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AG Scientific/Actinonin/A-1120-
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AG Scientific/Actinonin/A-1120-
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Alternate Name/Synonyms
3[[1-[[2-(Hydroxymethyl)-1-pyrrolidinyl]-carbonyl]-2-methylpropyl]-carbamoyl]-octanohydroxamic acid
SKU
A-1120
CAS #
13434-13-4
Chemical Name
3[[1-[[2-(Hydroxymethyl)-1-pyrrolidinyl]-carbonyl]-2-methylpropyl]-carbamoyl]-octanohydroxamic acid
Chemical Formula
C19H35N3O5
Molecular Weight
385.5
Appearance
White Powder
Purity
98% (HPLC)
Solubility
Soluble in DMSO or Acetone.
Melting Point
143.1°-146.5 ‚ºC
Storage Temp
-20 ºC
Certificate of Analysis 1
A-1120, E1233.pdf
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N/A

AGScientific,Inc.成立于1997年,专注于创新生化制剂以及用于诊断测试开发的定制原材料,以推进临床前研究药物开发。产品涉及抗生素,生物洗涤剂,缓冲液,诊断,酶,医疗设备试剂,蛋白酶K,还原剂,RNaseA等。


CHAPS是一种两性离子洗涤剂,广泛应用于蛋白质纯化过程。作为这类洗涤剂的一部分,CHAPS含有一个正电荷和一个负电荷,但没有一个净的总电荷。CHAPS的生物膜亲和力相对较低,但在特定的浓度范围内可以有效地诱导溶血和蛋白溶解。CHAPS被归类为一种临界胶束浓度为6-10mM的非变性表面活性剂

CHAPS的应用:在实验室中,CHAPS和其他两性离子洗涤剂可用于在分离蛋白之前诱导细胞裂解。它也可以用作二维凝胶电泳过程中的缓冲液,在某些情况下,它比SDS等阴离子洗涤剂更受欢迎。在蛋白质分析之前,可以通过透析从溶液中去除CHAPS。另一种技术利用专门的树脂和旋转柱也可以用来有效地去除皲裂用于监测化学反应或蛋白质结合的紫外/可见光谱学•用于离子交换色谱和等电色谱•用于细胞的膜渗透•以酶特性作为变性缓冲液的成分


嘌呤霉素盐酸盐是从阿氏链霉菌中分离得到的氨基糖苷类抗生素。嘌呤霉素是一种蛋白质合成抑制剂,它将自己整合到一个正在生长的多肽链中,导致其提前终止。嘌呤霉素的主要应用是作为基因选择抗生素,在CRISPR/Cas9基因编辑中发挥重要作用。这种以盐酸盐形式存在的嘌呤霉素试剂具有抗肿瘤、抗锥虫和抗菌的特性。重要的是要将嘌呤霉素盐酸盐储存在一个密闭的容器中,并置于通风干燥的地方。


盐酸贝斯他汀是氨基肽酶,氨基肽酶B,氨基肽酶M(CD13),和链霉菌来源的亮氨酸氨基肽酶(LAP3)的一种金属蛋白酶抑制剂。这些蛋白的抑制作用是由于肿瘤细胞的凋亡诱导。Bestatin在抗癌化疗、免疫调节、镇痛等方面表现出良好的疗效。


蛋白酶K(又称内肽酶K)是一种从真菌Tritirachiumalbumlimber培养滤液中分离出的胞外内肽酶。这种独特的真菌可以降解角蛋白(因此蛋白酶“K”),并可以利用其副产品作为碳和氮的唯一来源来生长。该酶在较宽的温度和pH范围内是稳定的,在55-65℃和pH8.0时是最佳活性。它在高盐浓度下也很稳定,在强洗涤剂如SDS的存在下也很活跃。其分子量为28.5kDa,对其多肽靶点的特异性较低。


AG蛋白酶K应用于下一代测序(NGS)和微阵列技术•核酸纯化,当从酵母、细菌、哺乳动物细胞和植物细胞裂解物中提取DNA和RNA时,通过灭活核酸酶来纯化核酸•提高PCR产物的克隆效率•使用加速器质谱法对DNA加合物水平进行定量的样品准备•核糖核酸酶保护试验中鸡尾酒酶的失活•添加到提取程序,以优化微阵列研究的原始乳腺肿瘤的RNA产量应用于蛋白质•检测具有独特抗蛋白降解能力的牛海绵状脑病蛋白。•组织消解作为另一种样品制备方法,用于液相色谱-串联质谱定量分析•特异性修饰细胞表面蛋白,分析膜结构进行蛋白定位•生成用于功能研究表征的蛋白片段




