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Jackson/Normal Guinea Pig Serum/5.0 ml/006-000-120
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Jackson/Normal Guinea Pig Serum/5.0 ml/006-000-120
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Information Normal serums are lipid extracted to improve clarity, dialyzed against phosphate buffered saline (PBS) containing sodium azide, and freeze dried. Normal serum diluted to 5% (v/v) in PBS is strongly recommended as a blocking reagent to reduce background from non-specific, conserved sequence and/or Fc receptor binding. Best results are obtained with diluted normal serum from the same host as the labeled antibody, as a separate incubation step before addition of the primary antibody.Usage Physical State: Freeze-dried solid

Storage and Rehydration: Store freeze-dried solid at 2-8°C. Rehydrate with the indicated volume of dH2O (see product specification sheet) and centrifuge if not clear. Prepare working dilution on day of use. Product is stable for about 6 weeks at 2-8°C as an undiluted liquid.Extended Storage after Rehydration: Aliquot and freeze undiluted product at -20°C or below. Avoid repeated freezing and thawing. Expiration date: one year from date of rehydration. The expiration date may be extended if test results are acceptable for the intended use.

Preservative:0.05% Sodium Azide Suggested Working Concentration or Dilution Range:For blocking purposes, use 5% (v/v) solution (1:20 dilution from rehydrated volume). Rehydration according to instruction yields 100% serum.Images & References

This product is for in vitro research use only. It is not a medical device and it is not intended for diagnostic or therapeutic purposes.

Jackson代理蚂蚁淘、代理Jackson蚂蚁淘


Jackson总部位于美国宾夕法尼的兰卡斯特,距离费城大概有40英里。Jackson在1982年由科学家展开了包括在细胞生物学,蛋白质化学,微生物学,免疫学及产品开发实验研究。我们的目标是为世界各地的研究者能最大选择的提供最高质量的科学试剂以及最棒的技术支持和售后服务。蚂蚁淘向您提醒的是,Jackson产品仅用于研究,不用于诊断或治疗用途。作为美国著名的各种二抗生产公司之一,Jackson在全世界各国设有几十家代理。由于其产品效价高、种类全、价格低廉,因而成为全球各大药厂、试剂盒生产厂、大型实验室采购此类试剂的首选。其产品主要包括:各种纯化的二抗、标记的二抗(AMCA、Cy2、FITC、Cy3、TRITC、RRX、TR、Cy5、长臂生物素、辣根酶和碱磷酶标记)、金标试剂等。


Jackson二抗产品选购简介

 

为便于客户选购Jackson公司的各种二抗,特将选购时的注意事项摘译如下:


 1、确定所需的抗体是“整个IgG抗体分子”还是抗体分子的F(ab")片段或Fab片断。
Jackson可以提供三种形式的亲和纯化抗体:整个IgG、F(ab")片段和Fab片断。后两者由于去除了抗体的Fc段,可以避免与细胞表面的Fc受体结合而干扰检测结果。可采用二抗来源的动物血清进行封闭,也可封闭Fc受体。但需要注意的是不能使用一抗来源的动物血清作为封闭液。

 

2、在抗体描述(AntibodyDescription)一栏选择针对所需检测的一抗的种属、选择所需的二抗的种属来源、选择所需二抗的特异性、选择所需标记物标记的二抗。
依据Jackson公司的质检,来源于不同种属的抗同一抗原的抗体在品质上无差异。关于抗体种属的选择,除非有必要,一般不选择针对相关种属的免疫球蛋白吸收过的抗体,因为同时也会去除一些与所吸收的抗体具有相似同源性的某些亚类,造成不会与一抗的所有亚类反应。针对某一种属的抗体可能会和其他一些种属有交叉反应。牛血清白蛋白和奶粉可能含有与抗牛IgG、抗山羊IgG、抗马IgG、抗绵羊IgG等抗体反应的IgG,因此如果使用它们作为封闭液或抗体稀释液的成分,会增加背景染色和降低抗体的效价。

