培养细胞的染色实验一Giemsa染色法
| 实验方法原理 | Giemsa染色是最常用的方法之一，它简便、快速，适用于多种细胞和染色体染色。 | ||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 试剂、试剂盒 | Giemse甘油甲醇Sorensen 仪器、耗材 | 滴管玻璃片 实验步骤 | 1. 染液制备 （1）称Giemse粉0.5g、甘油22ml，在研钵内先用少量甘油与Giemsa充分混合，研磨至无颗粒； （2）再将剩余甘油混在一起；56℃保温2小时后，加入33ml纯甲醇，保存于棕色瓶内。 2. 染色步骤（以盖片培养法或涂片法为例） （2）细胞标本用甲醇固定10分钟，或1：3醋酸/甲醇固定30分钟，用滴管把染色液布满玻片上（注意不要有气泡，用染色缸染色亦可）； （3）染10~15分钟后，用自来水冲去玻片上多余的染料，空气干燥、二甲苯透明、光学树脂胶封固。 3. 结果 胞核染成紫红色或蓝紫色，胞浆染成粉红色。 注意事项 | 1. 染色液宜现用现配，保存时间最好不超过48小时，旧染液染色效果不好。 2. Giemsa对pH极敏感，缓冲液pH值要调准确，否则染色效果不好。 3. 用染色缸染色时，随染色时间的延长，在染液表面常形成一层氧化膜（发亮），这层氧化膜易附在片上形成污秽，且不易除掉。因此在用染色缸染色，尤其用的不是现配者时，染色前应先用小片滤纸刮除液面的氧化层再进行染色。 4. 染色完毕，应把标本浸入水中洗除染液，或用自来水直接冲掉多余染液。 |
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发布于 ： 2018-08-06
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