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琼脂糖凝胶2B/Sepharose2BSepharose2B270316浙江爱因斯生物科技有限公司琼脂糖凝胶 2B/Sepharose 2B 查看更多>
用途: 脱氧核糖核酸(DNA),脂蛋白和免疫电泳用。生化研究免疫扩散等的支持物。生物学、免疫学、生物化学和微生物学研究。临床医学上用于乙型肝炎抗原(HAA)测定。血脂电泳分析。甲胎球蛋白测定。肝炎、肝癌和心血管等疾病的诊断。 查看更多>
DYCP-31DN琼脂糖水平电泳槽是由北京泽兰西科技有限公司代理或销售的六一品牌的仪器,产品来源于北京。北京泽兰西科技有限公司是中国最权威的DYCP-31DN琼脂糖水平电泳槽销售服务商之一,在北京等地方销售DYCP-31DN琼脂糖水平电泳槽已经多年。同时,生物在线为您提供众多企业DYCP-31DN琼脂糖水平电泳槽仪器产品及图片,以便挑选到性价比高,合适的DYCP-31DN琼脂糖水平电泳槽产品 查看更多>
天然琼脂(agar)是一种多聚糖,主要由琼脂糖(agarose,约占80%)及琼脂胶(agaropectin)组成。琼脂糖是由半乳糖及其衍生物构成的中性物质,不带电荷,而琼脂胶是一种含硫酸根和羧基的强酸性多糖,由于这些基团带有电荷,在电场作用下能产生较强的电渗现象,加之硫酸根可与某些蛋白质作用而影响... 查看更多>
2021-09-01
技术参数 10 × Loading Buffer 1 ml × 10 支 SDS 0.90% Glycerol 50% Bromophenol Blue 0.05% 产品描述   用于琼脂糖凝胶电泳的Loading Buffer。本制品与Takara常规限制酶中附带的10×Loading buffer组成相同。   保存:室温。   应用:琼脂糖凝胶凝胶电泳。 使用说明   向酶促反应液中加入多于1/10体积量的本制品,即可终止反应,此溶液可直接用于琼脂糖凝胶电泳。室温保存时, 查看更多>
英文名称:Sepharose 6B CAS号:9012-36-6 级别:BR 凝胶类型:凝胶过滤填料,凝胶层析介质 结构成分:6%交联度琼脂糖 粒径:45-165µm 工作PH值:4-9 操作温度:4-40℃ 分离范围:10000~4×106 性状:含20%乙醇,底部为乳白色胶体 用途:生化研究。适合于分离蛋白及多糖 保存:2~8℃ 查看更多>
产品名称:琼脂糖 产品英文名称:Agarose CAS号:9012-36-6 类别:培养基蛋白质原料>> 规格:100g 产品说明与用途:AR 查看更多>
琼脂糖分子结构式: 琼脂糖是由1,3连接的B-D-半乳呋喃糖和1,4连接的3,6脱水.a-L-半乳呋喃糖相间联结而成。琼脂中除琼脂糖外,尚含有琼脂糖果胶(Agaropectin)和丙酮酸等带电荷基团分子,在琼脂糖制备过程中尽可能地去除掉这些带电荷分子,以便获得品质优良的电荷中性产品。 查看更多>
2021-07-29
CAS Number: 9012-36-6 Synonym(s): None Molecular Weight: N/A Molecular Formula: N/A Storage Condition: ROOM TEMPERATURERisk Statements: N/A Safety Statements: N/A Coge————0815-100G Sige————100g DNase (P/F) ————NONE EEO (-Mr)———— 0.12 查看更多>
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。注意:在准备做磷酸(酯)酶实验的时候,不加磷酸酯酶抑制剂。工作液配制配制 100 ml 的 modified RIPA buffe:1. 称取 790 mg 的 Tris-Base,加到 75 ml 去离子水中,加入 900 mg 的 NaCl,搅拌,直到全部溶解,用 HC 查看更多>
琼脂糖凝胶回收DNA时考虑的关键参数从琼脂糖凝胶中回收DNA,是一种简单不过的常规实验操作。但是由于胶回收的质量和数量直接影响后继的一系列实验——比如酶切连接、转化筛选、测序或者PCR扩增、标记乃至显微注射等等,所以这一步的操作也显得非常重要。胶回收的几个关键参数:胶回收的质量直接影响后继实验的成功与否。要想做好胶回收,无论是自己亲力亲为还是借助目前五花八门的胶回收试剂,最基本的评定标准无外乎这么几个:1.回收产... 查看更多>
2021-08-19
•具有 4个Ni2+ 螯合位点, 结合Ni2+ 更为牢固。 •蛋白载量达20-30 mg His标签蛋白/ml填料。 •已螯合镍离子,可直接使用。 查看更多>
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影响核酸电泳迁移率的几个因素

