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NEB/T4 DNA Polymerase/M0203S/750 units
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NEB/T4 DNA Polymerase/M0203S/750 units
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Description:

T4DNAPolymerasecatalyzesthesynthesisofDNAinthe5´→3´directionandrequiresthepresenceoftemplateandprimer.Thisenzymehasa3´→5´exonucleaseactivitywhichismuchmoreactivethanthatfoundinDNAPolymeraseI(E.coli). UnlikeE.coliDNAPolymeraseI,T4DNAPolymerasedoesnothavea5´→3´exonucleasefunction.



Highlights

  • Extremefidelity(6)
  • Gapfilling(nostranddisplacementactivity)
  • Bestenzymeforcreatingbluntends
  • Isolatedfromarecombinantsource

ProductSource

Purifiedfromastrainof E.coli thatcarriestheT4DNAPolymerasegene.

ReagentsSupplied

Thefollowingreagentsaresuppliedwiththisproduct:

Storeat(°C)Concentration
NEBuffer™2.1-2010X

Notes:

Forfill-inreactionsonly:T4DNAPolymerasecanbeusedinNEBuffers1.1,2.1,3.1andCutSmart® BufferaswellasNEBuffers1-4andT4DNALigaseReactionBuffer.Forbluntingreactionsrequiringremovalofoverhangs:T4DNAPolymerasecanbeusedinNEBuffers1.1,2.1,andCutSmartBufferaswellasNEBuffers1,2,and4andT4DNALigaseReactionBuffer.NEBuffers3.1and3arenotrecommendedwhenoverhangremovalisrequired.OptimalactivityisobservedinNEBuffer2.1.SupplementwithdNTPs.*BSAsupplementationisrecommendedwhenusingabufferthatdoesnotalreadycontainBSA.Incubateattemperaturesuggestedforspecificprotocol.*RefertospecificprotocoltodeterminerecommendeddNTPconcentrations.
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Several forms of post-translational modification regulate protein activities. Recently, protein methylation by CARM1 (coactivator-associated arginine methyltr 查看更多>
最近十年,口服核苷(酸)类似物的应用使乙型肝炎治疗取得重大进展。拉米夫定、阿德福韦酯、恩替卡韦、替比夫定和替诺福韦 5 种药物已被批准用于治疗慢性乙型肝炎,其中前 4 种已在我国上市,替诺福韦也将在我国开展临床试验。 虽然药物获批程序非常严格,但某些发生率很低或在长期用药期间发生的不良反应仍可能被临床前试验和临床试验疏漏或忽视。上述可能的 查看更多>
【BL1223】zymoresearch DNA聚合酶,DNA提取试剂盒ZYMO。主要研发和生产生物科技实验室使用的各种生物试剂、耗材、仪器。其DNA提取试剂盒系列产品以“快速、简便、超纯”的特点在众多生物科技产品中脱颖而出,独占鳌头。【BL1223】zymoresearch DNA聚合酶。ZYMO RESEARCH生物科技公司位于美国加州OrangeCounty,创建于上世纪90年代初,主要研发和生产生物科技实验室使用的各种生物试剂、 查看更多>
Klenow酶是大肠杆菌八聚合酶I的羧基端片段,它具有DNA聚合酶和3’到5’方向的外切酶活性,不含5’到3”方向的外切酶活性。 查看更多>
大规模基因组测序计划的实施已改变生命科学的重心,在相当短的时期内,一些原核生物和某些低等真核生物的基因组序列已被测定. 1995年,流感嗜血杆菌基因组序列首次被破译,在此后不到两年的时间,近50个细菌的基因组序列已被完成. 然而,这仅仅是理解有机物功能的一个起点. 在基因组时代,许多D 查看更多>
大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ Klenow片段实验的相关实验步骤、实验技巧、实验protocol、实验经验及常见问题。Klenow酶是大肠杆菌八聚合酶I的羧基端片段,它具有DNA聚合酶和3’到5’方向的... 查看更多>
成都艾特姆生物科技有限公司在发布的供应销售Taq DNA聚合酶供应信息,浏览与供应销售Taq DNA聚合酶相关的产品或在搜索更多与供应销售Taq DNA聚合酶相关的内容。 查看更多>
Introduction:C. elegans RNA preps that have been widely used previously involved fairly slow lysis of the worms, potentially leading to degradation of the RNA. 查看更多>
第一节 概 述把一个有用的目的DNA片段通过重组DNA技术,送进受体细胞中去进行繁殖和表达的工具叫载体(Vector)。细菌质粒是重组DNA技术中常用的载体。质粒(Plasmid)是一种染色体外的稳定遗传因子,大小从1-200kb不等,为双链、闭环的DNA分子,并以超螺旋状态存在于宿主细胞中。质粒主要发现于细菌、放线 查看更多>
当 Sanger 及其同事建立第一个 DNA 链终止延伸法时,只有一种合适的 DNA 聚合酶可用,即大肠杆菌 DNA 聚合酶 I Klenow 片段。它具有在模板存在时聚合 dNTP 的活性,但缺乏完整聚合酶 I 的 5'-3'外切酶活性。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。 查看更多>
