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Enzyme Research/Anti-human Factor IX (F.IX)/SAFIX-APHRP/ 0.1 mg
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Enzyme Research/Anti-human Factor IX (F.IX)/SAFIX-APHRP/ 0.1 mg
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enzymeresearch
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SAFIX-APHRP
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sheep, peroxidaseconjugatedaffinitypurifiedIgG,0.1mg
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威斯腾生物在发布的shotgun混合蛋白(Western-blot实验服务、蛋白纯化、多肽合成、单克隆抗体制备、多克隆抗体制备、蛋白双向电泳实验服务、质谱分析、原核蛋白表达、真核蛋白表达、iTRAQ定量蛋白质组学、SILAC蛋白组学等) 威斯腾生物,让科研更简单!供应信息,浏览与shotgun混合蛋白(Western-blot实验服务、蛋白纯化、多肽合成、单克隆抗体制备、多克隆抗体制备、蛋白双向电泳实验服务、质谱分析、原核蛋白表达、真核蛋白表达、iTRAQ定量蛋白质组学、SILAC蛋白组学等) 查看更多>
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艾美捷科技有限公司在发布的PYK2 (phospho Tyr580) 多克隆抗体 | PYK2 (phospho Tyr580) Polyclonal Antibody供应信息,浏览与PYK2 (phospho Tyr580) 多克隆抗体 | PYK2 (phospho Tyr580) Polyclonal Antibody相关的产品或在搜索更多与PYK2 (phospho Tyr580) 多克隆抗体 | PYK2 (phospho Tyr580) Polyclonal Antibody相关的内容。 查看更多>
上海嵘崴达实业有限公司在发布的IRF4多克隆抗体供应信息,浏览与IRF4多克隆抗体相关的产品或在搜索更多与IRF4多克隆抗体相关的内容。 查看更多>
多克隆抗体的制备1. 器材:剪刀(剪兔毛用)一把、弯头眼科手术镊子(游离血管用)一把、直头眼科手术剪(剪血管用)一把,手术刀架,手术刀片,注射器(1ml、10ml,25ml)附针头,兔子固定架,灭菌三角烧瓶(200ml)或平皿(直径18cm)、弯头止血钳四把,直头止血钳两把,手术缝合线,塑料放血管,纱布 查看更多>
1) Prepare a C-18 reverse phase prep-sep cartridge by washing with:a) 10 ml of methanolb) 20 ml of chloroform-methanol (2:1)c) 10 ml of methanold) 10 ml of met 查看更多>
威斯腾生物在发布的多肽合成与修饰(Western-blot实验服务、蛋白纯化、多肽合成、单克隆抗体制备、多克隆抗体制备、蛋白双向电泳实验服务、质谱分析、原核蛋白表达、真核蛋白表达、iTRAQ定量蛋白质组学、SILAC蛋白组学等) 威斯腾生物,让科研更简单!供应信息,浏览与多肽合成与修饰(Western-blot实验服务、蛋白纯化、多肽合成、单克隆抗体制备、多克隆抗体制备、蛋白双向电泳实验服务、质谱分析、原核蛋白表达、真核蛋白表达、iTRAQ定量蛋白质组学、SILAC蛋白组学等) 威斯腾 查看更多>
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Reagents:Bacterial strainE. coli N4830/pJW10LB amp media50 µg/ml ampicillinHigh salt bufferfor 1 L50 mM KH2PO4 6.8 g150 mM KCl 11.18 g50 mM sodium pyroph 查看更多>
制备抗体的传统方法是用纯制的抗原多次接种于适当的成年健康动物,则激其产生免疫应答,血清中含有大量特异性抗体,又称抗血清或免疫血清。可以直接取用,也可将血清抗体提纯为精致免疫球蛋白。但是天然抗原含有多种互不相同的抗原决定簇,因此血清抗体是具不同特异性的多克隆抗体混合物... 查看更多>
抗原刺激机体,产生免疫学反应,由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组球蛋白,这就是免疫球蛋白,这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就是抗体。抗原通常是由多个抗原决定簇组成的,由一种抗原决定簇刺激机体,由一个B淋巴细胞接受该抗原所产生的抗体称之为单克隆... 查看更多>
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请问各位,做免疫组化用单克隆抗体好,还是多克隆抗体好。这两个有什么区别,顺便,大家帮我看看我的免疫荧光实验步骤有没有什么太大的问题。谢谢各位。

