实验方法原理 | 乙型肝炎表面抗原(HBsAg)是由多肽组成的脂蛋白,由于抗原内含有丰富的二硫键成分,经过氧化剂而转变为磺酸,然后再与染色液产生较强的亲和力进行着色。通过地衣红(Orcein)染色法,能够较好地显示乙型肝炎表面抗原(HBsAg)。 | ||||||||||
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实验材料 | 石蜡组织切片 试剂、试剂盒 | 二甲苯无水乙醇中性树胶蒸馏水地衣红高锰酸钾乙酸浓盐酸草酸 仪器、耗材 | 滴管 实验步骤 | 地衣红染色液:地衣红1g,70%乙醇95ml,浓盐酸5ml。充分溶解后,调pH值为1.2~1.6即可。 酸性氧化液:高锰酸钾0.5g,盐酸0.15ml,蒸馏水10ml。 草酸溶液:草酸2g,蒸馏水100ml。 1.石蜡组织切片,常规脱蜡至水。 2.酸性氧化液处理5min。 3.自来水洗后用草酸溶液漂白5min。 4.蒸馏水洗3次。 5.浸入70%乙醇中2min。 6.浸入地衣红染色液中5~10h(对新配制成的染色液,以及室温15℃以下时还可适当延长时间)。 7.直接用95%乙醇分化至阳性物质清晰为止。 8.无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。 注意事项 | 1.酸性氧化液不能存放时间较长,防止失去氧化作用。 2.地衣红染色用于肝穿刺时,必要时可用对照片(阳性)进行染色。 其他 | 结果:乙型肝炎表面抗原阳性物质呈棕色。 |