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【求助】膜片钳试验中接地电极镀的AgCL30分钟就能消耗光,是因为形成原电池?急人啊!
2021-07-27
问题描述:

对脑片中的单个细胞做whole cell,需要不断灌流(用蠕动泵,流速2-4ml/min),电极和接地电极(浴液电极)都是用的镀AgCL的银丝,出现这样的现象:接地电极浸入浴液的一段的AgCL很快就消耗光了(肉眼看变白了),引起基线漂移,无法继续记录电流,而接在holder上的那根银丝可以用很久不被消耗。如果将其他不变,但是停止灌流,不会出现这种情况,但是脑片没办法不灌流啊。对了,我压脑片不是用的铂金做的框,是用的包了绝缘膜的钢片,不知道和这个有没有关系,但是已经做了绝缘处理了啊
这个问题出现很久了,一直没得到解决,问了好多实验室都说从来没有遇到这样的情况;问过一个工程师,他说这个不会是灌流引起的,可能是什么地方形成了短路;我以前做单细胞的时候(不用蠕动泵)也没有遇到这样的问题,在网上查了半天看见说可能是形成了原电池,导致AgCL的不断消耗,觉得很疑惑,这个原电池的另一极是什么?怎么形成的原电池?改怎么解决呢?
如果万一不行还想过把两根银丝都换成铂金丝,请问有没有谁是用铂金丝的?是不是和银丝一样用啊?有什么需要注意的?
现在因为这个没有办法做试验,心急如焚啊,请各位战友来帮帮我啊

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bellefille
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好几天都没有办法上蚂蚁淘,今天总算爬上来了,怎么没人理呢,知道的拜托来说下啊,真是急死人了
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wjnyyy
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从来没有遇到过这种情况,建议:1.测一下灌流液的PH值。2.检查蠕动泵灌流管的接地情况,一定要接地。没听说过用铂金丝的。最好还是用铂金框加尼龙丝压片子。
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pclamp
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我们压脑片都是用的银丝,只需要将银丝弯成“U”形或者“V”形,分别压在脑片的两端,你可以试试
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bellefille
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谢谢wjnyyy 和pclamp 我检查过灌流液的PH值,灌流液在7.2,记录室内为7.4-7.5,流出的为7.5,应该还可以吧。现在我也怀疑是蠕动泵的问题,原来蠕动泵也接地了的,把蠕动泵拆开看硅胶管好像是老化了,已经订了新的管子,等换上去再用锡箔把入液和出液的管子包起来,希望可以解决问题啊请问压脑片的铂金框是买来的,还是就在外面首饰店打就可以啊?
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wjnyyy
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买铂金自己打成U形的就可以了,买成品比较贵。
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treesea
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你的出液管是玻璃的还是金属的?最好用玻璃的,在其后面的硅胶软管上用一小段金属管(粗一点的针头就可以)过渡一下,然后将其接地。这个一方面可以减少灌流引起的噪音,另一方面可以避免原电池的形成。因为在灌流的时候,浴池其实和蠕动泵之间是被灌流液导通的。
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treesea
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补充一点:电镀Ag/AgCl电极的时候,要用微电流缓慢镀,我一般镀一夜。这样电镀出来的AgCl颗粒细小,镀层均匀,可以大大延长使用时间。
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bellefille
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太感谢treesea 了,我的装脑片的记录槽上配的是金属的出液管,我换成了塑料的,当时好像没有作用,我按你说的方法试试看然后镀银丝我们实验室都是用84泡过夜,我试试看用电流镀看看,你是用稀Hcl还是NaCL做电镀的溶液呢?
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treesea
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我用的是饱和NaCl
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