1取组织
(1) 灌注固定:暴露心脏,将注射针头插入左心室,剪开右心耳,快速灌注PBS,待右心耳处流出澄清液体,换4%多聚甲醛灌注到大鼠四肢强直为止,快速取脑和肾。
(2) 固定:将组织置于4%多聚甲醛中固定15小时
(3) 脱水:将组织放入30% 蔗糖溶液中直至下沉
(4) 切片:脑组织冰冻切片20微米,37度烘干2h以上;
(5)将切片放置-80度保存,随用随取。

2免疫单标记
(1)做抗原修复(0.4g柠檬酸、3g柠檬酸钠、1000ml水配制成溶液,放到水浴箱中90~94℃保存15min),冷却后, 用1*PBS反复洗标本10min,吸去PBS,同时向标本加渗透液(配0.4%trition液,然后将BSA加入到配好的trition液中,配成1%浓度)100ul,常温下湿盒反应1h。
(2) 吸去渗透液,同时向标本加block液(5%封闭用正常山羊血清)100ul,常温下湿盒反应5h。
(3) 吸去block液,同时向标本加入1:50稀释的羊抗鼠一抗100ul,37度湿盒反应过夜。
(4)吸去一抗,并回收,用1*PBS洗液反复洗15min。
(5)快速从冰箱中取出驴抗羊的二抗,并立即用锡纸包裹,注入到一个新的以锡纸包裹的tube管中并用PBS以1:200稀释。
(6)进入暗室,吸去PBS,同时加入二抗100ul,37度湿盒反应2h,封片。
(7)放置到荧光显微镜下观察。
废话,
没有marker,怎么知道你做的蛋白大小?
没有参照物,怎么知道你跑的快不快?
没有尺子,怎么知道你的size大小?
凭嘴说吗?

求助,我们免疫了小鼠,然后采用眼眶取血,之后10000g离心后发现上清的血清有少量溶血现象,发红。对后续的抗体实验有什么影响么,后续就初步硫酸铵纯化下抗体,做ELISA和间接荧光染色做流式之类的实验。这种有少量溶血的血清能用么

单克隆和多克隆的区别?__123
夙子XQ1812021-07-23
从化学结构上来看多克隆抗体都是极其不均一,呈高度异质性.
单克隆抗体结构相似且均一,有高度特异性
一般选用鼠或兔来做,如果你的免疫原分子量够大的话,就直接免疫,如果是小分子的话,可以连上BSA等的一些蛋白再免疫,五免后取血检测血清中抗体含量
兔单克隆抗体 123
最后一次HVVLE2021-08-05
单抗制备难度大,使用时候容易受到目标蛋白降解的影响。
多抗,稀释度更大,特异性相对较差,容易出现多条带。
兔的单克隆抗体和鼠的单克隆抗体在使用上不会有什么区别。

用来很多抗体,许多时候觉得单抗多抗也未必是理论上那样的。单抗做不好的也有,多抗条带唯一且清晰的也有。
而且很多蛋白的抗体未必有那么多的选择。
本数据来源于百度地图,最终结果以百度地图最新数据为准。大型动物多为皮下或肌肉免疫,但是初次免疫都建议在皮下进行。免疫形式,抗原通常需要与佐剂混合充分后才进行免疫。免疫剂量,免疫剂量根据被免疫的动物、免疫部位以及抗原的本身的特性相差很远。如果用兔制备多抗,首次免疫(皮下)一般在200-1000ug之间,对于大鼠,首次免疫(皮下)为100-500ug,对于小鼠,首次免疫(皮下)一般在10-100ug之间,加强免疫一般为首次免疫剂量的20%-50%。尾静脉或脾内方式加强则可减至几微克至十微克。对于体型比较大的动物可酌量增加,至于羊,没做过,抱歉,免疫周期,首次免疫后,一般在10-15d左右抗体的产量会达到一个峰值,但是此时抗体亲和力不够,大部分都是IGM,因此需要进行加强免疫,加强免疫一般在首次免疫后三至四周进行。第二次、第三次加强免疫间隔可以缩短至2-3周。这个时间不太能长也不能太短,太短起不到加强的效果,而且还容易引起免疫耐受,如果相隔太久,则前面的免疫将失去初步刺激的效果。
羊多抗免疫步骤和兔多抗免疫步骤一样的,周期也是一样的,就是免疫的部位不同,羊的免疫部位是:羊的小腿内侧皮下。采血部位是:颈静脉;放血部位是:颈静脉;最后收集血的部位:颈动脉。希望对你有帮助。
【求助】杂带123
彼岸花开dx2021-08-13

