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点击量: 5         蚂蚁淘 更新于 2018-12-26
促细胞分裂剂激活单核细胞基本原理 :本方法是通过促细胞分裂剂与细胞表面受体相互作用,在体外触发细胞的多克隆激活。根据所使用的促细胞分裂剂的不同,应答细胞可以是T淋巴细胞、B >>
点击量: 5         蚂蚁淘 更新于 2018-12-26
CMC中效应细胞的制备1)用淋巴细胞分离液分离PBMC1.抽取正常人静脉血加到肝素抗凝管中,加2倍量磷酸盐(PBS)悬浮细胞。将此悬液小心加在淋巴细胞分离液上,400×g离心30分钟。2.离心后红 >>
点击量: 7         蚂蚁淘 更新于 2018-12-26
直接计数细胞1.如果靶细胞是帖壁细胞,在细胞因子作用适当时间后,用生理盐水洗去死亡细胞,用0.25%胰蛋白酶液消化细胞。加适量生理盐水吹打,使细胞分散成单个细胞。直接在血细胞 >>
点击量: 6         蚂蚁淘 更新于 2018-12-26
4小时51Cr释放法检测CMC活性1)用51Cr铬酸钠标记靶细胞短期标记法1.用RPMI-1640培养液洗涤107靶细胞,去上清液。用0.5ml不含碳酸氢钠的完全培养液悬浮细胞。加入100μCi(3.7MBq)51Cr铬酸钠,37℃ >>
点击量: 5         蚂蚁淘 更新于 2018-12-26
[3H]脱氧胸苷释放法1)标记靶细胞1.用含5%小牛血清的RPMI-1640培养液将靶细胞配成2×106/ml,取10μCi(370kBq)[3H]TdR加到1ml靶细胞中,37℃水浴标记4~6小时,每30分钟摇晃一次。2.用RPMI-16... >>
点击量: 7         蚂蚁淘 更新于 2018-12-26
三磷酸腺苷检测法(ATP法)1.ATP反应液(Bio-Orbit)是粉末状混合物,含有荧光素、荧光素酶、0.5mmol醋酸镁、50mg BSA和0.1μmol无机焦磷酸。在4℃可以保存1个月。用前用10ml含2mmol/L EDTA的0.1... >>
点击量: 8         蚂蚁淘 更新于 2018-12-26
LDH释放法1)测定方法1.用含5%小牛血清的RPMI-1640培养液将靶细胞调整到5×104~2×105/ml,此浓度需根据情况预先标定。2.在96孔圆底细胞培养板中加入靶细胞,每孔加100μl。3个效应细胞自然释 >>
点击量: 7         蚂蚁淘 更新于 2018-12-26
时间分辩荧光分析法1)铕荧光检测法标记靶细胞1.EuCl3的制备:称取58.08mg Eu2O3,用少量1N HCl搅拌至溶解,再用1N NaOH调节pH至4.0。加双蒸水配成33~100mmol/L的保存液,4℃保存备用。2.用预冷的 >>
点击量: 8         蚂蚁淘 更新于 2018-12-26
用MTT检测法测定CMC1. Fen细胞培养于含10%小牛血清的RPMI-1640培养液中,在25cm2培养瓶中生长到接近汇合。用含0.05%胰蛋白酶,0.02% EDTA的PBS消化细胞5分钟,洗涤后,用细胞培养液将细胞配成1 >>
点击量: 6         蚂蚁淘 更新于 2018-12-26
单细胞CMC试验1.用细胞培养液等量混合效应细胞和靶细胞,30℃水浴10分钟。室温中250×g离心5分钟,去上清液。同量靶细胞不加效应细胞同样处理作为对照。2.用少量细胞培养液轻轻悬浮细胞 >>
点击量: 9         蚂蚁淘 更新于 2018-12-26
荧光法检测CMC1.用含10%小牛血清和抗生素的RPMI-1640培养液将K562细胞配成1×105/ml浓度。用同样培养液将PBMC配成1×106/ml浓度。2.取96孔圆底细胞培养板,每孔加0.1ml K562细胞悬液;每孔加适量PBM... >>
点击量: 5         蚂蚁淘 更新于 2018-12-20
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