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求助稀释好的一抗和二抗一般最多能重复使用几次
2017-04-10
问题描述:

如果抗体使用次数太多会使背景变黑吗?

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janlont
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跟变黑没直接关系,主要是重复久了,抗体效价会下降,识别目的条带能力降低。具体能重复几次,跟抗体本身,还有你自己的实验条件有很大关系。每个实验室都不一样的(重复三四次的我试过,但也有的使用过一次就不好用了)。你自己动手摸索下就行了。
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CSU-zw0810
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展开引用janlont跟变黑没直接关系,主要是重复久了,抗体效价会下降,识别目的条带能力降低。具体能重复几次,跟抗体本身,还有你自己的实验条件有很大关系。每个实验室都不一样的(重复三四次的我试过,但也有的使用过一次就不好用了)。你自己动手摸索下就行了。......好的谢谢还有个问题想请教一下,封闭的原理究竟是什么?为什么要封闭?背景黑与封闭有关吗
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angel199001
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一般我都是重复用三次,abcam的抗体,效果不错!
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real456
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一抗重复看你上次效果。二抗每次新配。一抗重复多了会有黑点,脏。封闭就是对膜上没有蛋白的地方填满,防止抗体的非特异性结合。
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CSU-zw0810
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real456一抗重复看你上次效果。二抗每次新配。一抗重复多了会有黑点,脏。封闭就是对膜上没有蛋白的地方填满,防止抗体的非特异性结合。谢谢二抗都至少重复用了5次
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