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测定化学因素对微生物的影响实验一测定石炭酸系数
来自 : 蚂蚁淘
实验方法原理为了比较各种化学消毒剂的杀菌能力,常以石炭酸为标准,即将某一消毒剂作不同稀释后,在一定条件下,一定时间内致死全部供试微生物的最高稀释浓度,与达到同样效果的石炭酸的最高稀释度的比值,称为这种消毒剂对该种微生物的石炭酸系数(酚系数)。石炭酸系数越大,说明该消毒剂杀菌能力越强。
实验材料
试剂、试剂盒
仪器、耗材
实验步骤
1. 各种化学药品的杀菌作用

(1)用无菌吸管吸取培养18小时的白色葡萄球菌菌液0.2ml于无菌平皿内。

(2)倒入已溶化并冷至45℃左右的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基于上述平皿内,充分摇匀,水平放置,待凝。

(3)将上述已凝固的平皿用记号笔在平皿底划成八等份,每一等份内标明一种药物的名称。

(4)用无菌镊子将小圆形滤纸片分别浸入各种药品中,取出,并在试管内壁上除去多余药液后,以无菌操作将纸片对号放入培养皿的小区内。

(5)将上述放好滤纸片的含菌平皿,倒置于37℃温室中培养24小时后,取出测定抑菌圈大小,并说明其杀菌强弱。

2. 石炭酸系数的测定

(1)将5%(1:20)的石炭酸液按表Ⅸ-1配成不同浓度,每管5ml。

(2)将待测药物(来苏尔)先配成1:20的原液,再按表Ⅸ-2配成不同浓度,每管5ml。
(3)取肉膏蛋白胨液体培养基30管,1~15管标明石炭酸的5种浓度,每种浓度3管,每3管分5、10、15分钟处理,16~30管标明来苏尔的5种浓度,同样每种浓度3管,每3管分5、10、15分钟处理。

(4)在上述不同浓度的石炭酸和来苏尔溶液中,各接入0.5ml大肠杆菌液,摇匀。注意每管自接种时起在5、10、15分钟,用同一接种环从各管内取一环接入上述已标记的液体培养基试管中。
(5)置37℃温室中培养48小时,观察并记录生长情况。生长者溶液混浊,以“+”表示;不生长者溶液澄清,以“-”表示。

(6)计算系数值找出在5分钟生长,而在10分钟和15分钟均不生长的石炭酸及来苏尔的最大稀释度,计算二者的比值。例如石炭酸在10分钟内杀死大肠杆菌的最大稀释度是1:70,来苏尔是1:250,则来苏尔的石炭酸系数为250/70=3.6。
 
3. 结果
(1)各种化学药品对白色葡萄球菌的致死能力
(2)石炭酸系数的测定和计算
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