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AG Scientific/Proteinase K, Recombinant/P-1263-
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AG Scientific/Proteinase K, Recombinant/P-1263-
品牌 / 
agscientific
货号 / 
P-1263-
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Alternate Name/Synonyms
Protease K, Endopeptidase K, Tritirachium alkaline proteinase
SKU
P-1263
Molecular Weight
28.9 kDa
Appearance
Lyophilized with no additives
Purity
≥90%
Solubility
Soluble in Water
Storage Temp
-20°C
Hazard Image
Yes
Certificate of Analysis 1
P-1263, J1188.pdf

AGScientific,Inc.成立于1997年,专注于创新生化制剂以及用于诊断测试开发的定制原材料,以推进临床前研究药物开发。产品涉及抗生素,生物洗涤剂,缓冲液,诊断,酶,医疗设备试剂,蛋白酶K,还原剂,RNaseA等。


CHAPS是一种两性离子洗涤剂,广泛应用于蛋白质纯化过程。作为这类洗涤剂的一部分,CHAPS含有一个正电荷和一个负电荷,但没有一个净的总电荷。CHAPS的生物膜亲和力相对较低,但在特定的浓度范围内可以有效地诱导溶血和蛋白溶解。CHAPS被归类为一种临界胶束浓度为6-10mM的非变性表面活性剂

CHAPS的应用:在实验室中,CHAPS和其他两性离子洗涤剂可用于在分离蛋白之前诱导细胞裂解。它也可以用作二维凝胶电泳过程中的缓冲液,在某些情况下,它比SDS等阴离子洗涤剂更受欢迎。在蛋白质分析之前,可以通过透析从溶液中去除CHAPS。另一种技术利用专门的树脂和旋转柱也可以用来有效地去除皲裂用于监测化学反应或蛋白质结合的紫外/可见光谱学•用于离子交换色谱和等电色谱•用于细胞的膜渗透•以酶特性作为变性缓冲液的成分


嘌呤霉素盐酸盐是从阿氏链霉菌中分离得到的氨基糖苷类抗生素。嘌呤霉素是一种蛋白质合成抑制剂,它将自己整合到一个正在生长的多肽链中,导致其提前终止。嘌呤霉素的主要应用是作为基因选择抗生素,在CRISPR/Cas9基因编辑中发挥重要作用。这种以盐酸盐形式存在的嘌呤霉素试剂具有抗肿瘤、抗锥虫和抗菌的特性。重要的是要将嘌呤霉素盐酸盐储存在一个密闭的容器中,并置于通风干燥的地方。


盐酸贝斯他汀是氨基肽酶,氨基肽酶B,氨基肽酶M(CD13),和链霉菌来源的亮氨酸氨基肽酶(LAP3)的一种金属蛋白酶抑制剂。这些蛋白的抑制作用是由于肿瘤细胞的凋亡诱导。Bestatin在抗癌化疗、免疫调节、镇痛等方面表现出良好的疗效。


蛋白酶K(又称内肽酶K)是一种从真菌Tritirachiumalbumlimber培养滤液中分离出的胞外内肽酶。这种独特的真菌可以降解角蛋白(因此蛋白酶“K”),并可以利用其副产品作为碳和氮的唯一来源来生长。该酶在较宽的温度和pH范围内是稳定的,在55-65℃和pH8.0时是最佳活性。它在高盐浓度下也很稳定,在强洗涤剂如SDS的存在下也很活跃。其分子量为28.5kDa,对其多肽靶点的特异性较低。


AG蛋白酶K应用于下一代测序(NGS)和微阵列技术•核酸纯化,当从酵母、细菌、哺乳动物细胞和植物细胞裂解物中提取DNA和RNA时,通过灭活核酸酶来纯化核酸•提高PCR产物的克隆效率•使用加速器质谱法对DNA加合物水平进行定量的样品准备•核糖核酸酶保护试验中鸡尾酒酶的失活•添加到提取程序,以优化微阵列研究的原始乳腺肿瘤的RNA产量应用于蛋白质•检测具有独特抗蛋白降解能力的牛海绵状脑病蛋白。•组织消解作为另一种样品制备方法,用于液相色谱-串联质谱定量分析•特异性修饰细胞表面蛋白,分析膜结构进行蛋白定位•生成用于功能研究表征的蛋白片段




