Volume: 1 mL
Concentration: 100 µg/mL
Clonality: Polyclonal
Form: Affinity Purified
Host Species: Chicken
Applications: ELISA, ICC, IHC, IP, WB
Antibody Registry ID (RRID): AB_2313511
Physical State: Liquid
Production Notes: Chickens were immunized with a synthetic peptide containing the influenza hemagglutinin (HA) epitope (i.e., YPYDVPDYA) conjugated to keyhole limpet hemocyanin. The first injection included complete Freund’s adjuvant; subsequent injections included incomplete Freund’s adjuvant. Eggs were collected after the fourth injection, and antibodies were purified from the yolks using a proprietary method that yields a purity of >90%. Antibodies were affinity-purified over a peptide column and then dialyzed against phosphate-buffered isotonic saline. Sodium azide was added and the antibodies were filter-sterilized (0.2 µm).
Validation and Application Notes
Western Blot Dilution Range: 1:5000
IHC Dilution Range: 1:500
Quality Control
Antibodies were analyzed using ELISA and western blots using an N-terminal HA-tagged protein. Secondary antibodies used in these quality control assays were alkaline phosphatase- (1:1000 dilution) and HRP-labeled (1:3000 dilution) goat anti-chicken IgY antibodies (Aves Labs), respectively.
Storage
Store at 4°C in the dark. Under these conditions, the antibodies should have a shelf life of at least 12 months (provided they remain sterile). For longer storage periods, dilute the antibodies with sterile glycerol and store at -20°C. Do not freeze these antibodies unless you want to store them for longer periods of time.
NOTE
Aves Labs products are intended for use as research laboratory reagents. They are not intended for use as diagnostic or therapeutic reagents in humans.
