扩增一个没有模板已知核苷酸序列的片段
2016-11-03
问题描述：
以前听说过设计引物，以引物互为模板进行PCR获得的引物二聚体就是目的片段
有没有人具体操作过呢？应该注意什么问题呢？比如引物设计，体系，PCR程序
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yizhe2011
用户
如果不是很长可以直接公司合成
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鱼海豚和水
用户如果可以用引物互为模板，就说明不是很长的片段，可以直接合成啊
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wangchinapsy
用户1.你的问题，可不可以这么理解，是目前已知核苷酸序列，但是没有在文献中查到如何扩增这段序列，如引物，温度等。2.如果是这种情况的话，引物设计可以有两个选择：（1）用prime5自己设计。（2）找公司给你设计引物。3.至于温度，可以跑梯度PCR进行确定最合适的退火温度。然后进行扩增就可以了。4.建议多了解一下这方面的知识。
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bokeeniu
用户Blast后，跟已知序列比较。
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orangeiii
用户bokeeniuBlast后，跟已知序列比较。可是blast没有相似序列
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bokeeniu
用户如果是编码序列的话，翻译成蛋白序列Blast，否则只能通过Race验证了。
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