Santa的一支抗体,以前做样品的时候,是很单一的条带,现在同样的细胞出来的样品,一直出现杂带,就在原来的位置附近,靠得很近,而且很深,都分不清现在到底哪个才是目的带。是不是抗体放了几个月,会出现这样的问题?

还是一抗孵育时间的问题?之前20h没有杂带,但是有背景。后来就缩短了时间,背景浅了,但是有杂带

吐温有影响吗?之前是0.05%,后来试了0.1%,条带都不清楚了。

一抗浓度说明书上说1:100-1:1000.试过1:500,1:1000,1:2000杂带情况没有改善。


这个没有硬性规定,要根据实验情况而定。如果有文献参考,也可以先用发表的方法。

一般来说多克隆的阳性率高一些,但出现假阳性的比例也高一些。
抗体的制备—多克隆抗体123
弗兰爱贝尔2452017-11-04
一、多克隆抗体的制备一般包括以下几个步骤:
1、制备抗原。
2、选择实验动物。
3、动物免疫。
4、试取血进行测试,看看是否成功免疫。
5、如果成功免疫,杀死实验动物,采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。包括纯度以及特异性。
二、抗体分类
抗原通常是由多个抗原决定簇组成的,由一种抗原决定簇刺激机体,由一个B淋巴细胞接受该抗原所产生的抗体称之为单克隆抗体(Monoclone antibody)。由多种抗原决定簇刺激机体,相应地就产生各种各样的单克隆抗体,这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体,机体内所产生的抗体就是多克隆抗体;除了抗原决定簇的多样性以外,同样一类抗原决定簇,也可刺激机体产生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD等五类抗体。多克隆抗体是由异源抗原(大分子抗原、半抗原偶联物)刺激机体产生免疫反应,有机体浆细胞分泌的一组免疫球蛋白。多克隆抗体由于其可识别多个抗原表位、可引起沉淀反应,制备时间短,成本低的原因广泛应用于研究和诊断方面。
三、免疫方法
可以采用以下各种方法之一进行免疫。
(1)淋巴结注射法:①在兔的两后足跖部皮下(或皮内)注射活卡介苗 50mg(每侧约0.30ml) 。7~10 天后,兔跖及腘肌淋巴结肿大;②于肿大的两侧淋巴结内各注射加有完全佐剂的IgG 乳化抗原 0.50ml(含 IgG 5mg/ml、青霉素 1 000U/ml、链霉素 1 000μg/ml);③必要时,14 天后,重复步骤②一次;④再过 7 天后,于两侧淋巴结内各注射加有完全佐剂的 IgG 乳化抗原0.50ml(含IgG5mg/ml、青霉素 1 000U/ml、链霉素 1 000μg/ml) ;⑤5~7天后,耳静脉采血。测定血清效价。
(2)皮下多点注射法:①家兔两侧掌(跖内各注射含有完全佐剂抗原 0.10ml(IgG 含量5mg/ml) ;②7~10 天后,脊柱两侧多点(颈、胸、腰椎各两点、共 6 点)皮下注射含不完全佐剂5的抗原,每点 0.50ml;③7~10 天后,脊柱两侧重复注射一次;④7~10 天后试血。不合格者重复步骤③。
(3)多途径联合注射法:①两侧掌(跖)内侧皮下注射含完全佐剂抗原 0.50ml(IgG 量为 5mg/ml) ;②14 天后,多点皮下注射含有不完全佐剂抗原;③7 天后,耳静脉注射不含佐剂的抗原 2ml;④测定血清抗体效价,不合格者重复步骤③,并适当递增 IgG 量。
最近打算做CoIP,但是有一个蛋白没有抗体,实验室想制备一个。不知道对于CoIP来说,多克隆抗体行吗?还是要单克隆抗体