 

JacksonImmunoResearch的抗体产品线完全,有全球最大的二抗产品库,能提供多种应用类型和需要的二抗产品,其二抗产品本身也具有极高的产品质量和稳定性。以上述产品为例,其HRP酶标山羊抗小鼠二抗,WB实验的应用稀释比率为1:10000-1:200000,也就是说,购买的2ml二抗,实际应用时相当于20L-400L的最终使用液。另外,一次购买大包装,避免了不同批次之前的差异,降低了实验条件本身的误差。作为多家著名品牌的代理商,蚂蚁淘根据国内科研的现实需求,为客户选择最具性价比的二抗及血清产品免疫学解决方案。如果您对Jackson的产品感兴趣,请致电027-84454412到蚂蚁淘科技有限公司问询您所感兴趣的产品类型。


JacksonImmunoResearchLaboratories,INC.专业致力于亲和纯化的二抗和免疫球蛋白的生产及偶联。产品主要销往世界各地的大学和科研院所。该公司位于宾夕法尼亚州费城以西约40英里,始建于1982年,经过40年左右的发展,Jackson的二抗以种类丰富(物种齐全,标记多样,应用广泛)、性价比高、供货迅捷而受到更多科研学者和工业客户的青睐。


Jackson的产品主要有酶标二抗、荧光标记二抗、生物素标记二抗、胶体金标记二抗、封闭血清等等,其中JacksonHRP标记羊抗兔/羊抗鼠二抗,更是很多生产厂家的重要物料之一。苏州蚂蚁淘生物科技有限公司作为Jackson在中国的代理商,备有大量二抗现货,并能提供专业的售前咨询和完善的售后服务。


JacksonImmunoResearchLaboratories,INC.专业致力于亲和纯化的二抗和免疫球蛋白的生产及偶联。产品主要销往世界各地的大学和科研院所。该公司位于宾夕法尼亚州费城以西约40英里,始建于1982年,经过40年左右的发展,Jackson二抗以种类丰富(物种齐全,标记多样,应用广泛)、性价比高、供货迅捷而受到更多科研学者和工业客户的青睐。

Jackson的所有产品均具有极高的纯度和高超的品质,大部分二抗产品以冻干粉形式存在,易于保存和运输;作为二抗的实际生产商(非OEM商),产品的性价比也是非常高的,很多大厂家诸如T.F等也会从JacksonOEM产品。另外厂家完善的库存和供应体系以及高效稳定的纯化技术,保证了大部分二抗产品均能现货形式供应,不同批次的产品质量的稳定性也非常高。

Jackson的产品主要有酶标二抗、荧光标记二抗、生物素标记二抗、胶体金标记二抗、封闭血清等等,其中JacksonHRP标记羊抗兔/羊抗鼠二抗,更是很多生产厂家的重要物料之一。苏州蚂蚁淘生物科技有限公司作为Jackson在中国代理商,备有大量二抗现货,并能提供专业的售前咨询和完善的售后服务。


