病原微生物染色实验一细菌
| 实验方法原理 | 细菌体积较小，可在显微镜油镜下进行观察。细菌中的酸性蛋白质，通过革兰（Gram）碱性染料进行结合，遇革兰碘以后形成复合物，再经过分化剂，则显示革兰阳性菌（+）和革兰阴性菌（-）。常用Gram碱性复红-结晶紫革兰法。 | ||||||||||
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| 实验材料 | 石蜡组织切片 试剂、试剂盒 | 二甲苯无水乙醇中性树胶蒸馏水碱性复红石炭酸（苯酚）苯胺油碘片碘化钾结晶紫草酸铵 仪器、耗材 | 滴管 实验步骤 | 苯胺油-石炭酸-复红染色液：碱性复红0.5g，苯胺油1ml，石炭酸（苯酚）1g，30％乙醇70ml。先将碱性复红溶解于乙醇，加热、冷却后再加入石炭酸和苯胺油。 革兰碘液：碘片0.5g，碘化钾1g，蒸馏水150ml。 结晶紫染色液：结晶紫2g，95％乙醇20ml，草酸铵1g，蒸馏水80ml，分别将结晶紫溶解于乙醇，草酸铵溶解于蒸馏水，然后进行混合，可使用较长时间。 1.石蜡组织切片，常规脱蜡至水。 2.苯胺油-石炭酸-复红染色液染色5min，自来水洗1min。 3.蒸馏水洗后，用40％甲醛处理1min。 4.蒸馏水洗1min，苦味酸饱和液处理2min。 5.95％乙醇快速处理一下，即放入水中，可见组织变红色。 6.蒸馏水洗1min，结晶紫染色液染色2min。 7.自来水洗后1min，蒸馏水洗2次。 8.革兰碘液处理2min，水洗后用滤纸吸干。 9.苯胺油与二甲苯等量混合液，进行分化（镜下控制分化程度）。 10.二甲苯透明，中性树胶封固。 注意事项 | 1.苯胺油-石炭酸-复红染色液易产生结晶，染色时适当加热，防止切片污染。 2.苯胺油与二甲苯分化时，应将切片摇动，便于分色均匀。 其他 | 结果：革兰阳性菌呈蓝色，阴性菌呈红色。 |
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发布于 ： 2018-08-10
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