1、核酸分子大小

在一定浓度的琼脂糖凝胶中,DNA片段迁移距离和其含有的碱基对数量成反比,因此可以通过与标准条带迁移距离进行比较,由此得出目的条带的大小,但这仅对双链线性的DNA比较准确(DNAMarker一般为双链线状DNA),且对大于20kb的DNA不适用(普通琼脂糖凝胶很难将其分开)。

2、核酸分子构象

DNA分子在电场中的迁移速度不仅和分子量有关,还和它本身的构象有关。相同分子量的线状、开环和超螺旋DNA在琼脂糖凝胶中的移动速度不一样,移动速度次序为:共价闭环DNA>线性DNA>开环DNA。当琼脂糖浓度太大时,环状的DNA一般不能进入胶内(停留在孔中)。

3、琼脂糖浓度

同样的线状DNA分子在不同浓度的琼脂糖凝胶中的迁移速度不同,DNA电泳迁移率的对数和琼脂糖凝胶浓度呈线性关系,凝胶浓度的选择取决于DNA分子的大小。

琼脂糖凝胶浓度与线性DNA分辨范围

凝胶浓度(%)线性DNA长度(bp)

0.51000~30000

0.7800~12000

1.0500~10000

1.2400~7000

1.5200~3000

2.050~2000

4、电源电压

在低电压时,线状DNA片段的迁移速率和所加电压成正比。但电压增加,琼脂糖凝胶的有效分离范围将缩小。要使大于2kb的DNA片段的分离率达到最大,所使用的电压不得超过5V/cm。

5、电泳方式

用于分离核酸的琼脂糖凝胶电泳可分为垂直型及水平型(平板型)。垂直型电泳,一般用聚丙烯酰胺凝胶做为支撑物。水平型电泳时,凝胶板完全浸泡在电极缓冲液下1-2mm,故又称为潜水式。目前更多用的是后者,因为它制胶和加样比较方便,电泳槽简单,易于制作,又可以根据需要制备不同规格的凝胶板,节约凝胶,因而较受欢迎。

6、嵌入染料的存在

常用的荧光染料EB可以嵌入到堆积的碱基对之间,使其刚性更强,并使其迁移速率有所下降。

7、电泳缓冲液的离子强度

电泳缓冲液的组成和离子强度也能影响DNA的迁移速度。在离子存在很少的情况下(如无用蒸馏水配制凝胶),电导率最小,DNA几乎不移动;在高离子强度的缓冲液中(如误用10×电泳缓冲液),则电导率很高并产热明显,严重时能引起凝胶融化或DNA变性。

手提的斑马鱼RNA再反转录得到CDNA作为模板进行primestar,p的是斑马鱼的全长,但是全长p出来总是带有拖带的情况,有一个情况较好的图是这样的(mark左边的那一条)

我就用这个pcr的产物作为模板又做了一次,结果如下

求大神赐教!!!