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在正常孕妇的血清中,存在一种抗配偶淋巴细胞的特异性IgG抗体,它可抑制淋巴细胞反应(MLR),封闭母体淋巴细胞对培养的滋养层的细胞毒作用,防止辅助T细胞识别胎儿抗原的抑制物,并可阻止母亲免疫系统对胚胎的攻击。封闭同种抗原刺激的淋巴细胞产生巨噬细胞移动抑制因子(MIF),故称其为封... 查看更多>
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免疫组化中的血清封闭原理封闭血清没有也不应该和样品发生反应,应该是说,血清把没有包被 (coating)到的地方通通填满,以防止一抗乱吸附,所以封闭可以用二抗同物种血清,也可用 BSA 或 Gelatin,就是不能使用一抗同物种血清,因为里面含有同物种抗体,肯定会被二抗辨识。先加一抗后再封闭的话,一抗就会结合到固相表面上,这种结合力是非特异性的疏水作用力,这种作用力是比较强的,经过处理的固相表面如硝酸纤维膜,酶标板对蛋白的吸附力更强,你 查看更多>
什么是封闭血清(Blocking Serum=Normal Serum)?封闭血清就是将养殖的非免疫的正常动物采血,然后不加抗凝剂,血液凝固,血块收缩,析出的淡黄色液体。经过特殊工艺处理后的血清,特别适在各类免疫学实验中用于封闭处理, 比如:IHC、IF/ICC、ELISA等。 血清与血浆的区别?血浆是指血液中除去细胞成分后剩下的淡黄色或无色半透明液体,一般需要经过抗凝处理 。血清与血浆的区别在于血清中不含某些在凝血过程中被消耗的凝... 查看更多>
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“第五组分” 是 牛血清蛋白的一个级别。
牛血清蛋白等级 从低到高 :
牛血清白蛋白,
牛血清白蛋白第五组分,
牛血清白蛋白(无必须脂肪酸),
牛血清白蛋白(无蛋白酶),
牛血清白蛋白(细胞培养级),
金标级牛血清白蛋白,
交联牛血清白蛋白
就是说 越往后的 蛋白 品质越高,当然价钱也越贵。
你说的牛血清蛋白(BSA)中的BSA 就是“牛血清蛋白”的英文缩写简称。 BSA 不是一种型号。以上是原创
ELISA实验的原理似乎很简单,不外乎固定抗原,添加一抗、二抗和底物,间中夹杂着洗涤和封闭。然而,即使是平淡无奇的洗涤和封闭,如果做得不太好,也有可能毁了整个实验。在实验结束时,我们是否能获得有意义的信息,这在很大程度上取决于结果的信噪比。背景噪音会影响您对结果的判断。如何降低ELISA的背景,下面有一些tips。洗涤很重要
洗涤步骤看似很无聊,其实很重要,因为如果未结合的材料(如非特异结合的抗体或检测试剂)残留在微孔板中,那么它会增加背景噪音。如有必要,可增加洗涤液中的盐浓度,这会阻止非特异结合反应。如果背景过高,而您怀疑洗涤不够时,可以尝试增加洗涤次数。封闭更关键
封闭液的作用是让不相关的蛋白占据微孔板中潜在的结合位点。这就降低了可产生信号的抗体非特异结合的机会。您当然也希望抗体只与目的蛋白结合吧。如果您的背景过高,怀疑封闭不充分,那么您可以尝试使用更高浓度的封闭液,或适当延长封闭时间。如果您一直被背景问题所困扰,那么也许您该花些时间来优化封闭液。这可能需要时间,但也是值得的。目前主要有两种类型的封闭液:蛋白和非离子型去污剂。您使用的类型须取决于多个因素,包括微孔板的表面试剂、吸附的抗原、您的抗体和检测试剂。好的封闭液应降低非特异性结合,但它不应当与抗原、抗体或检测试剂发生相互作用。
最常用的非离子型去污剂是Tween-20。这种封闭液便宜、稳定,在去除洗涤过程中的一些非特异结合上很有用。但它们只在存在时起作用,因为很容易被洗掉。因此所有洗涤液中也必须添加封闭液。请勿使用高浓度(正常浓度为0.01-0.1%),它会降低特异结合,产生假阴性。另一个选择是使用蛋白和非离子型去污剂这两种封闭液,后者可协助洗涤过程中的封闭。蛋白封闭液则有所不同,是永久的。它们与开放位点结合并封闭,同时稳定与微孔板结合的抗原分子。常用的蛋白封闭液包括牛血清白蛋白(BSA)、脱脂奶粉、正常血清和鱼明胶。血清组分的内在多样性可使它有效拦截许多不同类型的分子相互作用。不过,它的缺点在于能与Protein A和IgG抗体相互作用。解决这个问题的一种方法是使用鸡或鱼的正常血清。