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外观:白色粉末 溶解性:本品1g溶解于100ml水中,胶液透明 干燥失重(Water content)% ≤10 灰分(Ash content)% ≤0.6 硫酸根(Sulfate)% ≤ 0.2 凝胶强度(Gel strength,1.0%)g/cm2 ≥ 1200 融胶温度(Melting point,1.0%)℃ 89-93 凝胶温度(Gelling point,1.0%)℃ 33-36 电内渗(Eeo –mr) ≤ 0.13 查看更多>
2015-06-12
目的: 学习水平式琼脂糖凝胶电泳,检测质粒DNA的构型、分子量的大小。原理: 琼脂糖是从海藻中提取出来的一种线状高聚物,可作为电泳支持物,适用于分离大小范围在0.2-50kb的DNA片段。DNA分子的迁移率与分子量的对数值成反比关系。观察其迁移距离,与标准DNA片段进行对照,就可获知该样品分子量大小。在质粒抽提过程中,由于各种因素的影响,使质粒DNA呈现超螺旋的共价闭合环状、开环状分子、线状分子三种不同的构型,这三种分子有不同的迁移率。... 查看更多>
本试剂盒采用独特的缓冲液系统,溶胶后转入吸附柱直接离心即可专一性吸附DNA,去除其它杂质。可从TAE或TBE琼脂糖凝胶上回收DNA片段。 可回收20bp-40kb大小的片段,回收率可高达85以上。是最快速高效的选择。... 查看更多>
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北京阅微基因技术有限公司在发布的Y染色体微缺失检测试剂盒 Y-easy-Reader琼脂糖电泳法供应信息,浏览与Y染色体微缺失检测试剂盒 Y-easy-Reader琼脂糖电泳法相关的产品或在搜索更多与Y染色体微缺失检测试剂盒 Y-easy-Reader琼脂糖电泳法相关的内容。 查看更多>
2021-08-19
•具有 4个Ni2+ 螯合位点, 结合Ni2+ 更为牢固。 •蛋白载量达20-30 mg His标签蛋白/ml填料。 •已螯合镍离子,可直接使用。 查看更多>
镍-琼脂糖凝胶HP/NI-SepharoseHPNI-SepharoseHP270316浙江爱因斯生物科技有限公司镍-琼脂糖凝胶 HP/NI-Sepharose HP 查看更多>
产品名称:琼脂糖 产品英文名称:Agarose CAS号:9012-36-6 类别:培养基蛋白质原料>> 规格:100g 产品说明与用途:AR 查看更多>
促销产品 凝胶过滤介质(含Big Beads系列):http://www.nercb.cas.cn//qztnjgljz/661.htm 琼脂糖离子交换介质                        : http://www.nercb.cas.cn//product4/50.htm 丁基硫琼脂糖介质                            :   http://www.nercb.cas.cn//produc... 查看更多>
本试剂盒采用可以高效、专一结合DNA的硅基质材料和独特的缓冲液系统,从TAE或TBE琼脂糖凝胶上回收DNA片段,同时除去蛋白质、其它有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。可回收100 bp-10 kb大小的片段,回收率大于80%(100 bp的DNA片段回收率为50%以上)。... 查看更多>
琼脂糖分子结构式: 琼脂糖是由1,3连接的B-D-半乳呋喃糖和1,4连接的3,6脱水.a-L-半乳呋喃糖相间联结而成。琼脂中除琼脂糖外,尚含有琼脂糖果胶(Agaropectin)和丙酮酸等带电荷基团分子,在琼脂糖制备过程中尽可能地去除掉这些带电荷分子,以便获得品质优良的电荷中性产品。 查看更多>
琼脂糖凝胶CL-6B/SepharoseCL-6BSepharoseCL-6B270316浙江爱因斯生物科技有限公司琼脂糖凝胶 CL-6B/Sepharose CL-6B 查看更多>
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有没有大佬帮忙看看,新手跑DNALadder的琼脂糖凝胶电泳,但跑出来的Marker条带很扭曲,样品条带也感觉ladder没跑出来,是样品的问题还是胶的问题,很急,最近希望能够做出点结果来是用TBE制的胶,1.5%,80V。求大佬指点
琼脂糖
1、α-琼脂糖酶及其生产方法
2、磁性琼脂糖复合微球的制备方法
3、高容量大孔琼脂糖凝胶介质的制备方法
4、一种新琼四、六糖的制造方法
5、一种制造新琼八糖、新琼十糖和新琼十二糖的方法
6、油水两相法制备磁性琼脂糖凝胶微球的方法
琼脂糖凝胶是依靠糖链之间的次级链如氢键来维持网状结构,网状结构的疏密依靠琼脂糖的浓度。一般情况下,它的结构是稳定的,可以在许多条件下使用(如水,pH4-9范围内的盐溶液)。琼脂糖凝胶在40℃以上开始融化,也不能高压消毒,可用化学灭菌活处理。
交联琼脂糖凝胶是生物分离中常用的色谱基质,利用不同的功能基对其表面的羟基进行修饰,进而制备出疏水色谱、离子交换色谱和亲和色谱等商业填料,这些填料在生物大分子的分离纯化中得到了广泛应用。对于修饰凝胶的分离性能,很多研究者都给予了广泛的关注,但凝胶本身的性状如耐压能力以及其微观结构的改变并未受到应有的重视。而这些性状的改变必然影响修饰后材料的应用范围且与其分离性能存在内在的联系,因此本文以羰基二咪唑(CDI)这种常见的羟基活化剂活化交联琼脂糖凝胶,键合不同功能基,考察修饰后凝胶其耐压能力和微观结构的变化,寻找其中的规律,为以交联琼脂糖凝胶为基质的色谱填料的应用提供参考。

