产品描述
本试剂盒用于检测猪血清中猪伪狂犬病毒抗体。评估猪场猪伪狂犬疫苗免疫状况，感染猪的血清学诊断。本试剂盒不能区别疫苗免疫和野毒感染。
【原 理】
本试剂盒系由预包被猪伪狂犬病毒抗原的微孔板和酶标记二抗及其他配套试剂组成，应用酶联免疫法（ELISA）原理检测猪血清或血浆中猪伪狂犬病毒特异性抗体。实验时，在包被板中加入对照血清和稀释的待检血清，经温育后，若样品中含有猪伪狂犬病毒的特异性抗体，则将与包被板上抗原结合，经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后；再加入酶标二抗，与包被板上抗原抗体复合物发生特异性结合；再经洗涤除去未结合的酶结合物，在孔中加TMB底物液，与酶反应形成蓝色产物，显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关；加入终止液终止反应后，产物变为黄色；用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值，即可知样品是否含有特异性抗体。
【储存及有效期】
于2～8℃避光保存，有效期为12个月。
包被板开封后请于2～8℃避光保存，使用期限为1个月。
【试剂盒组成】
1. 猪伪狂犬病毒抗原预包被微孔板条 96T×2
2. 酶标记物 (红盖) 11ml×2
3. 样品稀释液 (黄盖) 50ml×1
4. 20X浓缩洗涤液 (透明盖) 40ml×1
5. 底物液A (白盖) 11ml×1
6. 底物液B (黑盖) 11ml×1
7. 终止液 (黄盖) 11ml×1
8. 阳性对照血清 (红盖，已灭活) 1ml×1
9. 阴性对照血清 (绿盖，已灭活) 1ml×1
10. 盖板膜 1张
11. 自封袋 1个
12. 说明书 1份
【样品制备】
取动物全血，按常规方法制备血清，要求血清清亮，无溶血、无污染。样品短期可于2～8℃保存，长期需置-20℃保存。
【样品稀释】
用样品稀释液将待检血清按40倍稀释（如5μl血清加入195μl样品稀释液中，混匀）。阴、阳性对照不用稀释。
【洗涤液配制】
浓缩洗涤液使用前应恢复至室温（25℃左右），并摇动使沉淀的盐溶解，然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。
【试验操作方法】
1.使用前将试剂盒置室温30分钟，恢复至室温。
2.取所需用量包被微孔板条，设空白、阴性及阳性对照各2孔，未用的板条尽快密封，2～8℃保存。
3.阴性、阳性对照孔分别加入阴性、阳性对照血清100μl；样品孔每孔加入稀释后的血清样本100μl；空白对照孔不加。
4.混匀，置37℃反应30分钟。
5.扣去孔内液体，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，拍干。
6.每孔加酶标记物100μl（空白孔除外）。置37℃反应30分钟。
7.洗涤，同步骤5。
8.每孔依次加显色剂A、显色剂B各50μl，混匀，37℃避光反应10分钟。
9.每孔加终止液50μl，混匀，用空白孔调零，于450nm(630nm作参比波长）测定各孔吸光值（A450）。
【结果判定】
1.阴性对照：正常情况下，阴性对照孔A值≤0.1；
2.阳性对照：正常情况下，阳性对照孔A值≥0.5；
3.结果判定：样品A450值大于0.38，判为阳性；样品A450值在0.2到0.38之间，判为可疑；样品A450值小于0.2，判为阴性。
【试验方法的局限性】
该试验仅作为定性检测猪伪狂犬病毒IgG抗体，不能区别疫苗免疫和野毒感染。