上海宾智生物科技有限公司在发布的Phusion Green Hot Start II High-Fidelity DNA polymerase 绿色的Phusion热启动II高保真DNA聚合酶供应信息,浏览与Phusion Green Hot Start II High-Fidelity DNA polymerase 绿色的Phusion热启动II高保真DNA聚合酶相关的产品或在搜索更多与Phusion Green Hot Start II High-Fidelity DNA polymerase 绿色的 查看更多>
耐热DNA聚合酶特点:合理选择耐热DNA聚合酶是PCR成败与否的一个关键因素,如何选择最合适的耐热聚合酶,是进行PCR实验首先要考虑的问题。目前市面上有许多耐热DNA聚合酶,虽然名称各不相同,但主要区别在于特异性、保真性、耐热性、扩增速率、扩增片段 查看更多>
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哪里能买到BstDNA聚合酶!哪里的更好用一点?请大家帮忙!
端粒酶 123
shineck62014-07-18
看到原核生物DNA复制结束时,引物水解后用DNA聚合酶1补充留下的空白链。但是真核生物是水解引物后要通过端粒酶先合成一段后再用DNA聚合酶修补…不太明白为什么真核生物不能直接用DNA聚合酶修补水解引物之后留下的空白呢?端粒酶与DNA聚合酶有什么区别呢?
相同点:都能以DNA为模板,从5'向3'进行核苷酸或脱氧核苷酸的聚合反应。
不同点:
1、作用底物不同。RNA聚合酶底物是NTP;DNA聚合酶底物是dNTP。
2、RNA聚合酶作用不需要引物,而DNA聚合酶作用需要引物。
3、RNA聚合酶本身具有一定的解旋功能,而DNA聚合酶没有,当需要解开双链的时候要解旋酶和拓扑异构酶的帮助。
4、RNA聚合酶只具有5‘到3’端的聚合酶活性,而DNA聚合酶不仅有5‘到3’端的聚合酶活性,还具有3‘到5’端的外切酶活性。保证DNA复制时候校对,所以复制的忠实性高于转录的。
5、RNA聚合酶通常作用于转录过程;DNA聚合酶通常作用于DNA复制过程。
DNA聚合酶是DNA复制时起作用的酶。DNA复制酶这个说法很少见。
A、DNA转录形成RNA时需要RNA聚合酶的催化,底物是核糖核苷酸,A错误;
B、酶大部分是蛋白质、少量是RNA,故某种酶的基本组成单位是氨基酸或核糖核苷酸,B错误;
C、内分泌细胞能产生激素,活的细胞能产生酶,故能产生激素的细胞就能产生酶,C正确;
D、酶通常是蛋白质,蛋白质在低温条件下更加稳定,利于保存,而且低温不会使酶失活,因此在最适温度保存没有意义,D错误.
相同点:都能以DNA为模板,从5'向3'进行核苷酸或脱氧核苷酸的聚合反应。
不同点
1、作用底物不同。RNA聚合酶底物是NTP;DNA聚合酶底物是dNTP。
2、RNA聚合酶作用不需要引物,而DNA聚合酶作用需要引物。
3、RNA聚合酶本身具有一定的解旋功能,而DNA聚合酶没有,当需要解开双链的时候要解旋酶和拓扑异构酶的帮助。
4、RNA聚合酶只具有5‘到3’端的聚合酶活性,而DNA聚合酶不仅有5‘到3’端的聚合酶活性,还具有3‘到5’端的外切酶活性。保证DNA复制时候校对,所以复制的忠实性高于转录的。
5、RNA聚合酶通常作用于转录过程;DNA聚合酶通常作用于DNA复制过程
我要P一个3kb左右的目的基因,需要一个保真性高的酶,因为后面要测序,而且我的两个引物的GC含量相差也很大,还需要一个载体连接去进行筛选,这个载体要4kb以上的,因为要和我的目的基因大小相差大一点的,而且这个载体上还要有多个切割位点,好让我切割下来,与最终的质粒相连。
最近,我看了很多这方面的资料,但是我对这个方面不是很了解,所以现在搞得头昏眼花的,不知道该选什么酶和载体,希望大家多多帮忙
在此十分感谢
观察以下dna结构图,判断dna聚合酶能够与哪一个结合
可分为以下几个类群:(1)依赖DNA的DNA聚合酶;(2)依赖RNA的DNA聚合酶;(3)依赖DNA的RNA聚合酶;(4)依赖RNA的RNA聚合酶。前两者是DNA聚合酶,它使DNA复制链按模板顺序延长。如在原核生物中仅就大肠杆菌中已被发现的就有三种(分别简称为PolⅠ,PolⅡ和PolⅢ等);DNA聚合酶只能在有引物的基础上,即在DNA或RNA引物的3′-OH延伸,这DNA的合成方向记为5′→3′。换言之DNA聚合酶催化反应除底物(αNTP)外,还需要Mg2+ 、模板DNA和引物,迄今细胞内尚无发现可从单体起始DNA的合成。同样,上述(3)和(4)是催化RNA生物合成反应中最主要的RNA合成酶,它们以四种三磷酸核糖核苷(NTP)为底物,并需有DNA模板以及Mn2 及Mg2 的存在下,在前一个核苷酸3′-OH与下一个核苷酸的5′-P聚合形成3′,5′-磷酸二酯键,其新生链的方向也是5′→3′。RNA聚合酶也大量存在于原核和真核生物的细胞中。如大肠杆菌RNA聚合酶分子量4.8×105,由5条多肽链组成,分别命名为α,α,β,β′,和γ,全酶可用α2ββ′λ表示。真核生物RNA聚合酶分子大于5×105,由10~12个大小不等亚基组成。聚合酶除作为自然界生命活动中不可缺少的组分外,在实验室中大多用作生命科学研究的工具酶类之一。
首先,原核生物DNA聚合酶分为Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ.Ⅰ主要是起修复的作用(比如光修复),还有就是把RNA引物切除后的空隙填补起来,Ⅱ是参与原核生物SOS修复的酶,Ⅲ是原核生物在DNA延长中起主要作用的酶.
再来说真核生物,真核生物的DNA聚合酶分为α,β,γ,δ,ε,.首先我来说三个和原核生物中的Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ功能相同的酶.ε类似于原核生物DNA聚合酶Ⅰ,β类似于原核生物DNA聚合酶Ⅱ,δ类似于原核生物DNA聚合酶Ⅲ.α具有引物酶活性,而γ则是作为复制真核生物线粒体内的DNA所需要的酶.
我以质粒为模板进行定点突变,质粒加目的片段一共6.5kb,不知道选用那种高保真聚合酶比较好,想选PfuDNA聚合酶,查了查比较好的公司Promega生产的了,现在又查到TaKaRa生产的PyrobestDNA聚合酶,不知道这两种酶哪个比较好一些。请哪位高手指点一下。
DNA连接酶DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将()加到己有的核苷酸片段末端,形成磷酸二酯键。DNA链接酶是链接()的末端,形成磷酸二酯键。
二者的区别在于作用的底物:DNA连接酶与DNA聚合酶都是形成磷酸二酯键。但DNA连接酶连接的是DNA片段(比如冈崎片段);DNA聚合酶是将单个脱氧核糖核苷酸按顺序连接到DNA链上。向左转|向右转
聚合酶的聚合酶分类 123
小超制作6352017-11-05

