肾组织提总蛋白的方法
EDTA和Tris的混合液,配方：Tris-Cl(pH7.4)20mM，EDTA1mM.可加入蛋白酶抑制剂,提取磷酸化的蛋白还需加Na3VO40.1mM及NaF25mM）。⑴匀浆对于组织,可每50~100mg加1ml裂解液，肺100~200mg加1ml裂解液。可手动或电动匀浆。注意尽量保持低温，快速匀浆。⑵12000g离心，4℃，2min。⑶取少量上清进行定量。⑷将所有蛋白样品调至等浓度，充分混合沉淀加loADIngbuffer后直接上样最好，剩余溶液（溶于1×loadingbuffer）可以低温储存，-70℃一个月，-20℃一周，4℃1~2天，每次上样前98℃，3min。
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发布于 ： 2018-12-26
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