琼脂有毒吗_苹果绿123
susantian20062021-08-04
琼脂条的用法?琼脂有毒吗?
琼脂糖
1、α-琼脂糖酶及其生产方法
2、磁性琼脂糖复合微球的制备方法
3、高容量大孔琼脂糖凝胶介质的制备方法
4、一种新琼四、六糖的制造方法
5、一种制造新琼八糖、新琼十糖和新琼十二糖的方法
6、油水两相法制备磁性琼脂糖凝胶微球的方法
琼脂糖在水中一般加热到90℃以上溶解,温度下降到35-40℃时形成良好的半固体状的凝胶,这是它具有多种用途的主要特征和基础。琼脂糖凝胶性能通常用凝胶强度表示。强度越高,凝胶性能越好。质量较好的琼脂糖强度通常在1200克/cm2以上(1%胶浓度)。琼脂糖的凝胶性是由存在的氢键所致,凡是能破坏氢键的因素都能导致凝胶性的破坏。琼脂糖具有亲水性,并几乎完全不存在带电基团,对敏感的生物大分子极少引起变性和吸附,是理想的惰性载体。在琼脂糖制备过程中需要把琼脂果胶尽量去除,否则琼脂糖有可能存在极微量硫酸根和丙酮酸取代电离基团,就会造成电内渗(EEO),电内渗对质点的移动产生影响。质量较好的琼脂糖硫酸根含量比较低,通常在0.2%以下,电内渗比较小,通常在0.13以下。这也就是琼脂糖比琼脂贵那么多的原因了。
1937年荒木第一次从琼脂中分离出琼脂糖,但直到1961年Hjertin首先发现了琼脂糖优异的使用性能后才引起了越来越多的关注,并开始工业生产。琼脂糖广泛应用于临床化验、生化分析和生物大分子物质的分离等领域。
琼脂糖凝胶电泳时胶中dna发出荧光是因为琼脂糖凝胶中添加了溴化乙锭(EB)。
溴化乙锭是一种高度灵敏的荧光染色剂,用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的DNA。溴化乙锭用标准302nm 紫外光透射仪激发并放射出橙红色信号,可用Polaroid 底片或带CCD 成像头的凝胶成像处理系统拍摄。
一般来说,DNA片段越小,胶的浓度需要大些,原因就是胶的浓度越低,形成的孔径就越小,这样才能将各种不同小片段的DNA分离开来,并达到一定的精确度.分子生物学实验手册有对应的表格:
什么是琼脂糖,由什么构成
琼脂糖凝胶电泳是常用的分离和检测方法,琼脂是最常用的载体支持物,核酸分子具有电荷效应和分子筛效应,利用此特性可达到分离检测的目的。
一、琼脂糖凝胶的特点
天然琼脂(agar)是一种多聚糖,主要由琼脂糖(agarose,约占80%)及琼脂胶(agaropectin)组成。琼脂糖是由半乳糖及其衍生物构成的中性物质,不带电荷,而琼脂胶是一种含硫酸根和羧基的强酸性多糖,由于这些基团带有电荷,在电场作用下能产生较强的电渗现象,加之硫酸根可与某些蛋白质作用而影响电泳速度及分离效果。因此,目前多用琼脂糖为电泳支持物进行平板电泳,其优点如下。
1. 琼脂糖凝胶电泳操作简单,电泳速度快,样品不需事先处理就可以进行电泳。
2. 琼脂糖凝胶结构均匀,含水量大(约占98%~99%),近似自由电泳,样品扩散较自由电流,对样品吸附极微,因此电泳图谱清晰,分辨率高,重复性好。
3. 琼脂糖透明无紫外吸收,电泳过程和结果可直接用紫外光灯检测及定量测定。
4. 电泳后区带易染色,样品极易洗脱,便于定量测定。制成干膜可长期保存。
目前,常用琼脂糖作为电泳支持物,分离蛋白质和同工酶。将琼脂糖电泳与免疫化学相结合,发展成免疫电泳技术,能鉴别其他方法不能鉴别的复杂体系,由于建立了超微量技术,0.1ug蛋白质就可检出。
琼脂糖凝胶电泳也常用于分离、鉴定核酸,如DNA鉴定,DNA限制性内切核酸酶图谱制作等。由于这种方法操作方便,设备简单,需样品量少,分辨能力高,已成为基因工程研究中常用实验方法之一。
二、DNA的琼脂糖凝胶电泳
琼脂糖凝胶电泳对核酸的分离作用主要是依据它们的相对分子量质量及分子构型,同时与凝胶的浓度也有密切关系。
1、核酸分子大小与琼脂糖浓度的关系
① DNA分子的大小 在凝胶中,DNA片段迁移距离(迁移率)与碱基对的对数成反比,因此通过已知大小的标准物移动的距离与未知片段的移动距离时行比较,便可测出未知片段的大小。但是当DNA分子大小超过20kb时,普通琼脂糖凝胶就很难将它们分开。此时电泳的迁移率不再依赖于分子大小,因此,就用琼脂糖凝胶电泳分离DNA时,分子大小不宜超过此值。
② 琼脂脂糖的浓度 如下表所示,不同大小的DNA需要用不同浓度的琼脂糖凝胶进行电泳分离。
表 琼脂糖浓度与DNA分离范围琼脂糖浓度/%0.30.60.70.91.21.52.0线状DNA大小/kb60-520-110-0.87-0.56-0.44-0.23-0.1