抗体浓度须优化我们通常会follow师兄师姐留下来的操作步骤,但是如果试剂稍有不同,则可能需要优化抗体的量。记住,非特异的抗体结合会增加背景。为了防止这一点,切勿使用过多的一抗或二抗。
做封闭的时候是不应该加AB型血清的。做封闭的目的就是用非特异性的抗体和蛋白质结合掉细胞上那些可以和抗体非特异性结合的位点。
血清的目的就是因为含有白蛋白和抗体,所以一举两得。不过不应该用AB型。这是人的血清。流式检测一般都是使用小鼠单克隆抗体,所以封闭的血清也应该是用种的小鼠血清。
封闭不当反而会使阴性本底增高,操作时洗涤彻底,取决于 ELISA 的模式及具体的实验条件,业已起到了类似封闭剂的作用.5%的牛血清白蛋白,封闭一般是不可少的(见2,而且封闭后的载体不易长期保存,吸收后固相载体表面尚有未被占据的空隙 。特别是用单抗腹水直接包被时。高质量的速溶食用低脂奶粉即可直接当作封闭剂使用。 BIM试剂盒为您提供.2。脱脂奶粉也是一种良好的封闭剂,双抗体夹心法。抗原或抗体包被时所用的浓度较低.05%-0。包被好的E LISA 板干燥后放入密封袋或锡袋中,封闭就是让大量不相关的蛋白质充填这些空隙,因其中大量非抗体蛋白在包被时同样也吸附在固相表面,从而排斥在ELISA 其后的步骤中干扰物质的再吸附。但在间接法测定中; ,因此在试剂盒的制备中较少应用; ,在低温可保存数月。一般说来,其最大的特点是价廉。并非所有的ELISA 固相均需封闭,也有用10%的小牛血清或1%明胶作为封闭剂的,可以高浓度使用(5%)。封闭的手续与包被相类似; 。最常用的封闭剂是0,不经封闭也可得到满意的结果;封闭 (blocking)是继包被之后用高浓度的无关蛋白质溶液再包被的过程,但由于奶粉的成份复杂.2)。封闭是否必要,只要酶标记物是高活性的
1、问:用免疫荧光方法做组织切片和培养细胞内的蛋白,两者操作过程有哪些不同?
参考见解:只是固定方法不同。细胞固定用甲醇,切片固定用多聚甲醛,而染色方法是一样的。
2、问:近期要做免疫荧光双标,不知哪位有免疫荧光双标技术的详细步骤及其注意事项?
参考见解:我正在做冰冻组织切片的免疫荧光双染。我的经验是:
(1)选取一抗时要来源于两种不同的动物,我用的是来源于rabbit和rat的抗体,二抗则是不同荧光信号标记的,我用的是donkey anti-rabbit-FITC(绿)和donkey anti-rat-Tex-Red(红)。
(2)我的做法是两种一抗(CHI抗体)同时孵育,然后两种二抗同时孵育。抗体浓度、孵育时间要仔细摸索,我感觉一抗4度孵育过夜比较好,背景比较清晰。
(3)我的阳性对照用的是阳性组织切片,阴性对照则分别是家兔和大鼠的IgG,荧光标记物对照是PBS+荧光标记物。
(4)封闭血清与二抗来源动物一致,我用的是10%的正常donkey血清。
(5)其余步骤同一般免疫荧光单标操作。
3、问:本人拟做Brdu标记神经干细胞免疫荧光,二抗为FITC标记,想请教各位大侠:
(1)抗体分装和荧光显微镜观察时是否一定要在暗室中进行?
(2)封片时是否用甘油缓冲液即可,还是用甘油和0.5mmol/L pH9.0-9.5的碳酸氢盐缓冲液等量混合封片?
(3)免疫酶染色中的3%过氧化氢及2N盐酸是否还需要用?
参考见解:
(1)你的二抗是用FITC标记的,为避免荧光分解,分装及荧光显微镜观察时均要避光;
(2)封片最好用甘油加0.5mmol/L pH9.0-9.5的碳酸氢盐缓冲液,后者能使玻片透明;
(3)关于免疫酶染色,如果是用过氧化物酶做标记,就必须用3%H2O2以去除内源性过氧化物酶;2N盐酸需要使用,目的是使DNA变性,让Brdu抗体能够充分地与已经掺入的Brdu结合。
4、问:做间接法免疫荧光染色,如何设置对照?
参考见解:最好是同一视野在未用荧光激发下进行对照,看是否非特异性染色。
(1)空白对照:如果你做的是石蜡切片免疫组化,这个对照必须有,目的是看自发荧光,脱蜡后直接在荧光显微镜下观察。
(2)阴性对照:标本直接滴加二抗,呈阴性反应。
(3)抗原对照:标本加同种动物的未免疫血清,以PBS冲洗后,在加抗免疫球蛋白荧光抗体。因未免疫动物的血清中无特异性抗体,应呈阴性反应。
5、问:我做乳腺组织的免疫荧光染色,结果用激光共聚焦显微镜看很好:有阳性信号,阴性对照组也没有荧光,但是拿到荧光显微镜下看,我的阴性对照组一片绿,像非特异性染色,到底哪个结果才是真实的呢?

