大家帮我看看我跑的SDSPAGE,帮我找一下原因。
2021-07-25
问题描述：
每孔加样量是：32ul蛋白＋8ul上样buffer（5乘）
1－5号蛋白浓度分别是（ug/ul）：0.71.12.11.64.8
1－3号为一种细胞，4和5号为LO2细胞
1－4号采用同一种方法提取蛋白，5号采用的是另一种方法
问题：4号比5号的蛋白浓度高很多，但是条带还没没5号的明显？？
4号和5号为什么会有拖尾尤其是4号，而1－3号则是条带太少（只有3条）
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化石
用户
1-3号蛋白质提取方法或过程有问题。4号是1.6ug/ul，5号是4.8ug/ul，应该是5号浓度高才对呀？不过，如果您搞错了，4号浓度高于5号，由于提取方法不同，有必要考虑定量时不同提取缓冲液的影响（导致定量不准）。
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wenyangan
用户漩涡震荡会不会打断蛋白质的肽链
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drhl
用户4号和5号为什么会有拖尾————你在上样前是否离心了？？如果离心了，你在上样时吸取的是否只是上清？你的蛋白的脱尾现象，应该是你把蛋白沉淀也加倒孔里了，原因可能就是上面的两个问题。
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