2、核酸构型与琼脂糖凝胶电泳分离的关系
不同构型DNA的移动速度次序为:供价闭环DNA(covalently closed circular,cccDNA)>直线DNA>开环的双链环状DNA。当琼脂糖浓度太高时,环状DNA(一般为球形)不能进入胶中,相对迁移率为0(Rm=0),而同等大小的直线双链DNA(刚性棒状)则可以长轴方向前进(Rm>0),由此可见,这三种构型的相对迁移率主要取决于凝胶浓度,但同时,也受到电流强度、缓冲液离子强度等的影响。
3、电泳方法
① 凝胶类型
用于分离核酸的琼脂糖凝胶电泳可分为垂直型及水平型(平板型)。水平型电泳时,凝胶板完全浸泡在电极缓冲液下1-2mm,故又称为潜水式。目前更多用的是后者,因为它制胶和加样比较方便,电泳槽简单,易于制作,又可以根据需要制备不同规格的凝胶板,节约凝胶,因而较受欢迎。
② 缓冲液系统
缺少离子时,电流太小,DNA迁移慢;相反,高离子强度的缓冲液由于电流太大会大量产热,严重时,会造成胶熔化和DNA的变性。
常用的电泳缓冲液有EDTA(pH8.0)和Tris-乙酸(TEA),Tris-硼酸(TBE)或Tris-磷酸(TPE)等,浓度约为50mmol/L(pH7.5~7.8)。电泳缓冲液一般都配制成浓的贮备液,临用时稀释到所需倍数。
TAE缓冲能力较低,后两者有足够高的缓冲能力,因此更常用。TBE浓溶液长期贮存会出现沉淀,为避免此缺点,室温下贮存5×溶液,用时稀释10倍0.5×工作溶液即能提供足够缓冲能力。
③ 凝胶的制备
以稀释的电极缓冲液为溶剂,用沸水浴或微波炉配制一定浓度的溶胶,灌入水平胶框或垂直胶膜,插入梳子,自然冷却。
④ 样品配制与加样
DNA样品用适量Tris-EDTA缓冲液溶解,缓冲液内含有0.25%溴酚蓝或其他指示染料,含有10%-15%蔗糖或5%~10%甘油,以增加其比重,使样品集中。为避免蔗糖或甘油可能使电泳结果产生U形条带,可改用2.5%Ficoll(聚蔗糖)代替蔗糖或甘油。
⑤ 电泳
琼脂糖凝胶分离大分子DNA实验条件的研究结果表明,在低浓度、低电压下,分离效果较好。在低电压条件下,线性DNA分子的电泳迁移率与所用的电压呈正比。但是,在电场强度增加时,较大的DNA片段迁移率的增加相对较小。因此随着电压的增高,电泳分辨率反而下降,为了获得电泳分离DNA片段的最大分辨率,电场强度不宜高于5V/cm。
电泳系统的温度对于DNA在琼脂糖凝胶中的电泳行为没有显著的影响。通常在室温下进行电泳,只有当凝胶浓度低于0.5%时,为增加凝胶硬度,可在4℃进行电泳。
⑥ 染色和拍照
常用荧光染料溴乙锭(EB)染色,在紫外光下观察DNA条带,用紫外分析仪拍照,或用凝胶成像系统输出照片,并进行有关的数据分析。
注意事项:电泳中所使用的染料EB是致癌物质,一定要小心,避免其接触皮肤等,进行电泳操作的时候一定要带手套,手套要及时更换,现在也除了一些EB的替代物,如Goldview等。
琼脂糖凝胶是依靠糖链之间的次级链如氢键来维持网状结构,网状结构的疏密依靠琼脂糖的浓度。一般情况下,它的结构是稳定的,可以在许多条件下使用(如水,pH4-9范围内的盐溶液)。琼脂糖凝胶在40℃以上开始融化,也不能高压消毒,可用化学灭菌活处理。
交联琼脂糖凝胶是生物分离中常用的色谱基质,利用不同的功能基对其表面的羟基进行修饰,进而制备出疏水色谱、离子交换色谱和亲和色谱等商业填料,这些填料在生物大分子的分离纯化中得到了广泛应用。对于修饰凝胶的分离性能,很多研究者都给予了广泛的关注,但凝胶本身的性状如耐压能力以及其微观结构的改变并未受到应有的重视。而这些性状的改变必然影响修饰后材料的应用范围且与其分离性能存在内在的联系,因此本文以羰基二咪唑(CDI)这种常见的羟基活化剂活化交联琼脂糖凝胶,键合不同功能基,考察修饰后凝胶其耐压能力和微观结构的变化,寻找其中的规律,为以交联琼脂糖凝胶为基质的色谱填料的应用提供参考。
区别是:
biowest agarose 指的是西班牙琼脂糖。
agarose指的是琼脂糖。

染料是Genviews的GenGreen的。图中MarkerNEB的1KBLadder,我相信marker本身是没什么问题的,但我的电泳系统跑出来总是会出现这种弯弯的现象,有可能是什么原因呢?好像随着电泳时间的延长,会弯的更明显。



染色剂用的是EB

同一块gel,有的样品条带很明亮,有的却很暗淡。

求大神告知。