最近跑的琼脂糖电泳条带一直是模糊的,一直搞不清楚原因,请各位帮忙看一下,指出一下我的问题到底在哪里。谢谢大家了!!!

这个是今天重新跑的还没拍照




作为盐,它可以液化凝胶。凝胶都是氢键盐键等次级键交联成的,会被离液序列高的盐破坏掉,加盐酸胍也能起到这个作用,不一定是碘化钠。
其实加入碘化钠最主要的作用是高离序盐,让DNA和它结合以后和柱子里的凝胶充分充分地,结合起来!!
洗涤那步很重要,如果洗不干净高离序盐,会抑制酶切,有些酶很敏感的。

请问各位大神,配制琼脂糖胶的电泳浓度是怎么设定,比如百分之1或百分之1.5的浓度是怎么设置,是1.5g的琼脂糖粉加100g的TAE麽?

最近在做小鼠基因型鉴定,之前做出来的效果很好,没有杂带,只有明显的目的条带,但是最近几次老是出现很多杂带,但是还是看得清目的条带,不影响判断。想请问一下有经验的朋友,这可能是什么原因引起的呢?该怎么避免?谢谢!


什么是琼脂糖,由什么构成
琼脂糖凝胶电泳是常用的分离和检测方法,琼脂是最常用的载体支持物,核酸分子具有电荷效应和分子筛效应,利用此特性可达到分离检测的目的。
一、琼脂糖凝胶的特点
天然琼脂(agar)是一种多聚糖,主要由琼脂糖(agarose,约占80%)及琼脂胶(agaropectin)组成。琼脂糖是由半乳糖及其衍生物构成的中性物质,不带电荷,而琼脂胶是一种含硫酸根和羧基的强酸性多糖,由于这些基团带有电荷,在电场作用下能产生较强的电渗现象,加之硫酸根可与某些蛋白质作用而影响电泳速度及分离效果。因此,目前多用琼脂糖为电泳支持物进行平板电泳,其优点如下。
1. 琼脂糖凝胶电泳操作简单,电泳速度快,样品不需事先处理就可以进行电泳。
2. 琼脂糖凝胶结构均匀,含水量大(约占98%~99%),近似自由电泳,样品扩散较自由电流,对样品吸附极微,因此电泳图谱清晰,分辨率高,重复性好。
3. 琼脂糖透明无紫外吸收,电泳过程和结果可直接用紫外光灯检测及定量测定。
4. 电泳后区带易染色,样品极易洗脱,便于定量测定。制成干膜可长期保存。
目前,常用琼脂糖作为电泳支持物,分离蛋白质和同工酶。将琼脂糖电泳与免疫化学相结合,发展成免疫电泳技术,能鉴别其他方法不能鉴别的复杂体系,由于建立了超微量技术,0.1ug蛋白质就可检出。
琼脂糖凝胶电泳也常用于分离、鉴定核酸,如DNA鉴定,DNA限制性内切核酸酶图谱制作等。由于这种方法操作方便,设备简单,需样品量少,分辨能力高,已成为基因工程研究中常用实验方法之一。
二、DNA的琼脂糖凝胶电泳
琼脂糖凝胶电泳对核酸的分离作用主要是依据它们的相对分子量质量及分子构型,同时与凝胶的浓度也有密切关系。
1、核酸分子大小与琼脂糖浓度的关系
① DNA分子的大小 在凝胶中,DNA片段迁移距离(迁移率)与碱基对的对数成反比,因此通过已知大小的标准物移动的距离与未知片段的移动距离时行比较,便可测出未知片段的大小。但是当DNA分子大小超过20kb时,普通琼脂糖凝胶就很难将它们分开。此时电泳的迁移率不再依赖于分子大小,因此,就用琼脂糖凝胶电泳分离DNA时,分子大小不宜超过此值。
② 琼脂脂糖的浓度 如下表所示,不同大小的DNA需要用不同浓度的琼脂糖凝胶进行电泳分离。
表 琼脂糖浓度与DNA分离范围琼脂糖浓度/%0.30.60.70.91.21.52.0线状DNA大小/kb60-520-110-0.87-0.56-0.44-0.23-0.1
2、核酸构型与琼脂糖凝胶电泳分离的关系
不同构型DNA的移动速度次序为:供价闭环DNA(covalently closed circular,cccDNA)>直线DNA>开环的双链环状DNA。当琼脂糖浓度太高时,环状DNA(一般为球形)不能进入胶中,相对迁移率为0(Rm=0),而同等大小的直线双链DNA(刚性棒状)则可以长轴方向前进(Rm>0),由此可见,这三种构型的相对迁移率主要取决于凝胶浓度,但同时,也受到电流强度、缓冲液离子强度等的影响。
