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Anaspec/Crosstide [GRPRTSSFAEG]/5 mg/AS-60209-5
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Anaspec/Crosstide [GRPRTSSFAEG]/5 mg/AS-60209-5
品牌 / 
Anaspec
货号 / 
AS-60209-5
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DescriptionSequence(One-Letter Code)
Product NameCrosstide [GRPRTSSFAEG]GRPRTSSFAEG
Size5 mg
Catalog #AS-60209-5
US$$289
Purity% Peak Area By HPLC ≥ 95%

Crosstide is a peptide analog of glycogen synthase kinase-3 (GSK-3) that functions as a natural substrate for Akt/PKB. It displays similar specificities towards PKBα, PKBβ and PKBγ isoforms. It is also recognized by MAPKAP kinase-1 and p70S6K. The fluorescent and biotinlyated peptides demonstrate similar enzyme activities.

Detailed InformationDatasheet
Material Safety Data Sheets (MSDS)
Storage-20°C
ReferencesRef: Dai, F. et al. Biochem. Biophys. Res. Commun. 293, 1191 (2002). Meier, R. et al. J. Biol. Chem. 272, 30491 (1997); Chan, TO. et al. Ann. Rev. Biochem. 68, 965 (1999).
Molecular Weight1164.2
GRPRTSSFAEG
Sequence(Three-Letter Code)H - Gly - Arg - Pro - Arg - Thr - Ser - Ser - Phe - Ala - Glu - Gly - OH
Product CitationsOkamura, T. et al. (2009). Tyrosine phosphorylation of the human glutathione S-transferase P1 by epidermal growth factor receptor.J. Biol. Chem. 284, 16979.
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2021-09-03
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2021-09-21
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2021-08-31
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看你有几个转膜仪,一个一次能转2张膜,每张膜能测的样本数取决于你跑电泳时加样孔有多少个,也就是梳子的规格,但是得留出一条泳道给marker用,其他都可上样,应该有十个孔左右吧!能测几个蛋白这个很难说,要看你要测的蛋白分子量怎么样,如果要相差很大的话用同一张膜转可能控制不好,因为分子量大的需要转时间比较长,而分子量小的可能就已经转过了。

我用Bio-rda转膜仪,转膜2分钟就停止,然后机器上显示“noloaddetected“。各位知道这是为什么吗??

第一次出现这种情况,同样的条件,之前一直没有问题。

我想检测30KD左右的蛋白的含量,用北京六一半干转膜仪转后,用丽春红染不出条带,孵抗体也没有条带,但是跑完胶上有条带,转完膜的胶上也没有条带,不知条带去了哪里。

我的转膜条件是40mA或者20mA2小时,均无所获,各位大虾建议一下转膜条件,是不是转膜条件不行还是别的。

还有丽春红配制时,三氯乙酸有一些发潮,是不是会影响丽春红的染色效果,请多多指教!
主要就是SDS-PAGE电泳仪和转膜仪,摇床,离心机,不需要别的仪器了,试剂药品倒是要很多
确定是转膜不稳定造成的而不是电泳的问题?电泳后的条带正常?可能很多原因~转膜液离子强度不对~转膜电压电流不稳定~转膜仪的问题~一般来说湿转比半干转更稳定一些~只不过时间长~
之前一直是用湿转,现在实验室买了一台伯乐的半干转膜仪,刚开始用的时候我是直接用他推荐的那个标准的条件,25V,1A,30min,可是这样胶就烧了,后来同样条件换成25min后,丽春红染色膜上的条带非常弥散,感觉整张膜都有。。。。求解啊~~各位大侠。。是不是恒流会好一些呢?具体什么条件啊?我的目的蛋白40-70KD
【求助】求助转膜的问题123
superman2112021-07-24
最近发现实验室的bio-rad公司MiniTrans-Blot®ElectrophoreticTransferCell里面的coolingunit(那个塑料盒子)丢失了,重新配配件比较麻烦,不知是否可以用普通的冰袋代替呢?望知晓的战友予以答复,谢谢!
我们做WB的转膜仪的有根丝断了,不知道怎么办?我今天转膜了,膜用丽春红染色了的有蛋白,可是觉得转膜仪的温度好像很高,不知道是不是真的有问题了,请教用Bio-Rad转膜仪的师兄师姐们给我出出主意,实验室的条件不好没有钱买新的,我哭啊!!!!
以WEALTEC的YRDIMES半干转膜仪为例,首先确认是转蛋白质还是核酸。蛋白质可参考Bjerrum and Schafer-Nielsen或Towbin或Dunn缓冲液系统配置缓冲液,电泳后将凝胶浸入缓冲液平衡5分钟,将转印膜和滤纸裁切并浸入缓冲液,合上上盖,按说明书垫上BP-C纸,普通转印1或0.8 mA/cm2运行30~40分钟,用快速缓冲液7分钟(参见相关实验报告)。核酸转印配TBE缓冲液,步骤类似,琼脂糖凝胶的话记得加上方形塑料框保护,3mA/cm2运行30~35min,电流极限6 mA/cm2。拆卸的时候同时按下两侧把手弹起上盖,检查结果。
Western blot 的PVDF膜每次用多少面积(cm2)需要考虑要转印的SDS-PAGE凝胶胶片的面积,要能完全盖住凝胶胶片。同时要考虑转膜仪的大小,要不能超过凝胶支持夹层的大小。向左转|向右转正常凝胶面积一般是40cm2~50cm2的样子,所以PVDF膜面积应该也是在40cm2~50cm2左右
转膜时从下到上,依次是四层滤纸,一层PVDF膜,一层胶,再四层滤纸。
应该注意以下2个方面
1 用玻璃棒将气泡赶净 有气泡的位置不导电 蛋白就转不上
2 半干式转膜仪要保证一定量的转移缓冲液,如果转膜一个小时以上,缓冲液要多一些
一、制备样品DNA
二、限制性内切酶消化样品DNA
三、凝胶电泳分离消化产物
四、如果靶序列>5kb,在0.25M的HCl中进行震荡脱嘌呤10min,ddH2O洗一次
五、用变性液震荡处理30min,ddH2O洗一次
六、中和液震荡处理30min
七、裁取合适大小的尼龙膜或硝酸纤维素膜进行转膜操作,可用真空转膜仪或者搭滤纸桥,需要20×SSC
八、制备探针,可用地高辛标记(以地高辛为例)
九、将膜放入杂交瓶,42°C预杂交30min
十、倒掉预杂交液,加入杂交液,适当的温度进行杂交4h至过夜
十一、洗膜,先用2×SSC+0.1%SDS,20-25°C洗2×5min,再用0.5×SSC+0.1%SDS洗2×15min。然后用washing buffer洗1-5min,接着用blocking solution洗30min后,用antibody solution洗30min,再用washing buffer洗2×15min,再用detection buffer洗2-5min后,取出膜,放于保鲜膜上,在结合有DNA的一面滴加CSPD ready-to-use后,立刻盖上保鲜膜,让CSPD ready-to-use均匀的布满膜表面,室温放置5min后,37°C温育10min以上
十二、放射自显影,可用成像系统信号累积模式显影或用X-ray显影
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