细胞色素C的制备及含量、活力测定_蚂蚁淘，【正品极速】生物医学科研用品轻松购|ebiomall -蚂蚁淘商城

商品列表技术文章相关问答

当前位置： > 首页 > 技术文章 >

细胞色素C的制备及含量、活力测定

来自 : 蚂蚁淘

一、实验目的（1）通过细胞色序C的制备，了解制备蛋白质制品的一般原理和步骤

（2）掌握制备细胞色素C的操作技术及含量的测定方法

二、实验原理细胞色素是一类含有铁啉基团的电子传递蛋白，只存在于需氧细胞中。细胞色素在线粒体内膜上起传递电子的作用。细胞色C(cytochromec)是细胞色素一种。它在线粒体呼吸链上位于细胞色素B和细胞色素氧化酶之间，是呼吸链的一个重要组成部分。每分子细胞色素C含有一个血红素和一条多肽链。现已从许多来源获得细胞色素C结晶，并已对100多种细胞色素C蛋白的一级结构进行了测定。结果表明，细胞色素C的氨基酸残基的数目在103~113之间；不同来源细胞色素C的的氨基酸残基的顺序及含量都有一定的差异。细胞色素C中赖氨酸含量较高，等电点为10.7，含铁量为0.38%~0.43%，Mr为12000~13000，猪心细胞色素C分子量12200。细胞色素C是一种稳定的可溶性蛋白，它易溶于水及酸性溶液，故常用酸性水提取。细胞色素C分为氧化型和还原型两种，氧化型水溶液呈深红色，还原型水溶液呈桃红色。细胞色素C对热比较稳定，不易变性。pH7.2~10.2,100℃加热3分钟，细胞色素C氧化型和还原型变性程度均为18%~28%，若增加加热时间，氧化型的不可逆变性程度比还原型的为高。细胞色素C对酸碱也较稳定，可抵抗0.3mol/L氢氧化钾溶液的长时间处理。一般都将细胞色素C制成还原型的，因为比较稳定并易于保存。

三、试剂与器材绞肉机、电磁搅拌器、离心机、分光光度计、玻璃柱、下口瓶、烧杯等。

四、操作方法材料处理—提取—中和—吸附—洗脱—盐析—沉淀—透析—测定

五、关键步骤与注意事项

①吸附前必须把人造沸石处理好,装柱时避免柱内出现气泡,沿柱壁缓缓流入柱内。

②洗脱时洗脱液一旦变白，立刻停止收集。洗脱完毕人造沸石可再生使用。

免责声明本文仅代表作者个人观点，与本网无关。其创作性以及文中陈述文字和内容未经本站证实，对本文以及其中全部或者部分内容、文字的真实性、完整性、及时性本站不做任何保证或承诺，请读者仅作参考，并请自行核实相关内容。

发布于： 2018-12-26 阅读（70）

下一篇 : 如何与「心机」boy 和睦相处？实验室离心机安全必备知识

▍ 相关分类

细胞株

常规细胞株原代细胞干细胞稳转细胞株

细胞培养