方案篇
技术和方案1 酵母的高效转化
技术和方案2 快速粗放的酵母菌落质粒转化法
技术和方案3 酵母DNA分离
技术和方案4 酵母蛋白质的抽提
技术和方案5 TAP纯化方法
技术和方案6 酵母RNA的分离
技术和方案7 质粒DNA的羟胺突变
技术和方案8 酵母β-半乳糖苷酶的测定
技术和方案9 羧肽酶Y的平板鉴定
技术和方案10 随机孢子分析
技术和方案11 酵母活细胞染色
技术和方案12 酵母免疫荧光法
技术和方案13 已固定细胞的肌动蛋白染色
技术和方案14 PCR介导基因破坏法
技术和方案15 酵母菌落PCR
技术和方案16 分光光度法测酵母细胞密度
技术和方案17 细胞同步化
技术和方案18 染色质免疫沉淀
技术和方案19 酵母DNA流式细胞记数
技术和方案20 对数生长
技术和方案21 EMS诱变
技术和方案22 四分体解剖
技术和方案23 制备四分体解剖针
技术和方案24 挑取合子
技术和方案25 测定铺板效率
技术和方案26 小量提取E.coli DNA
技术和方案27 E.coli感受态的制备与转化
技术和方案28 系统缺失菌株的保存及操作

附录A 培养基
附录B 菌株保存
附录C 酵母遗传图谱和物理图谱
附录D 平板划线模板
附录E 菌株核型分析电泳的Southern印迹作图
附录F 菌株
附录G 用标准血球计数板进行酵母细胞计数
附录H 四分孢子计分表


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