可分为以下几个类群:(1)依赖DNA的DNA聚合酶;(2)依赖RNA的DNA聚合酶;(3)依赖DNA的RNA聚合酶;(4)依赖RNA的RNA聚合酶。前两者是DNA聚合酶,它使DNA复制链按模板顺序延长。如在原核生物中仅就大肠杆菌中已被发现的就有三种(分别简称为PolⅠ,PolⅡ和PolⅢ等);DNA聚合酶只能在有引物的基础上,即在DNA或RNA引物的3′-OH延伸,这DNA的合成方向记为5′→3′。换言之DNA聚合酶催化反应除底物(αNTP)外,还需要Mg2+ 、模板DNA和引物,迄今细胞内尚无发现可从单体起始DNA的合成。同样,上述(3)和(4)是催化RNA生物合成反应中最主要的RNA合成酶,它们以四种三磷酸核糖核苷(NTP)为底物,并需有DNA模板以及Mn2 及Mg2 的存在下,在前一个核苷酸3′-OH与下一个核苷酸的5′-P聚合形成3′,5′-磷酸二酯键,其新生链的方向也是5′→3′。RNA聚合酶也大量存在于原核和真核生物的细胞中。如大肠杆菌RNA聚合酶分子量4.8×105,由5条多肽链组成,分别命名为α,α,β,β′,和γ,全酶可用α2ββ′λ表示。真核生物RNA聚合酶分子大于5×105,由10~12个大小不等亚基组成。聚合酶除作为自然界生命活动中不可缺少的组分外,在实验室中大多用作生命科学研究的工具酶类之一。向左转|向右转
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