【求助】为什么蛋白与上样缓冲液混合后形成沉淀,急!
2009-07-30
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supermaltose
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你可以试试看,单独把SDS和KCl混起来,看看会发生什么事情这个也是碱法提DNA的原理
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yuhuibin
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学习!!!!!!!!!!!!
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tqch_3152004
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你可以试试看,单独把SDS和KCl混起来,看看会发生什么事情这个也是碱法提DNA的原理不会的,第一次预实验没有出现这种情况。
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linxt2005
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呵呵,并不是你的蛋白沉淀了,而是KCl与SDS发生了反应,另外硫酸铵也一样,如果想要避免这种情况,可以用其他的离子型去垢剂代替LoADIngbuffer中的SDS,不过其必要性不大,因为就算是有沉淀了也同样可以上样,并不影响电泳。
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linxt2005
用户
呵呵,并不是你的蛋白沉淀了,而是KCl与SDS发生了反应,另外硫酸铵也一样,如果想要避免这种情况,可以用其他的离子型去垢剂代替LoADIngbuffer中的SDS,不过其必要性不大,因为就算是有沉淀了也同样可以上样,并不影响电泳。
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tqch_3152004
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可是跑电泳是蛋白为什么很少很少了呢?
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supermaltose
用户
钾和SDS反应形成沉淀,并与蛋白共沉淀,这个是碱法提取DNA的原理,我说的你又不肯信。这个步骤能够沉淀大部分的细菌蛋白,当然你的蛋白也没了。
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tqch_3152004
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按supermaltose提议,把SDS和KCl混起来,还真看到了沉淀,谢谢楼上各位的建议。
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handsomu
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k离子浓度过高会对电泳有影响的!
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handsomu
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这篇文章以前看到下载的,你看一下吧!HOWDOESANSDSPAGEGELREALLYWORK.doc(28.0k)
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tqch_3152004
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学习了HOWDOESANSDSPAGEGELREALLYWORK.doc(28.0k),谢谢handsomu。
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亦我所主
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请问下,形成沉淀后可有办法使其溶解?
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吉祥321123
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同问,变性后,形成沉淀后可有办法使其溶解?
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