参考见解:激光共聚焦显微镜的分辨率比普通荧光显微镜要高的多,出现上述现象首先要排除荧光显微镜的问题,如是不是紫外灯泡寿命到期了或者别的原因,荧光显微镜没有问题,那就以共聚焦显微镜的结果为主。展开
封闭是血清与非特异性位点结合,以消除非特异性染色,提高目的蛋白的准确性和降低背景。并非所有的免疫组化都由山羊血清封闭,因为一般二抗是羊抗X,所以采用山羊血清,其与使用二抗来源有关。
每个月20号申请帮别人做封闭抗体治疗对我自己的身体有影响吗?每个月二十毫升血帮别人做封闭抗体治疗对我自己的身体有影响吗
糖包衣及其方法 X技术123
阿赛_seven2018-01-26
都说是封闭,羊血清究竟封闭的是什么(抗原?)那接下来加一抗怎么又能反应结合?不是封闭了吗?
细胞免疫荧光的详细操作步骤1,取出细胞爬片放到35mm或60mm用过的细胞培养皿里,PBS洗三遍。注意有的时候作的细胞爬片可能比较小,因此夹取的时候要小心。2,4%多聚甲醛固定20分钟,PBS洗三遍。3,0.2%TritonX100通透10分钟,PBS洗三遍。4,与二抗相同宿主的血清封闭30分钟,PBS洗三遍。5.,一抗4度湿盒内过夜,也可37度2小时,感觉前者效果好,PBS洗三遍。6,二抗室温2小时,或者37度1半小时,PBS洗三遍。7,最好用DAPI染核,然后直接照荧光片。8,蒸馏水洗掉PBS,甘油封片,指甲油封片子的四周。
1.漂洗血清蛋白H7.2-7.4 37度 PBS 2小时.

2.-20度甲醇固定20分钟后,自然、干燥 10分钟

3.PBS洗净:3min*3

4.1%Triton:25min-30min.配成50ultriton+5mlpBS

5.PBS洗净:2*5min

6.羊血清封闭:37度,20分钟

7.一抗,4度过夜,一般要大于18小时或者37度 1-2小时

8.4度 PBS洗净,3min*5次

9.二抗 37度小于一小时
要看你山羊抗体的交叉反应效果。BSA的效果。
一般用BSA。
建议使用二抗来源的血清,这样,如果样品对二抗来源有非特异吸附的话,在这一步就可以排除了,降低背景,提高信噪比,比较有利于显现一些弱的信号。
如果封闭不好,二抗直接与样品结合,荧光背景高,就很难判断结果了。
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