3、电泳方法
① 凝胶类型
用于分离核酸的琼脂糖凝胶电泳可分为垂直型及水平型(平板型)。水平型电泳时,凝胶板完全浸泡在电极缓冲液下1-2mm,故又称为潜水式。目前更多用的是后者,因为它制胶和加样比较方便,电泳槽简单,易于制作,又可以根据需要制备不同规格的凝胶板,节约凝胶,因而较受欢迎。
② 缓冲液系统
缺少离子时,电流太小,DNA迁移慢;相反,高离子强度的缓冲液由于电流太大会大量产热,严重时,会造成胶熔化和DNA的变性。
常用的电泳缓冲液有EDTA(pH8.0)和Tris-乙酸(TEA),Tris-硼酸(TBE)或Tris-磷酸(TPE)等,浓度约为50mmol/L(pH7.5~7.8)。电泳缓冲液一般都配制成浓的贮备液,临用时稀释到所需倍数。
TAE缓冲能力较低,后两者有足够高的缓冲能力,因此更常用。TBE浓溶液长期贮存会出现沉淀,为避免此缺点,室温下贮存5×溶液,用时稀释10倍0.5×工作溶液即能提供足够缓冲能力。
③ 凝胶的制备
以稀释的电极缓冲液为溶剂,用沸水浴或微波炉配制一定浓度的溶胶,灌入水平胶框或垂直胶膜,插入梳子,自然冷却。
④ 样品配制与加样
DNA样品用适量Tris-EDTA缓冲液溶解,缓冲液内含有0.25%溴酚蓝或其他指示染料,含有10%-15%蔗糖或5%~10%甘油,以增加其比重,使样品集中。为避免蔗糖或甘油可能使电泳结果产生U形条带,可改用2.5%Ficoll(聚蔗糖)代替蔗糖或甘油。
⑤ 电泳
琼脂糖凝胶分离大分子DNA实验条件的研究结果表明,在低浓度、低电压下,分离效果较好。在低电压条件下,线性DNA分子的电泳迁移率与所用的电压呈正比。但是,在电场强度增加时,较大的DNA片段迁移率的增加相对较小。因此随着电压的增高,电泳分辨率反而下降,为了获得电泳分离DNA片段的最大分辨率,电场强度不宜高于5V/cm。
电泳系统的温度对于DNA在琼脂糖凝胶中的电泳行为没有显著的影响。通常在室温下进行电泳,只有当凝胶浓度低于0.5%时,为增加凝胶硬度,可在4℃进行电泳。
⑥ 染色和拍照
常用荧光染料溴乙锭(EB)染色,在紫外光下观察DNA条带,用紫外分析仪拍照,或用凝胶成像系统输出照片,并进行有关的数据分析。
注意事项:电泳中所使用的染料EB是致癌物质,一定要小心,避免其接触皮肤等,进行电泳操作的时候一定要带手套,手套要及时更换,现在也除了一些EB的替代物,如Goldview等。
琼脂和琼脂糖不光中文叫法有点区别,它们的英文名字也是不同的。先来说说琼脂,它的英文名为agar。这个词来源于马来语的agar-agar,意思是胶状物。而琼脂糖的英文名为agarose,天然琼脂agar由琼脂糖(agarose)和琼脂果胶(agaropectin)组成。
琼脂糖是线性的多聚物,基本结构是1,3连结的β-D-半乳呋喃糖和1,4连结的3,6-脱水α-L-半乳呋喃糖。琼脂果胶是由许多更小的分子组成的异质混合物。它们的结构相似,但带硫酸根和羧基组分,凝胶能力差。
琼脂糖(Agarose)的特性详细介绍可以登录生物帮看看, http://www.bio1000.com/news/cp/ 生物产品,生物学新技术,生物研发,生物产业,生命科学创新产品。

染色剂用的是EB

同一块gel,有的样品条带很明亮,有的却很暗淡。

求大神告知。

一般来说,DNA片段越小,胶的浓度需要大些,原因就是胶的浓度越低,形成的孔径就越小,这样才能将各种不同小片段的DNA分离开来,并达到一定的精确度.分子生物学实验手册有对应的表格: