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Excellgen/Gst DNA Polymerase, large fragment/EG-200/20,000 Units
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Description

GstDNAPolymeraseisfunctionallyequivalenttothelargefragmentofBsmPolymeraseIandBstPolymeraseI.RecombinantGstDNAPolymerase(largefragment)has5’->3’polymeraseactivity,butlacks5’->3’exonucleaseand3'→5'exonucleaseactivities.GstDNAPolymerase,LargeFragment,hasastrongstranddisplacementactivityandisactiveinawiderangeoftemperaturesfrom30°Cto63°C,withanoptimumofactivityat60°.ItisanenzymewithhighfunctionalsimilaritytoBstDNAPolymerase,LargeFragment,andcanreplaceitinmostapplicationssuchasrapidamplificationoftraceamountsofDNAtemplatesforsequencingandLAMP.

Applications
  • IsothermalDNAamplificationbythemethodof:
    • Loop-mediatedisothermalamplification(LAMP).
    • Wholegenomeamplification(WGA).
    • Ramificationamplification(RAM).
  • Random-primedDNAlabeling
  • Labelingbyfill-in5'-overhangsofdsDNA
SourceArecombinantE.colistraincarryingthelargefragmentofDNApolymerasegenefromGeobacillusstearoThermophilus
UnitDefinitionOneunitisdefinedastheamountofpolymeraserequiredtocatalyzetheincorporationof10nmolofdNTPintoacid-insolublematerialin30minutesat65°C.
Components
  • GstDNAPolymerase:100,000U/mlin10mMTris-HCl,50mMKCl,1.0mMDithiothreitol,0.1mMEDTA,0.1%TritonX-100,50%Glycerol,pH7.5@25°C
  • 10XReactionBuffer:200mMTris-HCl,100mM(NH4)2SO4,100mMKCl,20mMMgSO4,and1.0%TritonX-100,pH8.8@25°C
QualityControlTheabsenceofendonuclease,nickingactivityandexonucleaseactivityisconfirmedbyappropriatequalitytests.
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-20°C

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蚂蚁淘(www.ebiomall.cn)是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台, 该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁 淘搜索全球供应信息,找到合适的产品后在蚂蚁淘下单,然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、 运输到中国口岸,最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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B.反转录酶具有DNA指导的DNA聚合酶活性 C.反转录酶能水解杂化链中的RNA D.反转录酶具有RNA指导的RNA聚合酶活性 E.反转录所需的引物可为tRNA 点击查看... 查看更多>
耐热DNA聚合酶特点:合理选择耐热DNA聚合酶是PCR成败与否的一个关键因素,如何选择最合适的耐热聚合酶,是进行PCR实验首先要考虑的问题。目前市面上有许多耐热DNA聚合酶,虽然名称各不相同,但主要区别在于特异性、保真性、耐热性、扩增速率、扩增片段 查看更多>
美国GeneCopoeia在发布的Taq DNA聚合酶供应信息,浏览与Taq DNA聚合酶相关的产品或在搜索更多与Taq DNA聚合酶相关的内容。 查看更多>
1. Collected animals can be stored as frozen pellets at -70 degrees. Alternatively, freshly collected animals can be quick frozen in liquid nitrogen. Prechill 查看更多>
2021-08-15
热稳定 DNA 聚合酶除了在 PCR 反应中应用外,还可用来替代测序酶或 Klenow 片段进行双脱氧链终止法测序。它在高温下(70°C) 进行等温链终止反应的能力可减少测序反应中由于模板 DNA 上引物假结合位点与引物退火错配产生的问题,它还可用于富含二级结构模板的测序。本实验源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。 查看更多>
广州东盛生物科技有限公司在发布的Optimus Hotstart Taq DNA聚合酶供应信息,浏览与Optimus Hotstart Taq DNA聚合酶相关的产品或在搜索更多与Optimus Hotstart Taq DNA聚合酶相关的内容。 查看更多>
一. 实验目的: 1、 掌握质粒 DNA 分离,纯化的原理 2、 学习煮沸法快速提取质粒 DNA 的方法 3、 学习 DNA的限制性酶切的基本技术 4 、 学习利用琼脂糖电泳测定 DNA片段的长度 二、 实验原理 在基因工程中, DNA 分子的切割是由限制性内切酶来完成的。限制性内切酶能识别特定的 DNA 序列,在一 查看更多>
【BL1223】zymoresearch DNA聚合酶,DNA提取试剂盒ZYMO。主要研发和生产生物科技实验室使用的各种生物试剂、耗材、仪器。其DNA提取试剂盒系列产品以“快速、简便、超纯”的特点在众多生物科技产品中脱颖而出,独占鳌头。【BL1223】zymoresearch DNA聚合酶。ZYMO RESEARCH生物科技公司位于美国加州OrangeCounty,创建于上世纪90年代初,主要研发和生产生物科技实验室使用的各种生物试剂、 查看更多>
弘业新创抗体技术股份有限公司在发布的Taq DNA聚合酶供应信息,浏览与Taq DNA聚合酶相关的产品或在搜索更多与Taq DNA聚合酶相关的内容。 查看更多>
上海宾智生物科技有限公司在发布的Phusion Hot Start II High-Fidelity DNA Polymerase 的Phusion热启动II高保真DNA聚合酶供应信息,浏览与Phusion Hot Start II High-Fidelity DNA Polymerase 的Phusion热启动II高保真DNA聚合酶相关的产品或在搜索更多与Phusion Hot Start II High-Fidelity DNA Polymerase 的Phusion热启动II高保真DNA聚合酶相关的 查看更多>
碱裂解法从大肠杆菌制备质粒,是从事分子生物学研究的实验室每天都要用的常规技术。为了方便理解,这里罗列一下碱法质粒抽提用到三种溶液:溶液I,50 mM葡萄糖 / 25 mM Tris-Cl / 10 mM EDTA,pH 8.0;溶液II,0.2 N NaOH / 1% SDS;溶液III,3 M 醋酸钾 / 2 M 查看更多>
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DNA聚合酶作用于DNA复制时,用于连接两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键以及碱基互补配对时的氢键。
DNA连接酶作用于基因工程,用于连接两个DNA片段间的磷酸二酯键。
聚合酶的聚合酶分类 123
小超制作6352017-11-05

可分为以下几个类群:(1)依赖DNA的DNA聚合酶;(2)依赖RNA的DNA聚合酶;(3)依赖DNA的RNA聚合酶;(4)依赖RNA的RNA聚合酶。前两者是DNA聚合酶,它使DNA复制链按模板顺序延长。如在原核生物中仅就大肠杆菌中已被发现的就有三种(分别简称为PolⅠ,PolⅡ和PolⅢ等);DNA聚合酶只能在有引物的基础上,即在DNA或RNA引物的3′-OH延伸,这DNA的合成方向记为5′→3′。换言之DNA聚合酶催化反应除底物(αNTP)外,还需要Mg2+ 、模板DNA和引物,迄今细胞内尚无发现可从单体起始DNA的合成。同样,上述(3)和(4)是催化RNA生物合成反应中最主要的RNA合成酶,它们以四种三磷酸核糖核苷(NTP)为底物,并需有DNA模板以及Mn2 及Mg2 的存在下,在前一个核苷酸3′-OH与下一个核苷酸的5′-P聚合形成3′,5′-磷酸二酯键,其新生链的方向也是5′→3′。RNA聚合酶也大量存在于原核和真核生物的细胞中。如大肠杆菌RNA聚合酶分子量4.8×105,由5条多肽链组成,分别命名为α,α,β,β′,和γ,全酶可用α2ββ′λ表示。真核生物RNA聚合酶分子大于5×105,由10~12个大小不等亚基组成。聚合酶除作为自然界生命活动中不可缺少的组分外,在实验室中大多用作生命科学研究的工具酶类之一。向左转|向右转
A、DNA转录形成RNA时需要RNA聚合酶的催化,底物是核糖核苷酸,A错误;
B、酶大部分是蛋白质、少量是RNA,故某种酶的基本组成单位是氨基酸或核糖核苷酸,B错误;
C、内分泌细胞能产生激素,活的细胞能产生酶,故能产生激素的细胞就能产生酶,C正确;
D、酶通常是蛋白质,蛋白质在低温条件下更加稳定,利于保存,而且低温不会使酶失活,因此在最适温度保存没有意义,D错误.
相同点:都能以DNA为模板,从5'向3'进行核苷酸或脱氧核苷酸的聚合反应。
不同点
1、作用底物不同。RNA聚合酶底物是NTP;DNA聚合酶底物是dNTP。
2、RNA聚合酶作用不需要引物,而DNA聚合酶作用需要引物。
3、RNA聚合酶本身具有一定的解旋功能,而DNA聚合酶没有,当需要解开双链的时候要解旋酶和拓扑异构酶的帮助。
4、RNA聚合酶只具有5‘到3’端的聚合酶活性,而DNA聚合酶不仅有5‘到3’端的聚合酶活性,还具有3‘到5’端的外切酶活性。保证DNA复制时候校对,所以复制的忠实性高于转录的。
5、RNA聚合酶通常作用于转录过程;DNA聚合酶通常作用于DNA复制过程
合理选择耐热DNA聚合酶是PCR成败与否的一个关键因素。选择最合适的耐热聚合酶,是进行PCR实验首先要考虑的问题。许多耐热DNA聚合酶的主要区别在于特异性、保真性、耐热性、扩增速率、扩增片段长度等几个指标。
下面是六种不同耐热聚合酶的比较:
Taq:扩增效率最高的耐热DNA聚合酶,能很好的扩增6kb以下的DNA片段。扩增碱基出错率为10-5左右。
Pfu:目前保真度最高的耐热DNA聚合酶,碱基出错率为10-6,但扩增效率低于Taq酶,一般能很好的扩增2kb以下的片段。
TaqPlus:集扩增效率高和保真度好于一身。扩增效率比Pfu高,保真度比Taq好。能有效的扩增10kb以下的片段。
HotstartTaq:经过化学修饰的耐热DNA聚合酶。此酶在常温下,活性被化学基团封闭,要在94℃-95℃加热数分钟才能回复正常活力开始反应,避免了起始循环较低温度下的非特异性扩增,提高了反应的灵敏度和特异性。
LongTaq:具有3’-5’外切酶活性的耐热DNA聚合酶,它不但扩增效率高而且错配率低,对于简单模板可扩增长达40kb的模板,对复杂模板也可扩增长达15kb的片段。
TaqPlatinum:热启动高保真耐热DNA聚合酶。如果对保真度要求很高,而用Pfu扩增有难度,可选用TaqPlatinum,一般扩增长度可达4kb。
根据不同的实验目的选择最合适的酶,

克隆普通长度的目的DNA片段:Taq、TaqPlus
保真度要求较高,片段比较短,如点突变、基因筛选等:Pfu、TaqPlatinum
高保真长片段扩增,如构建基因图谱及分子遗传学研究等:LongTaq、TaqPlus
扩增基因组模板,需要降低背景:HotstartTaq、TaqPlatinum
扩增GC含量较高或二级结构较复杂的模板:TaqPlus、LongTaq、TaqPlatinum
实时荧光定量PCR反应:Taq、HotstartTaq、TaqPlatinum
从菌株或质粒模板,筛选鉴定目的克隆,扩增6kb以下的片段:Taq、TaqPlus、2×TaqPCRMasterMix
模板比较复杂或目的片段丰度低,用普通Taq酶扩增不出条带:2×TaqPCRMasterMix、2×PfuPCRMasterMix
哪里能买到BstDNA聚合酶!哪里的更好用一点?请大家帮忙!
一般来说,以DNA为模板的DNA聚合酶和RNA聚合酶都的结合位点都在DNA上。
但是也有以RNA为模板的DNA聚合酶和RNA聚合酶 (也就是反转录酶和RNA依赖的RNA聚合酶),它们的结合位点在RNA上.
也就是说,模版是谁,结合位点就在谁上。
2.结合位点就是启动合成DNA或者RNA的碱基序列,如RNA聚合酶结合位点是转录起始位点,是一段特殊的位于编码基因上游的DNA序列.这段DNA序列可以结合RNA聚合酶,从而起始转录过程.经典的RNA聚合酶结合位点是TATA box.
TATA box是编码序列前的4个碱基.在大多数生物的基因前面都有TATA着4个碱基序列的存在,它就是一个RNA聚合酶结合位点.
DNA聚合酶有特异性的,DNA聚合酶只能催化核苷酸与核苷酸短链的连接,且具有方向性,由DNA5'端点开始复制到3'端的。
DNA连接酶DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将()加到己有的核苷酸片段末端,形成磷酸二酯键。DNA链接酶是链接()的末端,形成磷酸二酯键。
我要P一个3kb左右的目的基因,需要一个保真性高的酶,因为后面要测序,而且我的两个引物的GC含量相差也很大,还需要一个载体连接去进行筛选,这个载体要4kb以上的,因为要和我的目的基因大小相差大一点的,而且这个载体上还要有多个切割位点,好让我切割下来,与最终的质粒相连。
最近,我看了很多这方面的资料,但是我对这个方面不是很了解,所以现在搞得头昏眼花的,不知道该选什么酶和载体,希望大家多多帮忙
在此十分感谢
最近忽然对我们平常用的DNA聚合酶发生研究兴趣,想问下园子里面有没有谁实验室有那些个hot-start、Pfu之类的DNA聚合酶的重组质粒载体?这些酶的活性或是保真性应该强于我们平时使用的Taq酶,谁要是很幸运的找老外讨到了这些重组的质粒载体,PM我,谈谈交换的条件,呵呵!
观察以下dna结构图,判断dna聚合酶能够与哪一个结合
可分为以下几个类群:(1)依赖DNA的DNA聚合酶;(2)依赖RNA的DNA聚合酶;(3)依赖DNA的RNA聚合酶;(4)依赖RNA的RNA聚合酶。前两者是DNA聚合酶,它使DNA复制链按模板顺序延长。如在原核生物中仅就大肠杆菌中已被发现的就有三种(分别简称为PolⅠ,PolⅡ和PolⅢ等);DNA聚合酶只能在有引物的基础上,即在DNA或RNA引物的3′-OH延伸,这DNA的合成方向记为5′→3′。换言之DNA聚合酶催化反应除底物(αNTP)外,还需要Mg2+ 、模板DNA和引物,迄今细胞内尚无发现可从单体起始DNA的合成。同样,上述(3)和(4)是催化RNA生物合成反应中最主要的RNA合成酶,它们以四种三磷酸核糖核苷(NTP)为底物,并需有DNA模板以及Mn2 及Mg2 的存在下,在前一个核苷酸3′-OH与下一个核苷酸的5′-P聚合形成3′,5′-磷酸二酯键,其新生链的方向也是5′→3′。RNA聚合酶也大量存在于原核和真核生物的细胞中。如大肠杆菌RNA聚合酶分子量4.8×105,由5条多肽链组成,分别命名为α,α,β,β′,和γ,全酶可用α2ββ′λ表示。真核生物RNA聚合酶分子大于5×105,由10~12个大小不等亚基组成。聚合酶除作为自然界生命活动中不可缺少的组分外,在实验室中大多用作生命科学研究的工具酶类之一。
连结酶是最后把dna粘起来
聚合酶就是多功能的dna的制作机器