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怎么选择各公司的流式抗体?
2021-07-23
问题描述:

准备买流式抗体,发现文献中注明的抗体来自各个公司。。。。。。非常困惑,文献里用BD的表面标记分子,而在标记胞内抗原的时候喜欢用eBioscience的,为什么在使用的时候不用同一公司的抗体呢?这样很麻烦诶。

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Biolegend的抗体是越做越好了,看好他家。BD的CD盒子不错,价格也还实惠,比自己配的要便宜得多。我感觉BD、ebioscience、Beckman三家都差不多,另外BD的一般都是20ul/Test,实际用量可以考虑5ul,相对来说比较能接受。。。。eB的部分抗体特异性跟效价都要差一些,价格便宜的优势反而不重要。至于Beckman的,跟BD差距不是很大,单价格上会贵一些。你可以参考www.my-fcm.com.cn,哪家的都有,自己斟酌吧。
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本数据来源于百度地图,最终结果以百度地图最新数据为准。一、如何搭配流式抗体荧光标记流式抗体荧光标记搭配主要由3个因素决定的:流式细胞仪能检测多少个通道、需要同时检测检测多少个指标、厂家的抗体有多少种荧光标记。如果流式细胞仪的通道越多,那么同一份样本能同时做的表面/胞内标志就越多A、如何根据流式细胞仪搭配流式抗体1)BD流式细胞仪(06版目录第614页)流式细胞仪能检测多少个通道是由有多少根激光决定的以及每根激光的功能决定的,所以首先需要注意两点:流式细胞仪有哪些激光。比如标配的FACSCalibur只有一根488nm的激光,能做FL1、FL2、FL3三个荧光通道/三个颜色,而选配的Calibur(FACSCalibur的简称)配有488nm和635nm两根激光,可以检测FL1-FL4四个通道/4个颜色。不同型号的流式细胞仪的同样的一个通道检测荧光素的能力是不一样的,比如Calibur的FL3(第3通道)能检测PE-TexasRed,PE-Cy5,PerCP,PerCPCy5.5,PE-Cy7,而Aria的第3通道只能检测PE-TexasRed,PE-Cy5,PerCP。Calibur第3通道能检测的PerCP-Cy5.5在FACSAria上是第4通道检测。Calibur和LSR都能检测4个颜色,但是第4个通道检测荧光素是不一样的搭配荧光素原则搭配流式荧光素有2个原则:每个通道只能选择1种荧光素;各个通道之间的荧光素可以随意搭配,但需注意1、每个通道只能选择1种荧光素。以Calibur为例说明,Calibur的FL1通道选择了FITC就不能选择AlexaFluro488,或者选择了AlexaFluro488就不能选FITCCalibur的FL3通道尽管能检测PE-TexasRed,PE-Cy5,PerCP,PerCP-Cy5.5,PE-Cy7五个荧光素,但是我们我们搭配的时候只能选择其中1个。2、各个通道之间的荧光素可以随意搭配:如果客户的流式细胞仪能做4个通道,在第1个原则之下,那么每个通道随便选出1个荧光素就可以组合成4个颜色。以2跟激光的Calibur为例,Calibur各个荧光素之间可以搭配出16种组合。比如常用的搭配是FITC(FL1)+PE(FL2)+PerCP(FL3)+APC(FL4),这个搭配组合可以更改成AlexFluro(FL1)+PE(FL2)+PerCP(FL3)+APC(FL4),或者FITC(FL1)+PE(FL2)+PerCP(FL3)+AlexFluro(FL4),或者FITC(FL1)+PE(FL2)+PE-Cy5(FL3)+APC(FL4)等等。总之,在第1原则之下,我们可以随意搭配和组合各个荧光素。但是需要注意的是,APC和PE-Cy5一起使用。
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