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AvesLabs是一家成立于上世纪九十年代，专注于高亲和性鸡源抗体的研发和准备，生物医药和生命科学行业全球*的鸡多克隆抗体(IgY)及定制抗体/多肽/免疫试剂的专业公司。AvesLabs在鸡源神经系统标志蛋白/抗体研究领域拥有独特优势，不仅品种多样，质量优良，而且适用于人/大小鼠等多个物种的神经系统研究，包括神经元/胶质细胞/雪旺细胞的各亚细胞结构免疫双标/免疫共沉淀研究。公司独有的技术及优质抗体产品有助于全球科研人员更为便捷的解决学术研究及应用研发课题。除了丰富的产品线外，AvesLabs还为客户提供优质的抗体定制服务，您只需要提供需要研究的重组蛋白或合成多肽，我们即可为您生产优质的鸡源多克隆抗体。
神经元标志蛋白抗体该系列产品主要用于神经元细胞的各亚细胞结构研究，可与现有的小鼠/兔抗体进行免疫双标，反应性包括人、小鼠等多个哺乳类动物。在保证抗体特异性的前提下，部分产品可分为抗不同的氨基酸片段。该系列产品包括抗APP3/APP345/APP4/APP5/ABN/TUJ/CAT/DCX/ER1/ER2/ER3/ER5/GAD/GAP43/MAP/NET/NUN/NSE/NFH/NFL/NFM/PER/PRN/PAP/STG/TAU/TYH的抗体。除单独的抗体提供，我们还可同时提供1/3种任意抗体组合及相应二抗的试剂盒，以更优惠的价格及便捷性以满足研究人员的不同需要。
胶质细胞及雪旺细胞标志蛋白抗体该系列产品主要用于胶质细胞及雪旺细胞的各亚细胞结构的研究，可与可与现有的小鼠/兔抗体进行免疫双标，反应性包括人、大鼠等多个哺乳类动物。在保证抗体特异性的前提下，部分产品可分为抗不同的氨基酸片段。该系列产品包括抗COR/GFAP/MAC/MBP/NES/PZO/PLP/VIM抗体。同样，除单独的抗体提供，我们还可同时提供1/3种任意抗体组合及相应二抗的试剂盒，以更优惠的价格及便捷性以满足研究人员的不同需要。
二抗该系列产品特点在于鸡IgY分子与哺乳动物IgG分子截然不同，因此由之制备的二抗不与来源于兔、小鼠或其他哺乳动物的一抗产生交叉反应，特别适用于组织学的免疫双标检测。该系列源于羊的二抗可交联荧光基团/HRP/生物素/琼脂糖，可广泛用于WB，免疫组化/免疫细胞化学及免疫共沉淀研究。
mmunoprecipitationReagents(IP)该系列产品中 HA-PrecipHen® 由鸡anti-HAepitopetag抗体共价结合到琼脂糖粒而成，适用于利用HAepitope-tagged蛋白的immunoprecipitation(IP),chromatinimmunoprecipitation(ChIP)以及蛋白纯化研究。而IgY-PrecipHen®由羊抗鸡的IgY抗体共价结合到琼脂糖粒上而成，适用于鸡源抗体与目标蛋白之间的immunoprecipitation(IP),chromatinimmunoprecipitation(ChIP)以及蛋白纯化研究。
对高度保守的哺乳动物基因产物有更高的描述由于鸡与哺乳动物的距离至少有1亿年之久，它们倾向于将哺乳动物的任何基因产物视为外来物，并产生强烈的免疫反应。简单双疣状鸡IgYs可以与小鼠和兔抗体一起使用，没有交叉反应的危险。针对鸡igy的二级抗体不会与哺乳动物igg发生交叉反应。友好型我们从鸡蛋中纯化抗体，而不是血清。与此相反，在兔实验中，通过抑制动物，进行耳出血或心脏穿刺来获得血清。这只是一种更人道的产生抗体的方法。成本效益和更持久的我们的鸡用抗体是>90%IgY，在4度完美呈现5年以上保质期。相比之下，多数公司提供的rabbitserum(兔乳)在4˚C (完美呈现)(以周至月为单位)的货架期非常有限，而且一旦冷冻，一些生物活性会丧失。将兔抗体纯化至相应纯度的成本。蛋白质a纯化)是非常昂贵的。几乎无限量我们从每只母鸡那里收集了大约18个“免疫鸡蛋”，但是只使用了6个“免疫鸡蛋”来准备你的IgY准备。然后我们把剩下的12个“免疫鸡蛋”储存在冰箱里，以备将来你需要更多的抗体。此外，我们可以继续为母鸡提供住宿(另收费)，以备您需要我们进行额外的注射。鸡IgY的茎部没有“Fc结构域”这提供了几个优势比兔igg:它减少了在诊断应用中出现假阳性的可能性，因为是哺乳动物的Fc域结合“类风湿因子”或其他自然产生的抗Fc抗体。不激活哺乳动物补体系统，允许鸡IgYs在体内应用。不与哺乳动物Fc受体结合，避免与表达此类受体的细胞(如巨噬细胞和树突状细胞)发生非特异性结合。
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1、直接法：这是最早的方法。其基本原理是用已知的抗体标记上荧光素后成为特异性荧光抗体，染色时将该抗体直接滴在载玻片上进行孵育，使之直接与载玻片上的抗原结合，在荧光显微镜下直接观察，作出判断。该方法评价：简单易行、特异性高、快速方便，常用于肾活检组织几种免疫球蛋白的检测和病原体的检测。但其不足是只能检测相应的一种物质，敏感性较差，效果有时不理想，目前较少作为更多方面的检测。
2、间接法：该法的基本原理是用特异性的抗体与切片中的抗原结合后，继用间接荧光抗体，与前面的抗原抗体复合物结合，形成抗原抗体荧光复合物。在荧光显微镜下，根据复合物的发光情况来确定所检测的抗原。该方法评价：由于结合在抗原抗体复合物上的荧光素抗体增多，发出的荧光亮度强，因而其敏感性强。目前本法应用较广泛，只需制备一种种属荧光抗体，即可适用于多种第一抗体的标记显示。
3、如果你有针对待查抗原一抗（荧光素标记），而且你的待检抗原表达也比较丰富的话，做直接法也未尝不可。不过如果你不具备上述两个条件的话，还是推荐你做间接法。
4、如果你做的是细胞骨架，那么就是用直接免疫荧光。如果是一般的蛋白表达，这个要看有没有试剂是直接标记的；如果没有，还是只能考虑间接荧光。直接荧光相对间接荧光可以避免非特异姓染色，当然步骤也少了些。我做过细胞骨架的直接染色，效果很好。
此法适用于小量抗体的荧光素标记，标记简便，非特异性染色较少。
(1)试剂和材料 试剂和材料同改良法。
(2)方法及步骤
①用0．025mol／L碳酸盐缓冲液pH9．0，将欲标记免疫球蛋白稀释成1％浓度，装入透析袋中。
②用同一缓冲液将FITC配成0．1mg／ml的溶液，按10mg／ml球蛋白溶液体积的10倍，将FITC稀释液盛于圆柱形容器内，并使透析袋浸没于FITC液中。
③容器顶端盖紧，底部放搅拌棒，在4~C电磁搅拌下透析标记24h。取出透析袋中标记液，即刻用SephadexG50凝胶过滤，去除游离荧光素，分装，贮存于4℃中。
2．放射免疫检测放射免疫检测技术是目前灵敏度最高的检测技术,利用放射性同素标记抗原（或抗体）,与相应抗体（或抗原）结合后,通过测定抗原抗体结合物的放射性检测结果.放射性同位素具有pg级的灵敏度,且利用反复曝光的方法可对痕量物质进行定量检测.但放射性同位素对人体的损伤也限制了该方法的使用.
3．酶联免疫吸附试验（ELISA）酶联免疫检测是目前应用最广泛的免疫检测方法.该方法是将二抗标记上酶,抗原抗体反应的特异性与酶催化底物的作用结合起来,根据酶作用底物后的显色颜色变化来判断试验结果,其敏感度可达ng水平.常见用于标记的酶有辣根过氧化物酶(HRP)、碱性磷酸酶（AP）等.由于酶联免疫法无需特殊的仪器,检测简单,因此被广泛应用于疾病检测.常用的方法有间接法、夹心法以及BAS－ELISA.间接法是先将待测的蛋白抱被在孔板内,然后依次加入一抗、标记了酶的二抗和底物显色,通过仪器（例如酶标仪）定量检测抗原.这种方法操作简单但由于高背景而特异性较差.目前已逐渐被夹心法取代.夹心法利用二种一抗对目标抗原进行捕获和固定,在确保灵敏度的同时大大提高了反应的特异性.近年来,抗原的定量检测技术也不断推陈出新.近年来,在夹心法ELISA的基础上,开发了多抗原检测试剂盒,能同时检测微量液相样本中多个抗原含量.这项技术的应用大大缩短了诊断的时间,提高诊断的可靠性和及时性.
4．免疫金胶体技术胶体金技术经过30多年的发展到现在已日趋成熟,该方法是将二抗标记上胶体金颗粒,利用抗原抗体间的特异性反应,最终将胶体金标记的二抗吸附于渗滤膜上,此方法简单,快速,广泛应用于临床筛查.
SPSS软件统计结管归析其析都看SIGSIG=significance意显著性面值统计P值P值0.01<P<0.05,则差异显著P<0.01,则差异极显著
F值差检验量整模型整体检验看拟合程没意义
t值每自变量（logistic归）逐检验看beta值β即归系数没意义
T数值表示归参数显著性检验值绝值于等于ta/2(n-k)（值表示根据置信水平自由度数值）拒绝原假设即认其解释变量变情况解释变量X解释变量Y影响显著
F值归程显著性检验表示模型解释变量与所解释变量间线性关系总体否显著做推断若F>Fa(k-1,n-k),则拒绝原假设即认列入模型各解释变量联合起解释变量显著影响反则显著影响
二抗可以耦联有几种不同的标记，可以是酶，荧光素，或生物素。
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